吴瑜
- 作品数：36 被引量：113H指数：8
- 供职机构：中山大学中山医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程教育部科学技术研究重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 白纹伊蚊体内Wolbachia和WO噬菌体的相对含量和侵染关系被引量：1
- 2012年
- 目的对白纹伊蚊雌蚊各个组织器官的Wolbachia和WO噬菌体进行时空定量分析,并从量上寻找Wolbachia、WO噬菌体和宿主三者之间的相关性,为进一步揭示这三者之间相互作用的分子机制奠定基础。方法分别于第1、5、10、15、20、30、40d各取雌蚊10只,麻醉后于解剖镜下解剖蚊虫的头部、卵巢、中肠、马氏管、脂肪体和胸部,各自提取其基因组DNA,以蚊虫基因rpS7为内参,Q-PCR检测各个组织中的Wolbachia和WO噬菌体的在白纹伊蚊雌蚊体内的平均相对含量和时空动态变化,对Wolbachia和WO噬菌体的拷贝数进行量化关系转化。结果 Q-PCR结果显示Wolbachia和WO噬菌体在蚊虫的卵巢中含量最大,其次是脂肪体、马氏管和头部,而在中肠和胸部的含量最小。发现在蚊虫d龄前30d中,wAlbB与WO噬菌体的动态变化趋势基本一致,且从拷贝数量上二者存在着线性关系。结论白纹伊蚊雌蚊的各个组织均存在wAlbA和wAlbB的双重感染和WO噬菌体的侵染,且这三者在卵巢中的含量远大于其他组织部位。WO噬菌体主要侵染的对象可能是wAlbB,而不是wAlbA。
- 张东京吴瑜何蔼杨潇吴贤生梁格豪郑展图李卓雅詹希美郑小英
- 关键词：白纹伊蚊WOLBACHIA
- 抗恙虫病东方体噬菌体抗体库的构建和初步筛选被引量：5
- 2008年
- 目的构建抗恙虫病东方体噬菌体抗体库并进行初步筛选,获得与恙虫病东方体膜抗原特异性结合的抗体克隆,为研制恙虫病的快速诊断试剂盒奠定基础。方法从感染恙虫病东方体小鼠的脾细胞中提取RNA,经逆转录、PCR扩增出抗体轻链和重链基因,将轻链基因和表达载体pComb3进行酶切、连接,转化大肠杆菌XL1-blue,构建轻链库;再对轻链重组质粒和重链Fd基因进行酶切、连接,转化大肠杆菌XL1-blue,构建组合文库,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染。用恙虫病东方体56kDa型特异性抗原作为筛选抗原,进行4轮富集筛选后用ELISA法进行阳性克隆的鉴定。结果构建了库容为3.46×106的鼠源性抗恙虫病东方体的噬菌体Fab片段抗体库。经过4轮富集筛选,抗体库中的目的抗体得以富集约160倍,并用ELISA法对其进行鉴定,得到了7个阳性克隆。结论构建的抗恙虫病东方体噬菌体抗体库,库容为3.46×106,滴度为2.5×1012cfu/ml,基本上达到了建库要求,能够满足多样性的需求,并成功的筛选出抗恙虫病东方体56kDa蛋白的抗体,用过氧化物酶标记的抗M13抗体进行了初步鉴定,认为具有一定的特异性。
- 黄会詹希美郑小英吴瑜何蔼李卓雅程梅尹应先张豪
- 关键词：恙虫病东方体噬菌体抗体库
- 家蝇拟除虫菊酯抗药性的分子生物学监测被引量：10
- 2004年
- 目的 建立一种可以早期检测昆虫拟除虫菊酯抗药性的方法 ,以利于抗药性的控制。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)方法 ,用自行设计的特异引物 ,对昆虫的钠离子通道基因进行扩增。结果 共检测敏感家蝇和溴氰菊酯抗性家蝇各 2 0只 ,在所有抗性家蝇的钠离子通道基因中均扩增出特定大小基因片段 ( 183bp) ,表明基因发生了抗性突变。而在所有敏感家蝇的钠通道基因中均未扩增出该基因片段 ,表明未发生基因突变。结论 PCR能够在短时间内完成对昆虫拟除虫菊酯抗性的检测 ,为早期监测昆虫对拟除虫菊酯的抗药性提供了快速可行的方法。
- 江毅民黄炯烈吴瑜
- 关键词：家蝇拟除虫菊酯抗药性钠离子通道聚合酶链反应
- 白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因的克隆与生物信息学分析
