高鸿雁
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
- 供职机构：郧阳医学院附属人民医院更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丹参注射液预防严重创伤骨折后脂肪栓塞综合征
- 2006年
- 王建忠高鸿雁曾一林
- 关键词：脂肪栓塞综合征丹参注射液严重创伤骨折后重要并发症骨折患者
- 激素性股骨头坏死BMSCs骨保护素/NF-κB受体活化因子配基mRNA的表达被引量：9
- 2009年
- 目的观察激素性股骨头坏死患者BMSCs骨保护素(osteoprotegerin,OPG)/NF-κB受体活化因子配基(receptor activator of nuclear factor kappa B ligand,RANKL)mRNA表达情况,探讨长期应用激素导致股骨头坏死的另一病理机制。方法取2007年3月-2008年3月激素性股骨头坏死患者自愿捐赠的骨髓及股骨头骨组织35例(实验组)和股骨颈骨折患者自愿捐赠的骨髓及股骨头骨组织21例(对照组)。两组男女比例均为4∶3;年龄41～70岁,其中实验组平均55.34岁,对照组平均55.33岁。实验组患者最近2年内接受糖皮质激素治疗超过3周或大剂量冲击治疗超过1周,对照组患者从未接受超过1周的激素治疗。骨组织标本行多聚甲醛固定后石蜡包埋,HE染色。所取骨髓采用贴壁法分离培养BMSCs,采用实时定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RTQ-PCR)技术检测BMSCs OPG mRNA和RANKL mRNA的表达水平,并计算OPG mRNA/RANKL mRNA比值。结果HE染色示实验组未见完整的骨小梁和骨单位,可见不连续骨碎片,碎片骨陷窝内骨细胞大部分消失,周围有大量炎性肉芽组织。对照组可见完整骨单位由板层骨构成,板层骨连续完整,围绕血管呈同心圆排列,小梁骨陷窝内可见骨细胞。BMSCs RTQ-PCR检测:实验组OPG mRNA表达量为0.37±0.12,RANKL mRNA1.12±0.39,OPG mRNA/RANKL mRNA比值为0.37±0.17;对照组OPG mRNA0.47±0.13,RANKL mRNA0.84±0.24,OPG mRNA/RANKL mRNA比值为0.61±0.26;两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论长期应用糖皮质激素致股骨头坏死可能与其调控BMSCs OPG和RANKL表达有关。
- 王建忠高鸿雁王坤正李伟时志斌张明宇
- 关键词：糖皮质激素股骨头坏死BMSCS细胞因子
- 重组逆转录病毒hVEGF_(165)基因转染对人骨髓基质细胞成骨影响
- 2010年
- 目的:观察重组逆转录病毒人血管内皮生长因子165(retrovirus pLXSN/hVEGF165)基因转染对人骨髓基质细胞(hM-SCs)成骨能力的影响。方法:从健康志愿者全骨髓中分离培养人hMSCs,体外扩增纯化后随机分为4组:①retrovirus pLXSN/hVEGF165组:培养液中加入人血管内皮生长因子基因重组逆转录病毒1×1010OPU/ml,孵育24h后换普通培养液继续培养;②retrovirus pLXSN组:培养液中加入逆转录病毒空载体,其余处理与retrovirus pLXSN/hVEGF165组相同;③阳性对照组:培养液中添加地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠;④空白对照组:不给予特殊处理。各组细胞处理后2周,免疫组化观察VEGF表达,Von Kossa染色检测人hMSCs中骨胶原结节形成,全自动生化分析仪检测培养上清碱性磷酸酶活性。结果:经多次换液传代,人hMSCs呈均一梭形形态。处理后retrovirus pLXSN/hVEGF165组与阳性对照组细胞形态逐渐趋于扁平,突起减少。retroviruspLXSN组和空白对照组形态无明显变化。免疫组化染色见VEGF主要在胞浆内表达,retrovirus pLXSN/hVEGF165组VEGF表达明显强于其他3组。Von Kossa染色retrovirus pLXSN/hVEGF165组与阳性对照组可见大量红色骨胶原结节形成,显著多于retrovirus pLXSN组和空白对照组。retrovirus pLXSN/hVEGF165组与阳性对照组培养上清液碱性磷酸酶活性显著高于retroviruspLXSN组和空白对照组。结论:基因重组逆转录病毒人血管内皮生长因子转染对人hMSCs成骨能力具有促进作用。
- 李伟高鸿雁王建忠谢祥仁肖庆方
- 关键词：逆转录病毒基因转染骨生成
- 腺相关病毒介导人血管内皮生长因子165基因转染后人骨髓基质细胞的成骨分化
- 2009年
- 背景:现阶段诱导骨髓基质细胞分化成骨的方法大致分为在化学药物作用、细胞因子作用以及转基因作用下的分化等。目的:观察腺相关病毒介导人血管内皮生长因子165基因转染对人骨髓基质细胞成骨能力的影响。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-03/12在郧阳医学院附属人民医院临床研究所和骨关节科完成。材料:人骨髓基质细胞取自健康成年男性自愿者。人血管内皮生长因子165基因重组腺相关病毒、β半乳糖酐酶基因重组复制缺陷性腺相关病毒由课题组前期构建。方法:抽取健康志愿者髂前上棘骨髓,采用全骨髓法分离培养人骨髓基质细胞。体外扩增纯化后取50%融合的P2代细胞,随机分为4组:腺相关病毒介导人血管内皮生长因子组向细胞培养液中加入人血管内皮生长因子165基因重组腺相关病毒1×1010OPU/mL,孵育24h后换为普通完全培养液继续培养。β半乳糖酐酶基因重组腺相关病毒组加入半乳糖酐酶基因重组复制缺陷性腺相关病毒,其余处理与前组相同。阳性对照组向培养液中添加地塞米松、抗坏血酸和β-甘油磷酸钠。空白对照组仅加入普通完全培养液,不进行特殊处理。主要观察指标:全自动生化分析仪检测培养上清碱性磷酸酶活性,免疫组化染色观察血管内皮生长因子的表达,Von Kossa染色检测人骨髓基质细胞中骨胶原结节形成。结果:处理后2周,腺相关病毒介导人血管内皮生长因子组与阳性对照组的培养上清碱性磷酸酶活性基本相似(P>0.05),而β半乳糖酐酶基因重组腺相关病毒组、空白对照组的培养上清碱性磷酸酶活性均明显降低(P<0.01)。血管内皮生长因子主要在骨髓基质细胞的胞浆内表达,腺相关病毒介导人血管内皮生长因子组阳性细胞数明显多于其他3组。腺相关病毒介导人血管内皮生长因子组和阳性对照组可见大量红色骨胶原结节形成,�
- 李伟高鸿雁王建忠谢祥仁肖庆方
- 关键词：骨髓基质细胞腺相关病毒基因转染骨生成
