陆惠民
- 作品数：54 被引量：192H指数：9
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- IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠Th1/Th2细胞因子表达水平的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 观察白细胞介素 12 (IL - 12 )对伯氏疟原虫 (P.b)红内期感染小鼠 Th1/ Th2细胞因子表达水平的影响 ,探讨 IL- 12介导 Th1/ Th2免疫偏移在抗 P.b红内期感染中的免疫调节作用。方法 BAL B/ c小鼠接种 5× 10 5个感染 P.b的红细胞 ,同时分别给予 0 .0 3μg/ d或 0 .15 μg/ d IL- 12处理 ,用 EL ISA方法检测 P.b感染小鼠血清或脾淋巴细胞体外培养上清中细胞因子 IFN-γ、IL - 4表达水平的动态变化。结果 0 .0 3μg/ d IL - 12处理组小鼠接种感染后第 7天取脾淋巴细胞体外经PHA或可溶性抗原 s Ag刺激培养产生的 IFN- γ水平较感染对照组显著升高 ,IL- 4水平显著下降 ,而 0 .15 μg/ d IL- 12处理组脾淋巴细胞产生的 IFN- γ及 IL- 4水平均较感染对照组显著下降。在感染后第 3天 ,0 .0 3μg/ d或 0 .15μg/ d IL - 12处理组小鼠血清中 IFN-γ均已出现 ,第 5天达高峰 ,但感染后第 7天 0 .15 μg/ d IL- 12处理组血清中 IFN- γ迅速下降 ,甚至低于感染对照组及 0 .0 3μg/ d IL- 12处理组 ,感染对照组直到感染后第 7天血清中方可检测到 IFN- γ水平。结论 适当低剂量 IL- 12诱导 CD4 + Th1免疫应答 ,产生细胞因子 IFN-γ,以诱导抗 P.b红内期感染的免疫保护作用 ;而较大剂量 IL - 12抑制机体抗感染?
- 陈姝陆惠民高琪张山鹰唐学恒孙臻安
- 关键词：白细胞介素12伯氏疟原虫TH1/TH2细胞因子
- 用聚合酶链反应技术检测间日疟原虫感染的研究被引量：4
- 1999年
- 用 ５ 种不同的 Ｐ．ｖ．引物分别对间日疟原虫 Ｄ Ｎ Ａ 进行 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增，在比较和分析各引物 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增结果的敏感性和特异性的基础上，筛选出一对根据间日疟原虫线粒体细胞色素 Ｃ氧化酶基因序列设计的引物为最佳引物，其检测敏感度可达到每μｌ血中 ０．２４ 个疟原虫。同时还对血样本处理方法进行了改进，从而建立了一种更为简捷、快速、经济且适用于现场应用的间日疟原虫 Ｐ Ｃ Ｒ检测方法。并利用该方法对２３８ 例门诊发热病人滤纸干血滴样本进行检测，与传统镜检法进行了比较。结果显示， Ｐ Ｃ Ｒ 方法对间日疟的误诊率（０）和漏诊率（１．７％ ）明显比镜检的误诊率（４．２％ ）和漏诊率（４．２％ ）低，具有比常规镜检法更敏感、特异的优点。
- 夏惠陆惠民高琪
- 关键词：间日疟原虫聚合酶链反应引物疟疾
- 白细胞介素12在伯氏疟原虫红细胞内期感染中的免疫调节作用被引量：5
- 2004年
