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许复华
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供职机构:
中国协和医科大学
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李彬
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蔡英林
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李彬
中国医学科学院北京协和医学院血...
李文平
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1999
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抗人纤维蛋白单链抗体重链可变区的人源化
1999年
目的人源化抗人纤维蛋白单链抗体的重链,降低人抗鼠抗体反应。方法从基因文库中挑选到与鼠源抗人纤维蛋白单链抗体重链(VH-8E5)同源性71.8%的人源免疫球蛋白HUMHCH109重链(VH)序列,作为人源化改造VH-8E5的框架。人工合成人源化VH-8E5片段,用连接酶连接成完整的人源化VH-8E5,构建表达载体pOPE101-VH-8E5。转化JM109后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达。结果经聚丙烯酰胺电泳和ELISA证明表达产物相对分子质量30×103左右,有特异性识别和结合人纤维蛋白能力,是亲本抗体ScFv-8E5活性的4/5左右。人源化ScFv-8E5表达产量为转化菌总蛋白的11.2%。结论人源化VH-8E5仍具有特异性识别人纤维蛋白的活性。
李文平
蔡英林
许静
许静
李彬
李彬
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单链抗体
免疫原性
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