- 2009年
- 目的应用简并引物RT-PCR和RACE方法获取白纹伊蚊Rh类糖蛋白(Aedes albopictus rhesus-like glycoprotein,AaRh)基因的全长cDNA。方法根据冈比亚按蚊、埃及伊蚊等亲缘关系较近物种的Rh类糖蛋白同源性分析结果,在氨基酸高度保守区域184/343和219/337氨基酸位点设计2对简并引物,以白纹伊蚊雌蚊总RNA为模板,应用巢式RT-PCR扩增AaRh的基因片段。根据获得的AaRh基因部分序列,设计2对特异性引物AaRh GSP1、GSP2和AaRh GSP3、GSP4,应用5’RACE和3’RACE分别扩增AaRh基因的5’端和3’端cDNA片段,然后拼接出全长cDNA序列。通过在线生物信息学分析(NCBI和Expasy),对目的基因序列进行生物信息学分析。结果应用2对简并引物进行巢式RT-PCR,获得379 bp AaRh基因片段。应用5’RACE和3’RACE方法,分别获得AaRh基因5’端1008 bp、3’端822 bp cDNA序列,根据两个片段的首/尾共同序列拼接为1717 bp的基因片段。该核苷酸序列经BLASTn分析显示,与埃及伊蚊Rh蛋白的一致性高达95%,鉴定其为白纹伊蚊Rh类糖蛋白基因。AaRh基因具有完整的开放阅读框,其ORF从第128位到1516位含1389bp,编码462个氨基酸。Expasy在线生物信息学程序分析显示,白纹伊蚊Rh类糖蛋白是一个整合膜蛋白,跨膜11次,58aa-446aa具有铵离子通道的结构功能域;理论等电点(pI)5.37,分子量49775.10 Mr,1aa-26aa可能为分泌信号肽序列;含有4个潜在的天冬酰胺糖基化位点和17个线性抗原决定簇,翻译后可能进行糖基化修饰,提示其为糖蛋白。结论成功获取AaRh基因的全长cDNA,生物信息学分析结果为AaRh蛋白的生物学特性和功能研究奠定了基础。
- 吴瑜郑小英张美春何蔼李卓雅詹希美
- 关键词：白纹伊蚊
- 白蚊伊蚊经卵传递登革2型病毒的实验研究被引量：18
- 2005年
- 目的证明白蚊伊蚊亲代能够经卵传递登革2型病毒给子代,并且在传递过程中病毒毒力呈逐渐增强趋势。方法采用套式PCR分批检测感染雌蚊的子一代至子四代卵内登革病毒结合C6/36细胞培养分离病毒及TCID50法滴定病毒滴度。结果白蚊伊蚊能经卵传递DEN-2,至少可传四代以上;且在传代中病毒毒力有增强的趋势。结论实验证明白蚊伊蚊对登革2型病毒有较大的媒介效能,且在维持登革病毒的自然循环中起重要作用。
- 宋秀玲黄炯烈郑小英吴瑜王玲潘实清
- 关键词：登革2型病毒经卵传递
- 28种中草药乙醇提取液对蚊幼虫的杀伤作用被引量：9
- 2004年
- 目的了解丁香等28种中草药的乙醇提取液对蚊幼虫杀伤作用,寻找和开发安全有效的植物性杀虫剂。方法用乙醇分别提取28种中草药干样品植物成分。用2%的药物(每100ml溶液含2g生药)浸渍法处理致倦库蚊、白纹伊蚊敏感株Ⅲ龄末～Ⅳ龄初幼虫24h。结果13种中草药可致白纹伊蚊幼虫半数以上死亡;17种中草药可致致倦库蚊幼虫50%以上死亡,其中12种对两种幼虫都有50%以上的致死率。藜芦、漏芦和蛇床子3种药物可致白纹伊蚊幼虫全部死亡;百部等8种中草药可致库蚊幼虫全部死亡,其中藜庐等3种中草药可致两种蚊虫幼虫全部死亡。结论两种蚊虫幼虫对28种中草药的敏感性不同,其中藜芦、漏芦和蛇床子等中草药在蚊虫防治方面具有进一步开发利用的价值。
- 潘实清罗海华王玲吴瑜郑小英黄炯烈
- 关键词：中草药蚊幼虫杀伤作用
- 登革热疫点22年后的血清流行病学调查被引量：8
- 2009年
