陈立敏
- 作品数：9 被引量：82H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 负显突变体细胞因子信号转导抑制物-1增强干扰素-γ体外抗柯萨奇病毒活性被引量：3
- 2005年
- 目的病毒性心肌炎(VM)细胞模型JAK/STAT1信号通路的特异性内源抑制物细胞因子信号转导抑制物-1(SOCS1)及其负显突变体SOCS1(dnSOCS1)对IFN-γ抗CVB3活性影响。方法构建pEGFP-C1-SOCS1及pEGFP-C1-dnSOCS1的真核表达载体,以脂质体法转染至心肌细胞后,加用IFN-γ刺激细胞并感染病毒,采用荧光显微镜检测心肌细胞中SOCS1和dnSOCS1表达,同时利用Westernblot法测定不同条件下STAT1表达水平并测定病毒滴度。结果与转染dnSOCS1组比较,转染SOCS1组病毒滴度高,而心肌细胞存活率低,心肌细胞搏动时间短。另外在dnSOCS1组磷酸化STAT1的表达更明显。结论dnSOCS1可增强IFN-γ体外抗病毒活性。SOCS1可为我们治疗VM提供一个新的治疗靶点。
- 陈立敏刘亚黎胡晓华彭华林雯蒙冰
- 关键词：SOCS1柯萨奇B3病毒干扰素-Γ
- 白细胞介素18对病毒性心肌炎小鼠治疗作用的研究被引量：7
- 2002年
- 胡晓华刘亚黎林雯陈立敏董继华刘朝
- 关键词：白细胞介素18病毒性心肌炎疗效IL-18
- 细胞外信号调节激酶信号转导通路在病毒性心肌炎心肌细胞中的调控作用被引量：1
- 2004年
- 目的 细胞外信号调节激酶 (ERK)与细胞生长 ,分化 ,增殖等生理病理过程有密切关系。该研究通过比较ERK1/ 2在病毒性心肌炎心肌细胞中表达变化及ERK特异性阻断剂PD980 5 9干预后细胞活性的改变 ,探讨ERK信号传导通路在病毒性心肌炎早期病毒攻击心肌细胞过程中的作用。方法 取新生SD大鼠 ,采用酶消化法分离得到心肌细胞。将培养细胞分为对照组 ,柯萨奇B3(CVB3)感染组 ,2 0 μmol/L和 5 0 μmol/LPD980 5 9干预组 ,后 3组用柯萨奇B3M株感染。采用Westenblot分别测定ERK1/ 2 ,ERK激活后产物 (P ERK1/ 2 )表达变化 ,采用MTT法检测细胞活性 ,采用细胞病变法计算细胞病变。结果 4组ERK1/ 2表达总量差异无显著性 ;CVB3感染组P ERK1/ 2表达为 135 .5 7± 0 .71高于对照组的 119.4 1± 1.97,差异有显著性 (P <0 .0 1)。经 2 0 μmol/L或 5 0 μmol/LPD980 5 9干预后心肌细胞P ERK 1/ 2表达为 113.75± 1.0 3,4 2 .5 6± 2 .17比感染组细胞低 ,差异有显著性 (均P <0 .0 1) ;其中 5 0 μmol/LPD980 5 9干预组P ERK1/ 2表达较 2 0 μmol/L组低 (P <0 .0 1)。PD980 5 9干预组心肌细胞活性 0 .5 3± 0 .13,0 .4 1± 0 .0 4明显高于感染组 0 .17± 0 .0 4 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;不同浓度PD980 5