- [目的 ]探讨白细胞介素 12 (IL 12 )在伯氏疟原虫 (P berghei)红细胞内期感染中的免疫调节作用。[方法 ]BALB/c小鼠接种 5× 10 5个感染P berghei的RBC ,分别以不同剂量 ( 0 0 1、0 0 3、0 10和 0 15 μg/d)IL 12 ,或分别在不同给药时间 (感染前 1d、感染同时、感染后第 3d)给予 0 0 3 μg/dIL 12 ,各组均连续用药 6d。观察各组小鼠原虫血症变化及存活时间。[结果 ]与对照组比较 ,较低剂量 ( 0 0 1或 0 0 3 μg/d)IL 12均可显著推迟血中原虫的出现及原虫血症达峰值的时间 ,但仅 0 0 3 μg/d剂量可明显提高生存率 ;较惯剂量 ( 0 1或 0 15 μg/d)IL 12则增加原虫密度 ,加速小鼠死亡。在感染的第 3d给予 0 0 3 μg/dIL 12 ,对原虫血症、生存率均无明显影响。IL 12不能改变感染的结局 ,最终各组小鼠均死亡。[结论 ]IL 12具有免疫保护和毒副反应双重活性。诱导保护作用而减少毒副作用 ,剂量及给药时间是关键 ,适时地给予适当剂量的IL 12可诱导抗红内期疟原虫的部分保护作用。
- 陈姝陆惠民张山鹰高琪唐学恒孙臻安
- 关键词：白细胞介素12伯氏疟原虫红细胞内期免疫保护毒副反应
- IL-12在抗伯氏疟原虫感染中的免疫佐剂作用被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨IL - 12在抗伯氏疟原虫感染中的免疫佐剂作用。方法 BALB/c小鼠分别皮下用抗原sAg、IL - 12、抗原sAg联合IL - 12或抗原sAg联合弗氏佐剂进行免疫 ,共免疫 3次 ,每次间隔 2wk ,末次免疫后 1wk以 5× 10 5个感染P berghei的RBC攻击感染 ,观察各组小鼠原虫血症变化及存活时间。攻击感染后 1wk收集各组小鼠血清 ,采用ELISA检测血清中IFN -γ、IL - 4、IL - 10及IgG水平。结果 抗原sAg联合IL - 12免疫可较其它各免疫组及未免疫对照组显著延长小鼠存活时间 ,且全部小鼠在原虫血症达 5 0 %时开始死亡 ;而单独抗原sAg、单独IL - 12或抗原sAg联合弗氏佐剂免疫与未免疫比较 ,对小鼠原虫血症及存活时间均无明显影响 ,且半数以上小鼠均在原虫血症小于 2 5 %时死亡。抗原联合IL - 12免疫组小鼠血清中IFN -γ及IgG水平较单独抗原sAg、单独IL - 12及未免疫组显著升高。 结论 结果表明 ,IL - 12与sAg抗原共同免疫小鼠可诱导对P berghei攻击感染的部分抵抗力 ,具有一定的免疫佐剂活性。
- 陈姝陆惠民张山鹰高琪唐学恒
- 关键词：伯氏疟原虫免疫佐剂ELISA
- 聚合酶链反应检测恶性疟原虫的研究被引量：2
- 1999年
- 通过５ 对根据恶性疟原虫不同基因序列设计的引物筛选及７ 种从滤纸干血滴中快速制备疟原虫ＤＮＡ模板的方法的比较，以建立一种敏感、特异、简便、快速的聚合酶链反应（ＰＣＲ） 检测恶性疟原虫的方法。结果表明，根据恶性疟原虫中度重复基因序列ｐＢＲＫ１１４ 设计的引物，可从恶性疟原虫ＤＮＡ 中扩增出２０６ ｂｐ 大小的ＤＮＡ片段，而间日疟原虫、人白细胞ＤＮＡ均无此扩增带出现，并至少可检测出原虫血症为５ ×１０－ ７ 的感染水平，且适用于我国不同地理株恶性疟原虫的检测；滤纸干血滴样本经生理盐水溶血煮沸法处理的ＰＣＲ 扩增效果最为理想，且简易、经济、重复性好；在云南疟疾流行区采集的３６０ 份血样中，ＰＣＲ 法与镜检法符合率为９７ ．５％ 。本研究建立的ＰＣＲ 检测恶性疟原虫方法具有敏感、特异、简易和快速的特点，便于现场推广应用。
- 陈姝陆惠民高琪唐学恒
- 关键词：聚合酶链反应恶性疟原虫
- 弓形虫昆山分离株P30抗原基因的克隆与表达被引量：14
- 2001年