- 目的了解曾发生登革热流行的旧疫区健康人群抗登革病毒的抗体水平及分布。方法在1986年曾爆发Ⅱ型登革热疫情的黄埔区鱼珠街一带,对2周内无临床症状的健康人群横断面采样,收集血清,ELISA法检测血清中抗登革病毒IgG抗体,并和非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率进行比较。RT-PCR法检测抗体阳性者血清中登革病毒。结果登革热疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为23.3%,非疫点健康人群抗登革病毒IgG抗体阳性率为3.8%,两者差异有统计学意义(P<0.01);登革热疫点人群抗体阳性率与年龄成正相关,0～20、21～30、31～40、41～50、51～60、61～70和70岁以上各年龄组的抗体阳性率分别为3.8%、5.8%、9.1%、26.5%、27.7%、32.5%和35.1%。30岁以下年龄组与31～40岁年龄组、31～40岁年龄组与41～60岁年龄组、41～60岁年龄组与61岁年龄组间的抗登革病毒IgG抗体阳性率差异分别具有统计学意义(P<0.05)。登革热疫点和非疫点15岁以下中小学生滤纸血样标本中均未检测到抗登革病毒IgG抗体。RT-PCR法未检测到抗体阳性者血清中有登革病毒。结论登革热疫点人群抗登革病毒IgG阳性率明显高于非疫点人群,疫点人群抗体阳性率随年龄增长而上升,提示登革热疫点在登革热疫情后,登革病毒可能在蚊媒体内存在低密度的循环。
- 郑小英吴瑜张美春何霭李卓雅曲振宇詹希美
- 关键词：登革病毒登革热血清流行病学
- 沃尔巴克氏体wPip诱导白纹伊蚊胞质不相容的研究被引量：2
- 2017年
- 目的分析评估感染沃尔巴克氏体wPip株的白纹伊蚊(命名为GM)与广州本地白纹伊蚊(命名为GUA)和四环素去除GUA株Wolbachia感染的白纹伊蚊(命名为GT)正反杂交诱导产生胞质不相容(CI)的程度,为基于Wolbachia的蚊媒防治策略提供有应用价值的蚊株。方法设置不同时间点,观察GM株、GUA株、GT株三种蚊株的生长发育周期,成蚊后通过三种蚊株正反杂交,血餐,放置产卵杯,收集并计数蚊卵,分析不同杂交组合的蚊卵孵化率,评估GM株的CI程度。结果 PCR检测得出GUA株携带wAlbA、wAlbB,感染率100%;GM株单感染wPip,感染率100%;GT株未携带任何Wolbachia。三种蚊虫的生殖发育周期差异无统计学意义,GUA株的蚊卵孵化率与GT株和GM株相比较,差异有统计学意义(P<0.05),GM株和GT株差异无统计学意义(P>0.05)。诱导CI实验中GM(♀)′GUA(♂)、GUA(♀)′GM(♂)、GT(♀)′GM(♂)的蚊卵孵化率极低,CI强度接近100%。GM′GT具有一定的蚊卵孵化率。结论白纹伊蚊GUA株、GM株两者携带的Wolbachia类型不同,二者杂交可产生双向CI,并且CI强度接近100%,是种群压制技术良好的候选蚊株。
- 徐晓晗李永军吴瑜奚志勇郑小英
- 关键词：白纹伊蚊沃尔巴克氏体
- 白纹伊蚊实验种群感染沃尔巴体Wolbachia的研究
- 2012年
- 为了了解白纹伊蚊实验种群沃尔巴体Wolbachia感染率、感染品系、组织分布及系统发育,运用引物PCR方法检测实验种群白纹伊蚊Wolbachia 的感染情况.解剖白纹伊蚊,提取头部、卵巢/睾丸、脂肪体、唾液腺/胸部、马氏管、中肠组织的基因组DNA,PCR法扩增Wolbachia表面膜蛋白（wsp）,扩增产物进行克隆及测序,并用BLAST软件对其进行系统发育分析.将随机抽取的白纹伊蚊雌雄各50只分别检测,均为阳性.卵巢/睾丸、脂肪体和唾液腺/胸部均存在着Wolbachia A、B组超感染;雌蚊头部、雄蚊马氏管和中肠为B组单感染;雄蚊头部则未检测到Wolbachia.将wsp基因克隆测序后进行系统发育分析显示白纹伊蚊体内Wolbachia与尖音库蚊、菜蛾、宽边黄粉蝶四者同源性较高达99%,这表明四者体内所感染的Wolbachia可能来源于同一个分支.
- 张东京杨潇吴贤生陈婧李卓雅吴瑜詹希美郑小英
- 关键词：白纹伊蚊系统发育
- 寄生虫学选修课的教学模式探讨被引量：3
- 2013年
- 中山大学中山医学院寄生虫学教研室面向校内各专业学生开设通识课程:个人健康:寄生虫病及虫媒病防治,旨在普及常见的寄生虫病和虫媒病知识,培养学生健康的卫生习惯,同时扩大人体寄生虫学国家精品课程的影响力。文章对该课程的内容设置、教学方法、教学效果等方面进行介绍,探讨如何更好发挥寄生虫学师资力量,服务学校和社会。
- 吴瑜郑小英何蔼吴忠道
- 关键词：寄生虫学教学模式选修课
