辛奇
- 作品数：33 被引量：43H指数：4
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- 一种结核杆菌融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白，是序列表中序列2的蛋白质，并提供了其制备方法和制备疫苗的应用。本发明所提供的构建并表达纯化去标签融合蛋白ESAT6-Ag85B-Mpt64<Sub>190-198</Sub>-Mtb8....
- 祝秉东辛奇胡丽娜王秉翔达泽蛟牛红霞刘万波唐克峰高娃景涛
- 细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶的生物信息学分析及其表达与活性检测被引量：4
- 2014年
- 目的利用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫果糖二磷酸醛缩酶(EgFBPA)的结构和功能特征,并利用基因工程技术进行克隆、表达、纯化,获得活性蛋白。方法利用多种生物信息学软件分析EgFBPA的拓扑结构、生物学以及免疫功能特征;用限制性内切酶EcoRⅠ和HandⅢ对重组质粒FBPA/P-blue酶切FBPA目的基因片段,亚克隆入表达载体pET30a,筛选重组克隆并测序,将测序正确的重组质粒转化入BL21(DE3)感受态细菌,用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白;用Ni-NTA柱纯化重组蛋白,并建立酶反应体系,通过NADH(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)的变化测定重组蛋白EgFBPA的酶催化活性。结果 EgFBPA基因全长1 092bp,编码363个氨基酸,软件分析其等电点(pI)为8.34,分子质量单位为39.8035ku。亚细胞定位分析该蛋白为无信号肽的细胞质蛋白,属于稳定蛋白;结构域和保守功能域的预测,FBPAI的激活位点为VYLEGTLLKPN(222aa-232aa),并含有TIMβ/α筒状结构(6aa-346aa),二级结构以α-螺旋和环状结构居多,无跨膜区,有10种类型的活性位点。经PCR、双酶切和测序证实pET30a(+)-EgFBPA构建成功。SDS-PAGE检测重组质粒表达产物分子质量与预期相符,且具有可溶性;Bradford法测定蛋白浓度为(0.50±0.02)mg/ml。酶活性检测Ni-NTA柱纯化后的FBPA具有良好的酶促活性,且存在量效关系。结论生物信息学预测EgFBPA可能是潜在的药物靶点。重组质粒Pet30a(+)-FBPA在大肠埃希菌BL21中成功表达,表达产物具有酶促活性,为进一步研究其生物学功能及药物靶点奠定了基础。
- 王绚吴巨龙吕刚苏娟辛奇鲁俊张思王猛孙萃平逯召莲何黎黎景涛
- 关键词：细粒棘球绦虫蛋白纯化分子克隆生物信息学
- 细粒棘球绦虫抗原cC1重组蛋白及其可溶性表达方法和纯化方法
- 本发明公开了细粒棘球绦虫抗原cC1重组蛋白，所述细粒棘球绦虫抗原cC1重组蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。并实现了该重组蛋白的高效可溶性表达，然后使用HisPur Cobalt（Clontech）亲和层析...
- 景涛辛奇高海军袁苗苗李焕平宋晓霞孙旭东鲁俊那斌吕薇
- 一种结核杆菌融合蛋白HspX-Mtb8.4及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白HspX-Mtb8.4，是序列表中序列2的蛋白质。本发明的有益效果是：发明选用的结核分枝杆菌Mtb8.4是从结核杆菌培养滤液中纯化分离的一种低分子治疗蛋白抗原，具有较强的细胞免疫活性，能诱...
- 祝秉东刘万波谭继英胡丽娜王秉翔吴玉敏辛奇朱丽林孝发
- 文献传递
- 一种结核杆菌融合蛋白Mtb8.4-HspX及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种结核杆菌融合蛋白Mtb8.4-HspX，是序列表中序列2的蛋白质。本发明的有益效果是：发明选用的结核分枝杆菌Mtb8.4是从结核杆菌培养滤液中纯化分离的一种低分子治疗蛋白抗原，具有较强的细胞免疫活性，能诱...
- 谭继英刘万波祝秉东胡丽娜王秉翔吴玉敏辛奇朱丽林孝发
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- 一种聚肌胞联合二甲基三十六烷基铵混合佐剂在制备结核亚单位疫苗中的应用
- 本发明公开了一种聚肌胞联合二甲基三十六烷基铵混合佐剂在制备结核亚单位疫苗中的应用。本发明的有益效果为：本发明提供的混合佐剂DDA/PolyI:C，能够有效增强融合蛋白AMM的抗原特异性IFN-γ的分泌水平，减轻H37Rv...
- 祝秉东达泽蛟牛红霞辛奇于红娟李青章国平李志刘万波张颖
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- 细粒棘球绦虫转二羟基丙酮激酶重组蛋白、其可溶性表达方法及其纯化方法和应用
- 本发明提供细粒棘球绦虫转二羟基丙酮激酶重组蛋白，所述细粒棘球绦虫转二羟基丙酮激酶重组蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。本发明还提供了一种可溶性表达方法，实现了细粒棘球绦虫转二羟基丙酮激酶重组蛋白的高效可溶性...
- 景涛辛奇宋晓霞袁苗苗李焕平高海军孙旭东鲁俊那斌吕薇
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- 细粒棘球绦虫TSP1重组蛋白及其可溶性表达方法和纯化方法
- 本发明提供细粒棘球绦虫TSP1重组蛋白，所述细粒棘球绦虫TSP1重组蛋白的氨基酸序列为序列表SEQ ID No.2。本发明还提供了一种可溶性表达方法，实现了TSP1重组蛋白的高效可溶性表达：表达的重组蛋白质大部分为可溶性...
- 景涛辛奇孙旭东袁苗苗李焕平高海军宋晓霞鲁俊那斌吕薇
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- 结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用
- 本发明公开了结核分枝杆菌融合蛋白Mtb10.4-Hsp16.3的构建、表达和纯化方法及其应用，将Mtb10.4和Hsp16.3基因进行PCR扩增并依次插入到克隆载体的多克隆位点中,构建重组载体；然后在大肠杆菌中表达；最后...
- 祝秉东牛红霞胡丽娜李青王秉翔达泽蛟辛奇万艳马维民
- 漆树酸作为棘球蚴甘油醛三磷酸脱氢酶的抑制剂和作为治疗包虫病药物的应用
- 本发明公开了漆树酸作为棘球蚴甘油醛三磷酸脱氢酶的抑制剂和作为治疗包虫病药物的应用。本发明首次公开了漆树酸是棘球蚴甘油醛三磷酸脱氢酶的抑制剂及首次公开漆树酸在抗包虫病的应用，拓展了漆树酸的应用，同时开发了一种新的治疗包虫病...
- 景涛刘焕香袁苗苗郭婧筠刘勋辛奇鲁俊李焕平那斌李菲高海军宋晓霞
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