- 目的 在大肠杆菌中高效表达P30抗原。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫昆山分离株cDNA文库中扩增得到编码P30抗原的基因 ,经DNA序列分析后导入表达载体pGEX - 5x - 3 ,然后在大肠杆菌BL2 1中进行表达 ,用亲和层析柱纯化表达产物 ,并以SDS -PAGE和Westernblotting进行鉴定。 结果 1、在我们比较的 783个碱基中 ,弓形虫昆山分离株与RH株之间只有两个碱基不同 ;2、得到一分子量为 5 4kDa的融合蛋白 ,占大肠杆菌总蛋白的 38%。结论 1、弓形虫昆山分离株与RH株的P30基因没有大的差异 ;2、在大肠杆菌中得到了P30融合蛋白的高效表达。
- 杨秋林陆惠民闵太善黄伟达
- 关键词：弓形虫P30PCR基因表达克隆
- 红细胞感染恶性疟原虫后游离钙浓度变化的研究
- 1997年
- 采用活细胞钙离子荧光指示剂Fluo-3负载感染恶性疟原虫（FecI株）红细胞及正常红细胞，经流式细胞仪测定，根据荧光强度不同表示红细胞内游离钙浓度的变化。结果表明，感染红细胞内游离钙浓度分别为正常红细胞的1．83和2.99倍，呈明显增高。
- 唐学恒陆惠民保泽洛
- 关键词：疟原虫感染病理红细胞游离钙
- IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠淋巴细胞增殖活性的影响被引量：2
- 2005年
- 目的探讨IL12对伯氏疟原虫(P.b)红内期感染小鼠淋巴细胞增殖活性的影响。方法每只BALB/c小鼠接种5×105个感染P.b的RBC,同时每天分别给予0.03或0.15μgIL12处理,用3HTdR掺入法检测脾淋巴细胞增殖转化活性,流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群CD4+与CD8+百分比。结果每天给予0.03或0.15μgIL12处理,均可显著增加P.b感染小鼠脾淋巴细胞数量及CD4+、CD8+数。每天给予0.03μgIL12可显著促进脾淋巴细胞的增殖转化,而每天给予0.15μgIL12则明显抑制脾淋巴细胞增殖。结论适当低剂量IL12可促进P.b感染小鼠脾淋巴细胞增殖活性,增强机体抗感染免疫,而较大剂量IL12则抑制脾淋巴细胞增殖活性,甚至可致免疫病理损害。
- 陈姝陆惠民高琪张山鹰唐学恒孙臻安
- 关键词：脾淋巴细胞增殖
- 弓形虫昆山分离株速殖子期表达型cDNA文库的构建及鉴定被引量：17
- 2000年
- 目的 构建弓形虫速殖子期表达的基因的完整长度cDNA文库。方法 用CF - 11纤维素柱快速提纯速殖子 ,以盐酸异硫氰酸胍 (AGPC)一步法抽提总RNA ,oligo -dT纤维素分离mRNA后 ,用ClonTech公司的SmartTMPCRcDNA文库构建试剂盒 ,构建了弓形虫昆山分离株的表达型文库。结果 获得 5× 10 6个独立克隆 ,重组率为 99% ,插入片段的平均长度为 1kb。
- 杨秋林陆惠民邬敏辰黄伟达
- 关键词：弓形虫CDNA文库克隆
- 弓形虫P30乳酸球菌口服免疫小鼠血清中IFN-γ、IL-2及NO含量的测定被引量：5
- 2006年
- 目的观察弓形虫P30乳酸球菌(L.lactis/P30)口服免疫鼠血清中细胞因子IFN-γI、L-2及NO的变化情况。方法L.lactis/P30口服免疫BALB/c小鼠,以gp42乳酸球菌组和生理盐水组为对照,在第3周、第9周及第12周分别收集各实验组小鼠血清,ELISA法测定血清IFN-γI、L-2含量;酶法测定NO浓度。结果L.lactis/P30口服免疫鼠血清中IFN-γI、L-2含量均显著高于两对照组,血清中NO含量随着免疫时间延长与两对照组差异逐渐明显。结论L.lactis/P30口服免疫能有效刺激小鼠细胞因子IFN-γ和IL-2的产生及NO分子的释放。
- 李文姝陆惠民张惠琴黄伟达
- 关键词：弓形虫口服免疫NO