- 彭华刘亚黎胡晓华林雯蒙冰陈立敏
- 关键词：细胞外信号调节激酶信号转导病毒性心肌炎
- IL-12表达水平变化及其免疫活性对病毒性心肌炎的影响被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨在小鼠急性病毒性心肌炎 (VM)发病过程中白细胞介素 12 (IL 12 )mRNA表达水平和蛋白浓度变化 ,及其免疫学活性对心肌炎的影响。方法 135只雄性BALB/c小鼠随机分为正常组 (n =2 5 )、心肌炎对照组 (n =5 0 )、rIL 12组 (n =40 )、IL 12抗体组 (n =2 0 ) ,后 3组经腹腔接种柯萨奇病毒 (CVB3m)诱发急性心肌炎 ,rIL 12组于病毒接种后 4h皮下注射重组IL 12 ,10ng/ 0 .1ml,心肌炎组注射等量PBS ,均连续用 5d(0～ 4d) ,抗体组于 0～ 1d经腹腔注射IL 12中和抗体 0 .1mg/ 0 .1ml,共 2次 ,分别于接种后 1、3、5、7d各组随机取若干只小鼠采血后处死 ,留取心脏、脾等标本。结果 小鼠感染CVB3m后 ,其心肌组织中IL 12mRNA的表达水平增高 ,同时体内IL 12、IFN γ的蛋白含量也增高 ;在投入rIL 12后 ,IFN γ的蛋白含量升高更明显 ,NK细胞活力增强 ,同时小鼠心肌组织中病毒滴度降低 ,心肌损害减轻 ,小鼠生存率提高 (分别为 6 6 %和 85 % ) ;而在IL 12抗体投入组结果则相反 ,且小鼠生存率降低 (5 0 % ) ,但与心肌炎组相比差异无显著性。结论 在VM早期小鼠体内rIL 12能减轻心肌损害 ,提高感染小鼠的存活率 ,起到保护性的作用。
- 刘亚黎胡晓华董继华王琳孟浦李佩玲陈立敏
- 关键词：病毒性心肌炎白细胞介素12心肌炎柯萨奇病毒B组免疫活性VM
- IL-18对感染柯萨奇B3病毒乳鼠心肌细胞的保护作用被引量：4
- 2005年
- 目的研究IL-18抗柯萨奇B3病毒(Coxsackie B3 virus,CVB3)的作用.方法将心肌细胞分为4组.感染组:用CVB3感染心肌细胞;干预组:心肌细胞感染病毒后加入IL-18(4～30 ng/ml);IL-18组:正常心肌细胞加入IL-18(8 ng/ml);对照组:正常心肌细胞.观察培养心肌细胞病变(CPE)及心肌酶谱乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)的变化.并进行IL-18最大无毒剂量实验.结果感染组感染病毒后第2、5天心肌细胞病变程度较其余3组明显,LDH和CK浓度明显升高,与其余3组比较差异有极显著性意义(P<0.01).IL-18浓度≥40 ng/ml对正常心肌细胞有毒性作用;在4～20 ng/ml范围内对感染心肌细胞具有保护作用.结论 IL-18可以抑制CVB3对心肌细胞的损伤,对CVB3感染的心肌细胞有保护作用.
