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胶质瘤干祖细胞分化抑制、自噬活性与转分化的研究: 第一部分弟一部分胶质瘤干祖细胞分化抑制的超微结构机制 [目的]在先前的研究中已经见到，体外培养的胶质瘤干祖细胞(GSPCs)与神经干祖细胞(NSPCs)相比的最大不同点是GSPCs始终处于分化抑制状...; 赵耀东; 关键词：血管内皮细胞超微结构

脑源性神经生长因子（BDNF）与神经性疾病被引量：3: 2005年; BDNF是一种重要的神经生长素，通常以二聚体形式存在和发挥作用；其亲和力最高的受体为TrkB，二者结合后引起一系列的酶促反应，从而产生效应。近年来发现它在老年痴呆症、帕金森病、脑损伤、精神疾病以及学习记忆等病理生理过程中起到重要作用。鉴于BDNF在多种神经疾病中的作用，目前很多学者正致力于BDNF治疗疾病方面的研究，并已经取得了一定的成绩。; 赵耀东缪竞诚; 关键词：BDNF AD 精神疾病学习记忆

人抑瘤素M基因重组逆转录病毒载体的构建及鉴定被引量：1: 2007年; 目的构建携带人Oncostatin M（OSM，抑瘤素M）基因的逆转录病毒载体。方法用DNA重组技术，以pcDNA3．1finyc-his（-）A-hOSM重组质粒为模板PCR扩增人OSM基因，酶切连接到带有GFP标记的逆转录病毒载体pEGZ／MCS．HA上，连接产物转化大肠杆菌DH5a，筛选阳性克隆，抽提质粒，用PCR法、限制性内切酶EeoRI和BamHI双酶切法及测序鉴定。然后以脂质体转染法，将重组的逆转录病毒载体与辅助质粒HIT456、HIT60共同转染入包装细胞系293T以包装病毒。结果构建了重纽人抑瘤素M基因逆转录病毒载体，PCR产物电泳可见约750bp处有特异性条带，EcoRI和BamH，双酶切，电泳出现两个条带，约750bp处亦有相应条带。核酸测序结果与GenBank中所报道的人抑瘤素M基因的CDS序列完全一致。转染293T细胞在倒置荧光显微镜下可见绿色荧光，且细胞有病变。提示构建携带人OSM基因的逆转录载体成功。结论携带人抑瘤素M基因的重组逆转录病毒载体pEGZ／MCS-HA-hOSM成功构建为此基因的临床应用和实验研究奠定了基础。; 苗莉赵耀东杨伟明叶建新谢宇锋盛伟华杨吉成缪竞诚张日朱南康; 关键词：抑瘤素M 逆转录病毒载体基因重组

腺病毒介导的人ING4基因诱导C6鼠胶质瘤细胞凋亡被引量：4: 2007年; 目的:研究肿瘤抑制基因人ING4(inhibitor of growth family,member4)对C6鼠胶质瘤细胞的促凋亡作用。方法:将携有绿色荧光蛋白(GFP)腺病毒空载体Ad及重组腺病毒Ad-hING4-His(由本科室构建)分别感染C6细胞,RT-PCR法检测hING4的转录,Western-blotting法检测目的蛋白的表达。并观测hING4基因表达对C6胶质瘤细胞的作用,用MTT法绘制生长曲线,计算抑瘤率。再取重组腺病毒Ad-hING4-His及空腺病毒Ad作用后的C6细胞分别行激光共聚焦显微镜观察凋亡小体、透射电镜观察亚细胞结构的变化,抽提基因组DNA行琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪检测。结果:Ad-hING4-His感染C6细胞后,RT-PCR及Western-blotting结果提示有目的基因的转录和表达。hING4基因表达可以显著抑制C6细胞生长。激光共聚焦观察可见明显核断裂、透射电镜可见实验组细胞呈凋亡表现、基因组DNA电泳呈现梯形条带,流式细胞仪检测有明显AP峰,凋亡率达18.1%。结论:hING4可以通过促进细胞凋亡作用而显著抑制C6细胞的增殖和生长。; 赵耀东缪竞诚张海峰苗莉盛伟华谢宇峰杨吉成; 关键词：ING4 腺病毒载体凋亡

人脑源性神经生长因子(hBDNF)基因在CHO细胞的稳定表达及功能研究: 2007年; 目的将人脑源性神经生长因子(hBDNF)基因转染CHO细胞后,建立稳定表达体系,并检测培养上清中所表达的hBDNF的生物学活性。方法采用脂质体介导的真核细胞转染,运用RT-PCR,Western blot及MTT法进行检测分析。结果转染hBDNF基因的CHO细胞可表达hBDNF mRNA,上清中可检出hBDNF蛋白的存在,且此上清具有促进PC12细胞生长和分化的功能。结论成功地建立了hBDNF在CHO细胞中的稳定表达体系,转染hBDNF基因的CHO细胞所分泌的hBDNF蛋白具有较高的生物学活性,为进一步研究BDNF的生物学功能和开展生物治疗奠定了实验基础。; 赵耀东杨吉成谢宇峰盛伟华张海峰苗莉缪竞诚; 关键词：HBDNF

体外培养的人脑肿瘤干/祖细胞与人神经干/祖细胞超微结构的异同分析: 目的:比较体外培养的脑肿瘤干祖细胞(brain stem/progenitorcells, BTSPC)与神经干祖细胞(neural stem/progenitorcells, NSPC)的超微结构的异同。方...; 赵耀东黄强王爱东董军兰青张天一秦正红; 关键词：脑肿瘤超微结构电子显微镜体外培养; 文献传递

人lambda1和epsilon干扰素基因在WI-38细胞中的表达及其活性比较(英文)被引量：2: 2007年; 研究新型干扰素hIFN-λ1和hIFN-ε基因在WI-38细胞中的表达及其生物学活性,并进行对比分析。构建His重组融合表达载体pcDNA3.1A-hIFN-λ1-His和pcDNA3.1A-hIFN-ε-His,脂质体法分别转染WI-38人胚肺细胞。采用微量细胞病变抑制试验研究和比较rhIFN-λ1-His和rhIFN-ε-His的抗病毒活性;MTT法检测其对肿瘤细胞生长的影响; RT-PCR相对定量法检测其诱导WI-38和SHG-44细胞产生人MxA抗病毒蛋白的活性。结果表明rhIFN-λ1-His抗病毒活性、抗肿瘤细胞增殖活性和诱导产生MxA蛋白活性要强于rhIFN-ε-His。hIFN-λ1和hIFN-ε干扰素的抗病毒效应的分子机理均与诱导细胞产生MxA抗病毒蛋白相关。为进一步探讨和比较hIFN-λ1和hIFN-ε的生物学活性及其作用机制奠定了一定的基础。; SARODE Bhushan盛伟华谢宇锋赵耀东缪竞诚杨吉成; 关键词：抗病毒抗增殖

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赵耀东