公共文化服务平台

刘朝阳: 作品数：19 被引量：22H指数：2; 供职机构：上海生物制品研究所更多>>; 发文基金：北京市科技计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>

合作作者

高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化: 目的在构建高表达INF-alb重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺。方法采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术。结果发酵密度A可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右。经破菌、离心、离子交换和...; 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇; 关键词：重组大肠杆菌高密度发酵纯化; 文献传递

水痘疫苗生产工艺变更前后Oka株病毒基因序列及疫苗质量分析被引量：3: 2017年; 目的通过对采用细胞工厂工艺进行细胞培养前后的Oka株病毒基因序列和水痘疫苗质量进行分析比较，评价生产工艺变更对水痘疫苗质量的影响。方法从水痘疫苗原液提取病毒基因组，采用PCR法扩增片段，通过对PCR产物测序或克隆质粒测序并拼接，获得Oka株的病毒全基因序列，并与GenBank中相关序列比对。对工艺变更前后生产的疫苗进行病毒滴度、牛血清白蛋白残留量和抗生素残留量比较。结果工艺变更前后的疫苗病毒基因序列一致，检测到33个单核苷酸多态性位点为亲本型和疫苗型碱基共存，具有典型的Oka株特征，没有GenBank或文献报道的新突变。工艺变更前后生产疫苗的平均病毒滴度分别为5.00和5.02 lg蚀斑形成单位/ml，两者间的差异无统计学意义（t＝1.1，P＝0.26），且各项关键指标均符合企业标准和药典要求。结论将细胞工厂引入生产工艺后，水痘疫苗具有与原工艺生产的制品相似的安全性和质量一致性。; 袁萍谢蕾王月红黄帼英孙范玉刘朝阳周翎乔马雷钧石玮王亮朱为; 关键词：水痘疫苗

流感疫苗毒种中3种外源性禽病毒荧光定量PCR检测方法的实验室间验证被引量：1: 2021年; 目的实验室间验证流感疫苗毒种中3种外源性禽病毒的荧光定量PCR(Q-PCR)检测方法。方法联合4家实验室对已建立的流感疫苗毒种中禽腺病毒Ⅰ型[鸡胚致死孤儿病毒(chicken embryo lethal orphan virus,CELO)]、禽腺病毒Ⅲ型[减蛋综合征病毒(egg drop syndrome virus,EDS)]及禽白血病病毒(avian leukosis virus,ALV)Q-PCR检测方法,从灵敏度、特异性、重复性、病毒污染模拟试验及盲样检测方面,开展实验室间方法学验证。结果4家实验室间验证结果显示,Q-PCR检测方法的标准曲线R2值均大于0.99,扩增效率为93.263%~103.105%;灵敏度均达1×101copies/μL;特异性为仅检出阳性目的病毒,其他病毒均无扩增曲线出现;试验内及试验间循环阈值(Ct)和拷贝数的CV均小于15%;病毒污染模拟试验中CELO、EDS和ALV最低检测限分别为1×10^(-7)、1×10^(-4)、1×10^(-3)病毒掺入;盲样检测中4家实验室结果均一致。结论外源性禽病毒Q-PCR检测方法得到了一致性结果,均具有良好的灵敏度、特异性、重复性,可用于流感疫苗毒种外源性禽病毒的快速检测。; 王淑菁付瑞秦骁刘朝阳胡雅灵王增韩斌王魁岳秉飞; 关键词：流感疫苗

流感疫苗株H3N2(NYMCX-223A)主要抗原基因特征与传代稳定性被引量：1: 2014年; 目的分析2013年流感疫苗生产用甲型H3N2(NYMCX-223A)毒株主要抗原血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因特征,并检测该疫苗株主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液的传代稳定性。方法对制备的H3N2疫苗株的主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液进行全面的生物学特性检测;采用RT-PCR法从主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液中扩增HA及NA基因片段,并进行全基因序列测定及分析;应用MEGA 5.05软件对7株不同年份的H3N2亚型疫苗株的HA氨基酸序列进行比对,绘制基因种系发生树。结果 H3N2疫苗株的主种子批、工作种子批抗原性与2013年度WHO推荐毒株相一致,其他生物学特性均符合《中国药典》三部(2010版)标准;主要抗原HA基因序列长度为1 701 bp,编码566个氨基酸;NA基因序列长度为1 410 bp,编码469个氨基酸,各代次流感病毒HA和NA基因核苷酸和氨基酸序列均一致,与GenBank公布的序列完全一致,同源性为100%。2013年与2012年H3N2疫苗株HA氨基酸序列相比,同源性为97.5%。2013年与2012年H3N2疫苗株具有较远的进化距离,与同源性结果相对应。结论 2013年甲型H3N2(NYMCX-223A)流感疫苗株主要抗原基因传代稳定,一般生物学特性符合《中国药典》三部(2010版)要求。2013年与2012年H3N2疫苗株序列差异较大。; 程鹏飞刘朝阳闫现伟; 关键词：血凝素神经氨酸酶基因特征