- 李玲刘亚黎彭华林雯陈立敏蒙冰
- 关键词：白细胞介素18磷酸肌酸激酶
- STAT3、ERK、NF-κB在黄芪保护病毒感染心肌细胞中的作用被引量：24
- 2006年
- 目的:研究STAT3、ERK、NF-κB在黄芪保护感染病毒的心肌细胞中的作用。方法:体外分离培养心肌细胞并分为对照组;病毒感染组:病毒孵育;黄芪干预组:病毒孵育后分别给予黄芪培养浓度为300 mg/L、500mg/L、700 mg/L。采用RT-PCR检测各组病毒RNA,采用W esten b lotting检测P-STAT3、P-ERK、NF-κB p65表达。MTT法观察细胞活性。结果:在各组中STAT3、ERK总蛋白没有明显变化(P>0.05),病毒组P-STAT3、P-ERK、NF-κB p65明显高于对照组(P<0.01),黄芪组P-STAT3、P-ERK、NF-κB p65明显低于病毒组(P<0.01)。黄芪组细胞存活率明显高于病毒组(P<0.01)。结论:在病毒性心肌炎中黄芪可以通过抑制STAT3、ERK、NF-κB保护心肌细胞。
- 彭华刘亚黎胡晓华林雯蒙冰陈立敏
- 关键词：有丝分裂素激活蛋白激酶类NF-ΚB心肌炎
- 核转录因子抑制剂对病毒感染心肌细胞的保护作用被引量：2
- 2005年
- 目的:探索核转录因子(NF κB)抑制剂吡咯基二硫氨基甲酸酯(PDTC)对病毒感染搏动心肌细胞的作用及信号转导机制。方法:利用培养的SD乳鼠心肌细胞,分为对照组,CVB3 感染组[心肌细胞感染 coxsackieB3(CVB3)病毒],PDTC干预组(加入PDTC干预后心肌细胞再感染 CVB3 病毒)。采用 MTT法检测细胞活性,采用细胞病变法计算细胞病变;采用Westen blot测定NF kBp65蛋白表达变化。结果:CVB3 感染组与对照组比较,心肌细胞活性明显降低,细胞病变加重;NF kBp65蛋白表达明显高于对照组(P<0.01)。PDTC干预组心肌细胞活性明显低于CVB3 感染组, 细胞病变较 CVB3 感染组轻,NF kBp65 蛋白表达明显低于 CVB3 感染组(P<0.01)。结论:CVB3 病毒在感染早期可导致心肌细胞损伤,NF κB抑制剂可保护心肌细胞免受病毒侵害,NF κB信号通路激活可能为病毒性心肌炎发病机制之一。
- 李玲刘亚黎彭华陈立敏林雯蒙冰
- 关键词：心肌炎COXSACKIE核转录因子
- 黄芪对病毒性心肌炎心肌细胞信号转导及转录活化因子3信号通路的影响被引量：36
- 2005年
- 目的 探讨黄芪在保护病毒性心肌炎 (VM)心肌细胞中信号转导及转录活化因子- 3(STAT3)表达及其对细胞增殖的影响。方法 体外分离培养心肌细胞建立VM心肌细胞模型。采用不同浓度黄芪进行干预 ,RT- PCR、Westernblot、MTT等方法分别检测各组病毒RNA及STAT3水平变化。结果 黄芪干预组细胞病毒RNA表达均减弱 ,而且与浓度无关 (P >0 .0 5)。Westenblot法示黄芪对STAT3有抑制作用 ,而且浓度越高 ,抑制作用越强 (P <0 .0 1 )。MTT法示黄芪为 1g/L时细胞出现病变 ,70 0mg/L时细胞存活率最高。结论 黄芪可以抑制病毒RNA复制 ,其保护作用与抑制STAT3信号通路密切相关。
- 彭华刘亚黎胡晓华林雯蒙冰李玲陈立敏
- FTY720对柯萨奇B_3病毒感染大鼠心肌细胞的保护作用及信号转导机制研究被引量：6
- 2005年
- 目的 观察新型免疫抑制剂FTY72 0对病毒性心肌炎 (VM)的保护作用 ,探讨其治疗VM的分子机制。方法 建立实验性VM模型。采用Westernblot法分别测定ERK1 / 2蛋白 ,磷酸化ERK1 / 2 (P ERK1 / 2 )的表达变化。结果 FTY72 0能明显减少柯萨奇B3病毒 (CVB3)感染后心肌酶释放 ,心肌细胞搏动较病毒感染组维持时间长 ,心肌细胞病变发展亦较缓慢 ,病毒滴度显著低于病毒感染组。而且感染CVB3后FTY 72 0治疗组的心肌细胞内P ERK1 / 2活性持续降低。结论 FTY72 0对CVB3病毒感染的乳鼠心肌细胞有明显的保护作用 ,它可以通过抑制ERK1 / 2信号通路使病毒复制能力降低 ,从而抑制CVB3基因的表达和复制。
- 陈立敏刘亚黎彭华林雯胡晓华蒙冰
- 关键词：FTY720柯萨奇B病毒心肌细胞细胞外信号调节激酶
