倪斌
- 作品数：16 被引量：10H指数：2
- 供职机构：江苏大学临床医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 鼠疫菌OxyR蛋白对katY的转录调控机制
- 2013年
- 目的利用分子生物学实验研究OxyR对katY的转录调控机制。方法 PCR扩增katY的整个启动子区DNA序列全长,并纯化鼠疫菌His-OxyR蛋白,通过体外的凝胶阻滞实验(EMSA)和DNase I足迹实验研究OxyR对katY启动子区的结合位点;提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸实验研究katY的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对katY的调控关系;进一步采用实时定量RT-PCR的方法验证OxyR对katY的调控关系。结果体外实验结果表明OxyR能结合到katY启动子区-101到-48之间的碱基上;鼠疫菌katY有一个转录起始位点G(-26)(翻译起始位点为+1),其转录表达受OxyR的激活。结论 OxyR能直接结合到katY启动子区而激活其转录表达。
- 倪斌张义全黄新祥杨瑞馥周冬生
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌OXYR转录调控
- 抗H:z66抗体诱导z66^+伤寒沙门菌鞭毛相变换特点的探讨被引量：1
- 2010年
- 目的探讨抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。方法利用含抗H∶z66抗体的半固体培养基诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛发生相变换,通过提取z66+伤寒沙门菌和其相变株的线性质粒,利用脉冲场凝胶电泳和核酸内切酶分析比较z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换前后线性质粒的结构,最后通过测定相变株的线性质粒全序列和Southern blot进一步揭示抗H∶z66抗体诱导z66+伤寒沙门菌鞭毛相变换的特点。结果 z66+伤寒沙门菌在抗H∶z66抗体的诱导下成功发生了鞭毛的单向相变换;这种单向相变换是由于伤寒沙门菌在抗体诱导下线性质粒缺失了含fljBA的2.6 kb末端区域所致,同时首次发现在鞭毛相变换后线性质粒结构反而变大,提示线性质粒可能形成了非共价结合的二聚体。结论该研究揭示了z66+伤寒沙门菌鞭毛的相变换特点,为更深入地研究z66+伤寒沙门菌奠定了基础。
- 张海方黄新祥张晓磊倪斌生秀梅徐顺高许化溪
- 关键词：伤寒沙门菌鞭毛线性质粒
- 模拟空间环境下低剪切力对肺炎克雷伯氏菌Ⅲ型菌毛表达调控机制的初步研究
- 2018年
- 目的:探索模拟空间环境下低剪切力对肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛表达的影响及其可能机制,为空间和地面感染防控研究的靶标筛选提供新的思路和依据。方法:以肺炎克雷伯菌ATCC BAA-1705株M1亚群为研究对象,以不同的剪切力进行一系列试验,通过甘露糖抑制的酵母凝集试验、透射电镜观察对表型进行研究,通过qRT-PCR及转录组测序结果分析对表型进行验证及其可能机制探究。结果:甘露糖抑制的酵母凝集试验、透射电镜观察等表型试验表明,随着剪切力的增高,Ⅲ型菌毛的表达降低;qRT-PCR及转录组结果测序分析发现,低剪切力条件下,Ⅲ型菌毛结构基因及相应调控基因表达上调,进一步验证了以上发现。针对17个c-di-GMP表达相关的GGDEF基因进行转录组测序分析,并与qRT-PCR试验结果相比对,发现了7个差异表达较显著的基因(KPHS-06770、KPHS-17760、KPHS-29590、KPHS-38170、KPHS-39010、KPHS-39950和KPHS-47910),随着剪切力的降低,这7个基因的表达明显升高。结论:低剪切力促进肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛的表达,其机制有可能是以上7个基因中的一个或多个表达上调,造成局部c-di-GMP表达水平增高,从而促进Ⅲ型菌毛的表达。以上研究提示,在低剪切力的空间环境下,肺炎克雷伯菌Ⅲ型菌毛的表达增加,可能造成其生物被膜和致病能力改变,从而潜在威胁航天员的健康。
- 李文亮王海立高肖芳杨瑞馥倪斌韩延平
- 关键词：肺炎克雷伯菌模拟微重力C-DI-GMP
- 校园网基础上的英语自主学习资源库建设
- 2014年
- 医学教育包括公共课程的教育、基础医学教育和临床医学教育.有些高校还增加了职业思想道德修养课程,以弥补医学教育过程中的不足.医学职业道德教育是-个长期的工作,应该贯穿整个医学教育的全过程中.
