刘建喜
- 作品数：12 被引量：57H指数：4
- 供职机构：中国农业大学生物学院农业生物技术国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- DNA克隆载体的发展和应用被引量：12
- 1997年
- ＤＮＡ克隆载体的发展和应用刘建喜林爱星丁翔陈永福（中国农业大学农业生物技术国家重点实验室，北京１０００９４）ＴｈｅＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＤＮＡＣｌｏｎｉｎｇＶｅｃｔｏｒｓＬｉｕＪｉａｎｘｉＬｉｎＡｉｘｉｎＤｉｎｇＸｉａ...
- 刘建喜林爱星丁翔陈永福
- 关键词：DNA克隆
- 家兔精子膜蛋白基因sp10的克隆与功能研究
- 摘取新西兰大白兔睾丸及附睾,的取总RNA.应用Promega公司的mRNA试剂盒从总DNA中分离出mRNA,以mRNA为模板反转录合成cDNA,连上EcoRI接头并经过柱层析去掉小片段后,将之装入λgtll.铺板检测,重...
- 刘建喜
- 关键词：家兔精子膜蛋白CDNA文库卵母细胞
- 文献传递
- 家兔精子膜蛋白rsp10基因的克隆和特征分析
- 2001年
- sp10基因在精卵识别过程中起着重要作用 .从家兔睾丸cDNA文库中克隆了家兔的sp10基因 (rsp10 ) ,cDNA序列全长 12 82bp ,包含 10 0 5bp开放阅读框 .由开放阅读框推测出的氨基酸序列与人、狒狒、狐和小鼠的SP10氨基酸序列之间存在较高水平的同源性 ,同源性分别为 70 %、69%、68%和 61% .在大肠杆菌中表达rsp10基因 ,获得重组rSP10 .用重组rSP10免疫雌性母兔 ,得到rSP10专一性多抗 .对精子膜蛋白进行免疫印迹分析发现 ,rsp10基因在家兔睾丸中的表达呈现多态性 .rsp10基因在GenBank的登录号为 :AF2 51558.
- 刘建喜林爱星杨毅曾斌陈永福
- 关键词：家兔精子膜蛋白基因克隆
- 指导外源基因在动物乳腺特异性表达载体的构建
- 周云林爱星刘建喜冯继东严阿勇侯健陈永福
- 为了实现外源蛋白质在动物乳腺中特异性表达，采用PCR法扩增了BLG 3′端含第6，7外显子及poly(A)加尾信号下游约200 bp的0.87 kb片断。以山羊BLG 5′的3.2 kb(含第1，2外显子)启动子，山羊B...
- 关键词：
- 关键词：外源基因基因表达表达载体构建
- 北京奶山羊 β-乳球蛋白基因的克隆和分析与乳腺上皮细胞特异性表达融合基因的构建
- 刘建喜
- 关键词：Β-乳球蛋白基因VP2
- 北京奶山羊B-乳球蛋白基因的克隆和分析与乳腺上皮细胞特异性表达融合基因的构建
- 刘建喜
- 关键词：山羊克隆
- 家兔精子膜蛋白rSP10在大肠杆菌中的高效表达及其抗血清的制备被引量：2
- 2001年
- 为研究家兔精子膜蛋白rSP10在精子膜上的定位及其免疫原性 ,将不含编码信号肽序列的rsp10基因插入表达载体pET30a中 ,N端具有His6 肽的融合蛋白re rSP10得到高效表达 ,表达产物达细菌总蛋白的 6 7%。经DEAE柱层析纯化表达产物 ,re rSP10 ,产量约为 5 0mg mL培养物。Western实验结果表明 ,精子膜蛋白多克隆抗体能识别re rsp10 ,说明大肠杆菌表达的re rSP10具有免疫原性。用纯化的re rSP10免疫雌性兔 ,得到re rSP10专一性多克隆抗血清。将re rSP10专一性多克隆抗血清加入获能精子中 ,发现SP10专一性多克隆抗血清严重影响获能精子的运动并且表现为剂量依赖性 。
- 刘建喜林爱星杨毅侯健胡宏宇陈永福
- 关键词：家兔精子膜蛋白抗血清免疫避孕
- β乳球蛋白基因(βlg)的表达调控及其应用被引量：4
- 2001年
- β乳球蛋白 (BLG)是反刍动物乳汁中的主要乳清蛋白 ,BLG表达受到 βlg核心启动子、LCR、MAR等顺式作用元件和激素、转录因子等反式作用因子的调控。利用 βlg启动子已在乳腺成功表达外源基因 ,但乳腺组织特异性表达外源基因时尚存在异位表达、差异表达、表达水平低和表达受位置效应影响等问题。构建表达载体时充分考虑 βlg启动子和远端调控元件 ,有可能使外源基因获得稳定、高效、特异的表达。
- 刘建喜林爱星周云陈永福
- 关键词：乳腺组织特异性表达