重组人白细胞介素24的表达及其体外抗肿瘤细胞活性的研究: 目的：为了研究重组人白介素24蛋白(rhIL-24)选择性诱导肿瘤细胞凋亡及可能的机制。方法：用基因工程的方法在大肠杆菌中表达rhIL-24，进行了蛋白纯化，并对纯化的蛋白功能进行体外初步研究：用rhIL-2...; 刘朝阳徐帆洪; 关键词：重组人白细胞介素细胞活性基因工程; 文献传递

高表达α1b干扰素(INF-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化: 目的:在构建高表达INF-α1b重组大肠杆菌工程的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法:采用高密度培养技术(HCDC)和柱层析技术.结果:发酵密度A<,600>可达70,表达量为菌体总蛋白的30％左右.经破菌、...; 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇; 关键词：重组大肠杆菌高密度发酵纯化干扰素; 文献传递

STAGO全自动血凝仪在人凝血因子活性测定上的应用被引量：2: 2015年; 目的探讨STAGO全自动血凝仪在人凝血因子活性测定上的应用。方法对STAGO全自动血凝仪按照GMP要求进行安装确认(installation qualification,IQ):实施信息核查并记录;运行确认(operational qualification,OQ):准确度、精密度(批内精密度及批间精密度)、干扰试验及参考范围的验证确认;性能确认(performance qualification,PQ):按STAGO凝血分析仪相关SOP检测6份人凝血因子Ⅷ样品活性,并计算6份样品检测值间的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)。结果已核实STAGO全自动血凝仪基本信息,安装环境及安装过程均符合要求,并已进行记录。厂家提供的正常及病理值质控血清测定3次的均值均在厂家提供的质控范围内;批内及批间精密性的变异系数(coefficient of variation,CV)均<10%;随机组与对照组相比平均偏差<10%;20份体检样本的均值、标准偏差(standard deviation,SD)及结果在正常参考范围的例数与总标本数的比例(R值)>0.9。6份人凝血因子Ⅷ样品检测值的RSD值为1.95%。结论经全面的设备确认,STAGO全自动血凝仪符合人凝血因子活性测定的要求。; 刘朝阳方曼莉徐樱妹郁佳俊马雷钧程鹏飞; 关键词：人凝血因子

乙型流感疫苗生产用毒株NYMC BX-51B主要抗原的基因特征及传代稳定性研究被引量：1: 2015年; 目的了解2013年流感疫苗生产用乙型病毒株NYMC BX-51B主要抗原血凝素（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶（neuraminidase,NA）的基因特征,并研究该疫苗株的传代稳定性.方法对制备的乙型流感病毒株主种子批、工作种子批及收获液病毒进行全面的生物学特性检定.采用逆转录-PCR法从主种子批、工作种子批及疫苗病毒收获液中扩增HA及NA基因片段,并进行全基因序列测定及分析.对7株不同年份的乙型疫苗株及野毒株的HA氨基酸序列进行比对,绘制氨基酸种系发生树.结果该毒株主种子批和工作种子批的抗原性与WHO2013年推荐的毒株一致,种子批和收获液病毒的生物学特性均符合我国2010年版药典标准.HA基因序列长度为1 755 bp,编码584个氨基酸;NA基因序列长度为1 401 bp,编码466个氨基酸.各代次流感病毒HA和NA的基因核苷酸和氨基酸序列均相同,与GenBank发布的序列完全一致,同源性为100％.2013年乙型疫苗株的HA氨基酸序列与2010和2012年相比,同源性分别为94.3％和98.4％.结论 2013年乙型流感疫苗株NYMCBX-51B主要抗原基因传代稳定,一般生物学特性符合我国药典要求.2013年疫苗株的HA氨基酸序列与2010年相比进化距离较远.; 刘朝阳程鹏飞闫现伟郁佳俊毛树宝; 关键词：流感疫苗流感病毒B型神经氨酸酶

不同剂量西林瓶包装的冻干皮内注射用卡介苗稳定性观察被引量：1: 2010年; 皮内注射用卡介苗其剂型从20世纪40年代的液体改为冻干后，至今在世界范围内接种人数已超过40亿，是世界上接种人数最多、最安全的疫苗之一。0．5～2ml装量的生物制品冻干粉针剂过去采用的内包装材料是2ml安瓿，为便于临床使用，现正用2R西林瓶逐步替代。; 景辉刘朝阳陈艳红徐宏基朱金华陈蓓沈立潆; 关键词：冻干粉针剂包装材料卡介苗西林瓶稳定性

高效表达干扰素α1b(IFN-α1b)工程菌的高密度发酵及干扰素纯化被引量：2: 2003年; 目的在构建高效表达IFN-α1b重组大肠杆菌工程菌的基础上,建立适合该工程菌的发酵和纯化工艺.方法采用高密度培养方法(HCDC)和柱层析纯化技术.结果发酵密度A600可达70,表达量为菌体总蛋白的30%左右.经破菌、离心、离子交换和分子筛凝胶过滤得到IFN-α1b纯品,FPLC测定纯度为100%,活性为4.99×107U/ml,比活为2.5×107U/mg,均符合2000版<中国生物制品规程>要求.结论已建立了适用于规模化生产的发酵纯化工艺.; 徐帆洪吴腾捷路煜叶凡王月红刘朝阳郭盛淇; 关键词：干扰素工程菌高密度发酵纯化

刘朝阳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

刘朝阳

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