- 倪斌朱燕顾丽萍
- 关键词：职业道德专业教育
- 高渗应激早期伤寒沙门菌RpoE调节因子对基因表达的影响被引量：2
- 2011年
- 伤寒沙门菌是一种革兰阴性肠道致病菌,常通过污染的食物进入体内,可造成严重全身性感染[1-2].作为食源性致病菌,必须遭遇人体消化道的高渗环境,但目前对其克服高渗应激的具体机制尚不清楚.RpoE调节因子由rpoE基因编码,是肠杆菌科细菌中一个重要的σ因子,在大肠杆菌响应高渗应激时发挥着重要的作用[3],在伤寒沙门菌中也应当十分重要.
- 杜鸿倪斌王敏罗哲谢新民李安平黄新祥
- 关键词：伤寒沙门菌基因表达应激食源性致病菌
- 鼠疫菌OxyR调控子蛋白对dps的转录调控机制被引量：1
- 2013年
- 【目的】利用分子生物学实验研究鼠疫菌调控子OxyR对dps的转录调控机制。【方法】提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸实验研究dps的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对dps的调控关系。进一步采用实时定量RT-PCR的方法验证OxyR对dps的调控关系。PCR扩增dps的整个启动子区DNA序列,并纯化His-OxyR蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证OxyR对dps启动子区是否具有直接的相互作用。利用大肠杆菌OxyR识别基序,预测鼠疫菌OxyR对dps启动子区的结合位点,从而得出鼠疫菌OxyR对dps的转录调控机制。【结果】鼠疫菌dps有一个转录起始位点G(-40)(翻译起始位点为+1),其转录表达受OxyR的激活;体外实验及生物信息学预测结果表明OxyR能结合到dps启动子区-111到-78之间的碱基上。【结论】OxyR能直接结合到dps启动子区而激活其转录表达。
- 倪斌张义全黄新祥杨瑞馥周冬生
- 关键词：鼠疫菌OXYRDPS转录调控
- 鼠疫菌OxyR调控子蛋白对rovA基因的转录调控研究
- 2013年
- 应用分子生物学技术,开展鼠疫菌调控子蛋白OxyR对rovAR的转录调控机制研究。提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸试验研究rovAR的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对rovAR的调控关系。构建克隆有rovAR上游启动子区的lacZ重组质粒,将重组质粒转入WT和ΔoxyR中,通过测定β-半乳糖苷酶活性来比较2株重组菌中的rovAR启动子活性,进一步验证OxyR对rovAR的调控关系。进而利用大肠埃希菌OxyR识别基序,预测OxyR对rovAR启动子区的结合位点。发现rovAR的2个转录起始位点均受OxyR的激活,且rovAR启动子区具有可能的OxyR结合位点。推测OxyR能直接结合到rovAR启动子区而激活其转录表达。
- 倪斌刘磊黄新祥韩延平
- 关键词：鼠疫耶尔森菌OXYR转录调控
- 基于rV270抗原的鼠疫多孔微球疫苗的制备及其免疫保护作用评价被引量：1
- 2009年
- 目的:评价生物可降解高分子材料多孔微球作为鼠疫亚单位疫苗佐剂的可行性。方法:制备可生物降解的高分子材料多孔微球,将rV270抗原蛋白吸附到多孔微球中制备微球疫苗,肌肉注射免疫BALB/c小鼠,初次免疫后21d加强免疫1次,于初次免疫后第10周用600LD50鼠疫耶尔森氏菌攻毒,攻毒后观察14d。结果:攻毒后,微球疫苗免疫的小鼠全部存活,且健康状况良好,对照组小鼠几乎全部死亡。结论:生物可降解多孔微球可作为免疫佐剂用于鼠疫亚单位疫苗研制。
- 邱业峰陆兵尚帅王旺朱紫雯倪斌郭兆彪杨瑞馥王效义
- 关键词：鼠疫耶尔森氏菌
- 多孔微球及其在制备多孔微球疫苗中的应用
- 本发明公开了一种多孔微球及其在制备多孔微球疫苗中的应用。该多孔微球是将可生物降解的高分子材料溶于有机溶剂中，在搅拌下，将此混合液加入到氯化钠饱和溶液中制成初乳；初乳经冰水浴冷却后，加入含氯化钠的PVA溶液中制成复乳；再将...
- 王效义陆兵尚帅邱业峰王旺朱紫雯倪斌杨瑞馥
- 文献传递
- 高渗应激早期伤寒沙门菌RpoE对基因表达的系统影响
- @@伤寒沙门菌是一种革兰阴性肠道致病菌，常通过污染的食物进入体内，可造成严重全身性感染;其导致的伤寒热是发展中国家的主要健康问题之一，每年有近1600万人感染伤寒并有约60万人死于伤寒热，我国南方地区也时有局部爆发流行。...
- 杜鸿倪斌王敏罗哲谢新民李安平黄新祥
- 关键词：基因表达
- 文献传递
