贠炳岭
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家肉鸡产业技术体系建设专项哈尔滨市科技攻关计划项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA方法的建立
- 本文为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒的方法,以原核表达的HLJ09MDJ-1(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-...
- 贠炳岭YUN Bing-lingLIU Wen刘文LI De-long李德龙QIN Li-ting秦立廷L1U Zai-si刘在斯WU Guan吴关QI Xiao-le祁小乐WANG Yong-qiang王永强GAO Hong-lei高宏雷高玉龙GAO Yu-longWANG Xiao-mei王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒抗体检测双抗体夹心法
- 文献传递
- 禽白血病病毒衣壳蛋白p27基因的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 从J亚群禽白血病病毒(ALV-J)HB09JY03株感染的DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出约720bp的gag-p27基因片段,克隆至pMD18-T载体。鉴定正确后,将该片段克隆至pET-30a(+)原核表达载体,经IPTG诱导表达。表达产物经His Trap TMHP纯化后,测蛋白浓度达到9mg/mL。用兔抗自然p27蛋白阳性血清进行Western blot检测,表明重组p27蛋白有抗原反应活性。免疫新西兰大白兔后,产生的抗体与禽白血病全病毒抗原可以发生特异性反应。所制备的重组p27蛋白和多克隆抗体将在ALV的抗原分析、血清学诊断等方面有着重要的应用价值。
- 李德龙刘在斯贠炳岭吴关高玉龙秦立廷祁小乐王永强高宏雷刘思当王笑梅
- 关键词：禽白血病P27基因原核表达多克隆抗体
- 禽白血病病毒群特异性抗原单克隆抗体的制备与鉴定被引量：2
- 2012年
- 为制备禽白血病病毒(ALV)群特异性抗原的单克隆抗体(MAb),本研究从ALV-J病毒株感染DF-1细胞的冻融裂解液中提取DNA,通过PCR方法扩增出ALV群特异性抗原p27基因,并将其克隆至pMD18-T载体中,酶切鉴定后进行序列测定和分析。最后将p27基因亚克隆至载体pET-30a(+)中,转化受体菌BL21,IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测获得融合蛋白。经过western blot检测,表达的蛋白具有良好的反应原性。将纯化的p27蛋白作为抗原,免疫7周龄BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得5株能稳定分泌特异性MAb的杂交瘤细胞株。5株MAb与纯化的p27蛋白以及不同亚群ALV可以发生特异性反应。所制备的MAb为禽白血病的诊断方法研究奠定了基础。
- 贠炳岭李德龙胡晓亮刘在斯秦立廷吴关刘文祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：禽白血病病毒P27蛋白原核表达单克隆抗体
- 禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：5
- 2012年
- 为建立一种快速有效的检测禽白血病病毒(ALV)的方法,以原核表达的HB09JY03(ALV-J)p27蛋白制备的单克隆抗体作为包被抗体,p27蛋白制备的多克隆抗体作为检测抗体建立了检测ALV的双抗体夹心ELISA(DAS-ELISA)方法。该方法对p27的最小检出量为1.25ng/mL,且与禽类常见的病毒鸡传染性支气管炎病毒、马立克病病毒、鸡传染性喉气管炎病毒等无交叉反应。动物感染试验结果表明,用该方法可在感染动物12d后有效检测泄殖腔分泌物中的禽白血病病毒。利用该方法检测了491份蛋清样品和180份肛拭子样品,与PCR方法的符合率分别为96.5%和93.8%。证实,该方法具有方便、快速、敏感等优点,该方法的建立为ALV的早期诊断及种鸡场的净化提供了有效工具。
- 贠炳岭刘文李德龙秦立廷刘在斯吴关祁小乐王永强高宏雷王笑梅高玉龙
- 关键词：禽白血病病毒单克隆抗体多克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 我国部分地区种鸡禽肺病毒感染的血清学调查被引量：12
- 2012年
- 禽肺病毒（Avian pneumovirus,APV）又称火鸡鼻气管炎病毒（Turky rhinotracheitis virus,TRTV）[1]。禽肺病毒属于副黏病毒科肺病毒亚科偏肺病毒亚属[2]。已经确定禽肺病毒可引起火鸡呼吸道疾病和产蛋量下降。虽然广泛认为禽肺病毒是鸡肿头综合征的因素之一。
- 贠炳岭刘在斯吴关李久宽秦立廷祁小乐王永强高宏雷高玉龙王笑梅
- 关键词：血清学调查种鸡鼻气管炎病毒鸡呼吸道疾病鸡肿头综合征产蛋量下降
- 蛋鸡J亚群禽白血病病毒3′非编码区序列特征分析被引量：8
- 2012年
- 蛋用型鸡虽在试验条件下可以感染ALV-J,但自然感染时很少引起发病。然而,近年来在中国蛋鸡群中ALV-J发病严重,本研究对2008年以来ALV-J蛋鸡分离株的3′非编码区(3′UTR)进行了系统的分析。结果表明,89.5%(17/19)的ALV-J蛋鸡分离株的3′UTR出现了205bp的缺失,94.7%(16/17)ALV-J蛋鸡分离株保留了完整的E元件。84.2%(16/19)的ALV-J蛋鸡分离株的U3区序列与肉鸡分离株的相似性低于92.5%,所有转录调控元件高度保守。ALV-J蛋鸡分离株的E元件和U3区均出现了多个碱基的突变。这些结果表明,ALV-J蛋鸡分离株的E元件和U3区正在迅速的演化,明显不同于肉鸡分离株的序列特征。这些发现有助于更好地了解ALV-J引起蛋鸡群发病的致病机理。
- 高玉龙贠炳岭秦立廷潘伟王永强高宏雷祁小乐王笑梅
- 关键词：J亚群禽白血病病毒分子特征
- 种鸡禽肺病毒感染的血清学调查
- 禽肺病毒(Avian pneumovirus,APV)感染火鸡称为火鸡支气管炎(TRT),能够感染火鸡上呼吸道,并继发细菌感染。除感染火鸡以外,APV与鸡的肿头综合征(SHS)有关,能够引起蛋鸡产蛋量短期下降和轻微呼吸道...
