吴晓兰
- 作品数：24 被引量：64H指数：5
- 供职机构：中国人民解放军海军医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人内皮抑素与IL_3信号肽融合蛋白真核表达载体的构建被引量：8
- 2001年
- 目的构建IL_3信号肽与内皮抑素融合蛋白基因的真核表达载体。方法用PCR方法扩增IL_3信号肽序列和人内皮抑素基因,然后采用重叠延伸PCR拼接的方法将两者拼接和扩增。并将IL_3-endocl)NA克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中。结果 IL_3-endo融合蛋白基因包括了IL_3信号肽序列和人内皮抑素蛋白全长基因,基因总长度约701bp,被正确拼接,并克隆到pcDNA3.1(+)的CMV启动子下游。序列分析证实克隆序列、插入方向和读码框架均正确。结论成功的将IL_3信号肽序列连接到人内皮抑素基因序列前并构建了其真核表达载体,为以后的内皮抑素用于基因治疗打下了基础。
- 曹明媚潘卫陈秋莉马仲才倪之嘉吴晓兰武文斌潘欣曹广文戚中田
- 关键词：内皮抑素基因疗法真核表达载体基因扩增
- 乙型肝炎病毒核心蛋白突变体干扰HBV包装的实验研究被引量：1
- 2002年
- 目的 构建乙型肝炎病毒 (HBV)核心蛋白突变体基因的真核表达载体 ,转染HepG2细胞 ,观察其表达及干扰HBV颗粒包装的显性负调节作用。方法 采用PCR从质粒pHBVadr1 A1中扩增HBVC基因和S基因 ,分别克隆到 pGEM T载体上 ,构建成 pGEM T C和 pGEM T S。进而构建成 pGEM T CS载体 ,用HindⅢ切出克隆基因片段与 pcDNA3.1+ 连接 ,经PCR鉴定后构建成真核表达载体 pcDNA3.1+ CS。DNA测序显示基因融合正确。表达载体转染HepG2细胞 ,经G4 18筛选得到高拷贝转化子 ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测重组蛋白体外表达。用HBV阳性血清感染HepG2细胞 ,72h后抽提细胞内HBVDNA ,斑点杂交法分析各组DNA。结果 核心蛋白突变体在HepG2细胞内得到表达 ,且表达了该重组蛋白的HepG2细胞内HBVDNA量不同程度地低于对照组。表明重组蛋白具有抗HBV包装的DN突变体作用。结论 HBV核心蛋白与表面蛋白融合基因的真核表达载体 pcDNA3.1+ CS能够体外表达出核心蛋白突变体 。
- 武文斌潘卫温新宇曹广文吴晓兰潘欣陈秋莉戚中田
- 关键词：乙型肝炎病毒基因疗法
- 载脂蛋白E基因分型及其与疾病的关系
- 1997年
- 随着人类生活环境的改善和生活水平的提高,脂质代谢紊乱疾病也日益受到人们的重视。动脉粥样硬化、Ⅲ型高脂血症、糖尿病、阿尔茨海默氏病等脂质代谢紊乱疾病分别成为威胁人类健康的主要疾病之一。
- 吴晓兰王群
- 关键词：载脂蛋白E基因分型疾病
- 庚型肝炎病毒和人干扰素αA-2b cDNA噬菌体随机展示肽库的构建及鉴定
- 靶基因噬菌体随机展示肽库是用DNase Ⅰ降解特定基因所产生的随机DNA片
段替代合成库中随机合成的DNA片段，是噬菌体展示技术的最新应用。此类肽库
展示的外源肽具有序列来源的...
