魏芳芳
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
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- 磷脂酶C和磷脂酶D在ParA1诱导烟草悬浮细胞防卫反应中的作用
- 磷脂酶C（phospholipase C，PLC）和磷脂酶D（phospholipase D，PLD）信号途径在植物和动物防卫反应中起着重要作用。PLC的水解产物二酯酰甘油（diacylglycerol，DAG）和三磷酸...
- 魏芳芳
- 文献传递
- 烟草赤星病菌(Alternaria longipes)角质酶的纯化和特性(英文)被引量：2
- 2009年
- 本文对烟草赤星病菌Alternaria longipes产生的角质酶进行了纯化及性质测定。在含有苹果角质(诱导物)的液体培养基中培养A.longipes,第8 d达到产酶高峰。发酵液经硫酸铵沉淀、DEAE(diethylaminoethyl)Sepharose、Sephacryl S-100 HR和Phenyl-Sepharose 6 fast flow(high sub)进行纯化。通过SDS-PAGE测得蛋白分子量为59.5 kDa。该酶的最适温度为35℃,最适pH为9.0,在温度20℃～40℃及pH 4.0～10.0范围内,酶活较稳定。一些金属离子如Na+、Cu2+和Mn2+可以部分抑制角质酶活性。
- 刘辉刘菲魏芳芳梁元存赵蕾刘爱新
- 关键词：烟草赤星病菌蛋白纯化
- 烟草赤星病菌(Alternaria longipes)产角质酶液体发酵条件的优化被引量：1
- 2009年
- 以基础培养基(查彼培养基+碳酸钙+苹果角质)为营养优化了长柄链格孢(Alternaria longipes)产角质酶的环境和营养条件。结果表明,最佳产酶的环境条件是:培养时间8d,培养温度25℃,pH5.5;通过正交试验确定最佳产酶的营养条件是:蔗糖3%,干酪素1%,吐温-800.3%;酶活高达175.2U/mL,是基础培养基酶活力的11.0倍。
- 刘辉刘爱新梁元存刘菲魏芳芳
- 关键词：烟草赤星病菌发酵条件
- 核黄素对烟草悬浮细胞活性氧和防卫反应的激活作用被引量：5
- 2009年
- 【目的】研究核黄素处理烟草悬浮细胞后,激活的氧迸发和防卫反应,以及钙信号和蛋白激酶对这些事件的影响。【方法】1mmol·L-1核黄素处理烟草悬浮细胞,用半定量RT-PCR(reverse transcriptase-polymerase chain reaction)和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法测定一系列防卫反应,并用钙离子通道抑制剂LaCl3、钙离子螯合剂EGTA和一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶抑制剂staurosporine处理细胞,测定防卫反应的变化。【结果】1mmol·L-1核黄素处理悬浮细胞后,产生了氧迸发、导致培养基质碱性化、增强4种防卫基因PR(pathogenesis-related)-1a、PR-1b、PAL(phenylalanine ammonia lyase)和LPO(lignin peroxidase)表达以及scopoletin的积累;LaCl3、EGTA和staurosporine可以不同程度地抑制这些防卫反应。【结论】核黄素能够激活烟草悬浮细胞的氧迸发和防卫反应,在信号转导中钙信号和蛋白质磷酸化参与了这些过程。
- 刘菲魏芳芳王蕾刘辉梁元存刘爱新
- 关键词：核黄素烟草活性氧防卫反应
- 核黄素诱导烟草悬浮细胞酚类物质和木质素的积累被引量：9
- 2009年
- 【目的】阐明核黄素对烟草悬浮细胞苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活性以及抗病相关的酚类物质、木质素等次生代谢产物含量的影响。【方法】1mmol·L-1的核黄素处理烟草悬浮细胞,用生物化学、细胞化学和高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)等方法测定苯丙烷代谢有关的生理和生化指标。【结果】核黄素处理后,PAL和POD活性明显升高,处理12h和24h后酶活性分别达到峰值;荧光观察细胞壁积累了更多的酚类物质,胞内和胞外scopoletin(7-羟基-6-甲氧基香豆素)含量明显升高,在处理12h后都达到峰值,分别是对照的3.6和3.9倍;细胞染色和含量测定表明,核黄素处理后烟草悬浮细胞沉积了更多的木质素,处理24h和48h后,木质素含量分别为对照的1.5和1.8倍。【结论】核黄素处理后提高了烟草悬浮细胞PAL、POD活性,积累了更多与抗病有关的次生代谢产物。
- 刘菲刘辉梁元存刘爱新魏芳芳林琎
- 关键词：烟草核黄素SCOPOLETIN木质素
- 磷脂酶D对ParA1诱导的烟草的细胞死亡和过氧化氢及莨菪亭积累的影响被引量：3
- 2010年
- 利用药理学方法,研究了烟草寄生疫霉(Phytophthora parasitica)分泌的蛋白激发子ParA1诱导烟草悬浮细胞后,磷脂酶D对ParA1诱导的过敏细胞死亡和其它防卫反应的影响.用100nmol/LParA1处理烟草悬浮细胞后能够诱导细胞死亡、过氧化氢和莨菪亭的积累.磷脂酶D抑制剂正丁醇能够抑制ParA1诱导的这些防卫反应,仲丁醇所起的抑制作用比正丁醇小,正丁醇和仲丁醇产生的抑制效果具有浓度依赖效应.而叔丁醇不能抑制ParA1诱导的这些反应.结果表明,磷脂酶D参与了ParA1诱导烟草悬浮细胞的信号传导过程.
- 魏芳芳王蕾梁元存王玉军
- 关键词：磷脂酶D细胞死亡过氧化氢
- 磷脂酶C参与ParA1诱导的烟草悬浮细胞死亡和防卫反应被引量：1
- 2010年
- 【目的】研究寄生疫霉Phytophthora parasitica分泌的蛋白激发子ParA1诱导烟草悬浮细胞后,磷脂酶C(phospholipase C,PLC)参与ParA1诱导烟草过敏细胞死亡(hypersensitive cell death,HCD)和防卫反应。【方法】采用药理学方法,在烟草悬浮细胞中添加PLC抑制剂,比较烟草悬浮细胞受ParA1诱导后细胞死亡和多种防卫反应的差别。【结果】PLC特异性抑制剂U73122能完全抑制ParA1引起的烟草悬浮细胞死亡,氧迸发、胞外基质碱化和植保素scopoletin(7-羟基-6-甲氧基香豆素)积累都能显著地被抑制,5种防卫基因hin1、hsr203J、PR(pathogenesis-related)-1a、PR-1b和PAL等的转录表达也都受到U73122不同程度的抑制。【结论】ParA1处理烟草悬浮细胞后,PLC参与了ParA1诱导细胞死亡和防卫反应的信号传导过程。
- 魏芳芳王蕾王莲莲柳金伟梁元存王玉军
- 关键词：磷脂酶C烟草细胞死亡防卫反应