- 贠炳岭YUN Bing-lingLIU Zai-si刘在斯WU Guan吴关LI Jiukuan李久宽QIN Li-tin秦立廷QI Xiao-le祁小乐WANG Yong-qiang王永强GAO Hong-lei高宏雷高玉龙GAO Yu-longWANG Xiao-mei王笑梅
- 关键词：禽肺病毒抗体检测血清学流行病学调查
- 文献传递
- 3′-U3区碱基突变不影响禽白血病病毒的体外复制能力被引量：1
- 2015年
- 为探索近年蛋鸡分离株中出现规律性突变的J群禽白血病病毒(ALV-J)3′-U3区对病毒体外复制能力的影响,以ALV-J原型毒株HPRS-103为骨架,利用融合PCR技术构建含蛋鸡分离株SD09DP04的3′-U3区的嵌合病毒的cDNA克隆。嵌合病毒的感染性克隆与原型毒株HPRS-103的感染性克隆分别在脂质体介导下转染DF-1细胞,对收获的病毒分别用间接免疫荧光试验、禽白血病抗原和反转录酶试剂盒检测,结果表明成功拯救到2株病毒。对拯救的2株病毒,进行其3′-U3区启动子活性和增强子活性的检测,以及复制动力学比较分析结果显示,出现特异性规律性突变的U3区对于原毒株的体外复制能力无显著影响。所构建的3′-U3区的嵌合病毒的成功拯救对于进一步探索近年ALV-J流行毒株其3′-U3区出现的规律性突变的功能及意义奠定了基础。
- 高雁怩高奇李晓菲贠炳岭祁小乐王永强刘长军崔红玉张艳萍高宏雷王笑梅高玉龙
- 关键词：嵌合病毒J亚群禽白血病病毒生物学特性
- 野鸭源禽网状内皮组织增生症病毒的分离与鉴定被引量：5
- 2013年
- 利用扩增禽网状内皮组织增生症病毒(REV)长末端重复序列(LTR)的特异性引物作为检测引物,对采集于吉林省某地健康野鸭的脏器样品进行PCR检测。阳性样品经DF1培养增殖,进行病毒的分离,经PCR和间接免疫荧光(IFA)方法鉴定,确定分离到2株REV,分别来自于针尾鸭和绿头鸭,将分离病毒分别命名为DBYR1101和DBYR1102。克隆2个病毒株的主要保护性抗原基因gp90,并进行序列分析。结果显示,2个分离株gp90基因氨基酸相似性为99.5%;DBYR1101 gp90基因与REV 3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95.7%、94.2%和98.2%;DBYR1102 gp90基因与REV 3个型的代表株170A、SNV和CSV的氨基酸相似性分别为95.2%、93.7%和97.7%;与中国早期南方分离株HA9901的氨基酸序列相似性分别为94.7%和94.2%;与中国北方分离株氨基酸序列相似性为99.2%～100%。核苷酸遗传进化分析表明,2个野鸟源REV分离株与现有的东北分离株亲缘关系较近,趋于形成1个北方分离群;与SNV株亲缘关系最远;与170A株亲缘关系较远;与美国和中国台湾地区的某些分离株相似性较高。该研究首次自野鸭体内分离到REV,丰富了REV流行病学资料,同时提醒我们重视野生鸟类迁徙在疾病传播中所扮演的角色,为深入研究REV致病机制、免疫抑制机制等奠定基础。
- 姜莉莉祁小乐高玉龙邓小芸柴洪亮张礼洲贠炳岭秦立廷王永强高宏雷王笑梅华育平
- 关键词：野鸟禽网状内皮组织增生病病毒
- 蛋鸡J亚群禽白血病病毒3'非编码区序列特征分析
- 前言从2004年开始,我国地方品种鸡出现ALV-J感染病例的报道,随后J亚型禽白血病在我国蛋鸡群中出现。尤其是自2007年开始,我国各地陆续报道一种严重危害蛋种鸡和商品蛋鸡的血管瘤型白血病。为了研究蛋鸡群感染ALV-J的...
- 高玉龙贠炳岭秦立廷潘伟王永强高宏雷祁小乐王笑梅
- 文献传递