- 吴晓兰
- 关键词：噬菌体展示肽库庚型肝炎病毒干扰素ΑCDNA
- 文献传递
- 酪氨酸干预对应激大鼠血清皮质酮、促肾上腺皮质激素的影响
- 2007年
- 应激反应是一种多激素参与的复杂反应，其重点是肾上腺皮质激素。1936年加拿大病理生理学家H．Selye发表了第一篇关于应激的论文，报道在不同刺激因素，如感染、中毒、寒冷、高温及强烈精神刺激等作用下，机体出现以垂体一肾上腺轴（HPA）反应为中心的非特异性反应，而血清皮质酮（corticosterone，CORT）是经典的反应指标之一。
- 王晓花胡家庆章建程赵敏竺青吴晓兰徐灵活余浩殷明
- 关键词：促肾上腺皮质激素皮质酮酪氨酸非特异性反应
- 从HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库中筛选抗原表位被引量：13
- 2001年
- 目的探讨病毒抗原序列研究的新方法。方法应用噬菌体展示技术，筛选ＨＣＶ核心蛋白的抗原序列。用抗－ＨＣＶ核心抗体单独阳性的血清，对巳构建的ＨＣＶ核心蛋白噬菌体随机展示肽库进行４轮筛选，检测筛选阳性的克隆数、插入阳性率和杂交阳性率来评价筛选的效果。测定和分析７个杂交阳性克隆的ＤＮＡ序列。结果所测定的７个序列中，６个为ＨＣＶ核心蛋白序列，其中５个被正确地展示于噬菌体表面，１个可能被正确展示，这些序列均含有重要的ＨＣＶ核心抗原表位。另１个为大肠杆菌ｎｒｆａ基因。结论噬菌体展示技术完全可应用于病毒蛋白抗原序列的筛选，并具有简便、快速、准确的优点。
- 潘卫戚中田吴晓兰贺祥潘欣陈秋莉杜平
- 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白噬菌体随机肽库抗原
- ^(60)Co-γ射线全身低剂量率辐照对小鼠血浆中IL-12和IL-10的影响被引量：1
- 2006年
- 目的研究低剂量电离辐射对小鼠免疫系统影响的剂量率效应。方法以^(60)Co-γ射线为辐照源,低、中和高3个辐射剂量(0．075、0．5、2．0Gy),恒定剂量率(0．5 mGy/min)全身一次性照射小鼠,ELISA检测照射4h后血浆IL-12和IL-10的含量。结果低、中剂量照射后,血浆中IL-12、IL-10和IL-12/IL-10出现程度几乎相同地下降；但高剂量照射后,IL-12进一步显著下降,而IL-10上升至对照组水平,IL-12/IL-10比值进一步下降。结论恒定0．5mGy/min剂量率的^(60)Co-γ射线照射可损伤机体免疫功能,在0．075～0．5Gy剂量范围内损伤轻微,在2．0Gy时损伤明显,表明低剂量率电离辐射对免疫系统具有损伤作用。
- 高军竺青章建程吴晓兰龙建秋王海军李茂
- 关键词：低剂量率低剂量
- 噬菌体展示肽库在细胞信号转导研究中的应用被引量：5
- 2001年
- 马仲才吴晓兰戚中田
- 关键词：噬菌体展示肽库细胞信号转导信号蛋白
- 缺氧诱导因子1研究进展被引量：10
- 2000年
- 缺氧诱导因子1(HIF-1)在缺氧诱导的哺乳动物细胞中广泛表达,为缺氧应答的全局性调控因子。HIF-1由HIF-1α和HIF-1β两种亚基组成,为异源二聚体转录因子。HIF-1α、HIF-1β和近年来发现的HIF-2α一样均属于bHLH转录因子超家族中的PAS亚族。HIF-1α的bHLH和PAS结构域与二聚化及DNA结合活性有关,TAD结构域则主要参与转录激活。HIF-1α的全长基因已克隆并在人和小鼠中定位。通过作用于靶基因的缺氧反应元件(HRE),HIF-1参与缺氧诱导的一系列基因的表达调控。HIF-1在生物体的氧气供应、细胞代谢、心血管发育以及一系列疾病生理病理中起重要作用,其活性调节存在多种层次。HIF-1/HRE基因选择表达系统已被应用于基因治疗中。
- 吴晓兰
- 关键词：缺氧诱导因子1缺氧反应元件
- 琼脂糖凝胶PCR-RFLP对载脂蛋白E基因分型方法初探被引量：2
- 1997年
- 目的:从基因水平对apoE基因常见6种基因型(E2/2、E3/3、E4/4、E2/3、E3/4、E2/4)进行分型。方法:用PCR-RFLP、高浓度4％琼脂糖凝胶(Sigma)对PCR扩增片段HhaI限制性内切酶酶切产物电泳分型。结果:E3/3有91bp、48bp、38bp和35bp;E2/4有91bp、83bp、72bp、48bp、35bp;E2/3有91bp、83bp、48bp、38bp、35bp;E3/4有91bp、72bp、48bp、38bp、35bp。结论:琼脂糖凝胶PCR-RFLP法分辨率高、结果可靠、操作简便,为apoE遗传多态与临床代谢紊乱疾病关系提供一种有效的检测方法。
- 吴晓兰尹世达龙建秋杨书福何秋忠蒋凌波王群
- 关键词：PCRRFLPAPOE基因脂质代谢
