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范金水
作品数:
6
被引量:11
H指数:2
供职机构:
第四军医大学
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
生物学
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合作作者
药立波
第四军医大学口腔医学系
白玉杰
第四军医大学唐都医院
季少平
第四军医大学
苏成芝
第四军医大学
陈健
第四军医大学口腔医学系
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实用口腔医学...
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年份
4篇
1999
1篇
1998
1篇
1992
共
6
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信号分子GRF的PH结构域基因片段的克隆与表达
被引量:3
1999年
目的:从大鼠脾脏克隆信号分子guanine-nucleotide-releasingfactor(GRF)的pleckstrinhomology(PH)结构域基因并进行谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达,为进一步寻找其新配基、研究其功能打下基础.方法:采用一步法从大鼠新鲜脾组织中提取总RNA,反转录合成cDNA,PCR方法扩增目的基因片段,并克隆到载体pUC19中.引物末端标记后,以双脱氧终止法测序.然后再克隆到表达载体pGEX-4T-1中作GST融合表达.结果:信号分子GRF的PH结构域基因完全正确,内部不含终止码.并在表达载体pGEX-4T-1中获得融合表达.结论:从组织细胞中克隆PH结构域基因是可行的方法,可在大肠杆菌中以GST融合蛋白的形式表达.
季少平
药立波
白玉杰
范金水
苏成芝
关键词:
信号分子
PH结构域
克隆
基因表达
GRF
托幼机构预防性消毒与甲型或乙型肝炎感染相关性的研究
1992年
对西安市12所幼儿园进行甲型和乙型肝炎感染情况调查与预防性消毒水平记分评估。结果表明,甲型肝炎感染率与预防性消毒水平呈负相关,提高预防性消毒水平可降低托幼机构甲肝感染率。
李远贵
王瑾
范金水
王珊珊
陈友绩
关键词:
甲型肝炎
乙型肝炎
Smad2基因MH2结构域表达载体的构建和其在大肠杆菌中的表达
1999年
目的:构建Smad2基因MH2结构域原核融合表达载体,在大肠杆菌中表达MH2结构域,为制备抗MH2抗体,研究Smad2基因和MH2结构域的功能奠定基础。方法:用pGEX-4T-2表达载体构建pGEX-4T-2/S2MH2原核融合表达载体,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达GST-MH2融合蛋白,100g/LSDS-PAGE检测表达产物。结果:重组载体转化DH5α,经IPTG诱导4h后,在100g/LSDS-PAGE上出现一条新的蛋白条带,相对分子质量(Mr)约为49×103。结论:构建成功pGEX-4T-2/S2MH2融合表达载体,在大肠杆菌DH5α内表达获得GST-MH2融合蛋白。
陈健
牛忠英
药立波
范金水
关键词:
SMAD2基因
MHZ
基因表达
大肠杆菌
牙髓
信号分子PLCγ-2PH结构域与PKC的结合
被引量:1
1999年
目的: 从大鼠脾脏克隆信号分子PLCγ2 氨基端PH 结构域基因, 并进行GST 融合表达。检测信号分子PLCγ2 氨基端PH 结构域与PKC 的结合, 为进一步研究其在信号转导中所介导的功能、寻找其新配基奠定基础。方法:采用异硫氰酸胍变性和酚氯仿抽提的方法, 从大鼠新鲜脾组织中提取总RNA, 紫外线定量后,反转录合成cDNA,以PCR 扩增目的基因片段,双酶切后定向克隆到载体p UC19 中。将引物末端用同位素([r - 32p]ATP) 标记后,以双脱氧终止法测序;再将基因片段定向克隆到表达载体pGEX4T1 中。以IPTG 在低温条件下(26 ℃) 诱导1 h ,进行GST融合表达。用agarose beads“锚定”,并纯化表达的GSTPH 融合蛋白。将Jurkat 细胞的裂解液与上述纯化的融合蛋白共孵育,以Western blot 检测PH 结构域与PKC 的结合。结果: 信号分子PLCγ2 的PH 结构域基因完全正确,内部不含终止码,为一开放读框。在表达载体pGEX4T1 中得到融合表达,表达产物为可溶性的。Western blot 检测到PH 结构域与PKC 的结合。结论:从组织细胞中克隆PH
季少平
药立波
白玉杰
范金水
王吉村
苏成芝
关键词:
信号分析
PH结构域
PKC
转化生长因子β的信号转导
1999年
转化生长因子β(TGF-β)是一种对细胞的生长、分化和多种生理、病理过程起重要调节作用的细胞因子。本文综述了近年来国外在TGF-β跨膜信号转导途径方面所取得的研究进展。介绍了TGF-β受体的结构和作用方式,并着重介绍了Smads基因家族的发现及其在TGF-β的信号转导途径中的作用。
陈健
牛忠英
药立波
范金水
关键词:
转化生长因子
信号转导
SMADS
抗人精浆蛋白单链抗体基因的构建及序列分析
被引量:7
1998年
目的:构建抗人精浆蛋白的单链抗体基因,可为进一步构建、表达抗人精浆蛋白单链抗体/羧肽酶A融合蛋白,用于前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法:利用加端PCR技术,在已克隆的抗人精浆蛋白单克隆抗体VH和Vκ基因两端加上限制性酶切位点,再分别克隆入载体pUC19-linker中,构建VH-linker-Vκ形式的E4B7单链抗体基因。利用全自动荧光测序仪测定其序列,采用PC/Gene软件与已知的VH和Vκ基因进行核苷酸序列的同源性比较,并推导其编码的氨基酸序列。结果:E4B7单链抗体基因全长为741bp,为一开放读框,编码247个氨基酸,与已知的抗人精浆蛋白单克隆抗体VH和Vκ基因完全同源。VH和Vκ间有45bp的linker序列,推导的氨基酸序列为(Gly4Ser)3,与设计的序列相符。结论:构建成功序列正确的抗人精浆蛋白单链抗体基因,为构建。
武国军
郝晓柯
白玉杰
药立波
张盈华
范金水
季少平
关键词:
单链抗体
基因克隆
测序
前列腺肿瘤
精浆蛋白
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