周月鹏
- 作品数：33 被引量：90H指数：5
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- FlowCytomix检测类风湿关节炎患者细胞因子表达谱
- 2016年
- 目的应用Flow Cytomix检测类风湿关节炎患者(RA)细胞因子表达谱,探讨其在RA发病及治疗中的作用。方法分离RA患者及健康对照者外周血单个核细胞(PBMCs),经PHA刺激后,收集细胞培养上清,Flow Cytomix检测上清中细胞因子浓度。结果与健康对照组相比,RA患者IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α水平均显著升高(P<0.05),但IFN-γ水平显著降低(P<0.05),IL-10水平无明显改变。RA患者疾病活动组IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α水平显著高于缓解组(P<0.05),但IFN-γ水平低于缓解组(P<0.05);IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α、IFN-γ水平与DAS28评分显著相关(P<0.05)。结论 Flow Cytomix多细胞因子检测系统可特异、灵敏地检测RA患者PBMCs中细胞因子产生,RA患者PBMCs中IL-17、IL-6、IL-1β、TNF-α水平反映了其关节的炎症程度及活动状态。
- 汪雪峰舒扬汪毅周月鹏毛朝明
- 关键词：类风湿关节炎细胞因子表达谱
- IL-23通过活化DLL4/Notch1途径增强食管鳞状细胞癌细胞的迁移能力
- 2015年
- 目的检测白细胞介素23(IL-23)对食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞迁移能力的影响,并探讨其促进癌细胞迁移的潜在机制。方法免疫组织化学染色法检测10例ESCC患者癌组织与癌旁组织中IL-23表达;荧光定量PCR检测不同浓度IL-23处理后,ESCC细胞TE-1中Notch1和Foxn4 mRNA的表达;用γ分泌酶抑制剂DAPT阻断Notch通路后,Western blot法检测IL-23处理前后TE-1细胞中Notch受体胞内段(NICD)、Delta样配体4(DLL4)、发状分裂相关增强子1(Hes1)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平;通过TranswellTM实验验证IL-23对ESCC细胞迁移能力的影响。结果与癌旁组织相比,肿瘤组织中IL-23高表达;IL-23可明显上调TE-1细胞的Notch受体及配体相关转录因子的表达;阻断Notch1通路活化可以抑制由IL-23诱导产生的迁移相关蛋白的表达;IL-23处理促进ESCC细胞的迁移。结论 IL-23通过活化DLL4/Notch1通路增强ESCC细胞的迁移能力。
- 李蔚周月鹏苏玉婷欧阳艺波谢晓东吴荧荧毛朝明陈德玉
- 关键词：IL-23食管鳞状细胞癌迁移NOTCH
- 胶质瘤U251细胞中CD133表达及干细胞特性分析被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨CD133+细胞的生物学特性,分析CD133作为胶质瘤干细胞标记的可行性。方法:利用免疫荧光染色检测U251细胞中CD133、巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等蛋白表达,分析CD133+细胞与CD133-细胞中巢蛋白、NSE、GFAP阳性细胞存在的差异。结果:U251中CD133+细胞比例为0.060±0.003,在CD133+细胞中,巢蛋白阳性细胞,NSE和GFAP阴性细胞比CD133-中明显增多;在CD133-细胞中,也存在巢蛋白阳性细胞,数目较CD133+中明显减少,相反巢蛋白阴性细胞,NSE和GFAP阳性细胞明显增多。结论:胶质瘤U251细胞存在CD133+细胞,在CD133阳性和阴性细胞中,均存在干细胞样细胞,但是在CD133+细胞中此类细胞更多。
- 杨伟现欧阳琦周月鹏王存祖张志坚向定朝许慧中陆晓峰
- 关键词：胶质瘤肿瘤干细胞
- 大鼠角膜穿通伤后局部应用IL-10抑制视网膜炎症和抗神经溃变的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:观察角膜穿通伤后局部应用IL-10对视网膜炎症反应的抑制和对神经溃变的保护作用。方法:将清洁级成年雌性SD大鼠50只,随机分为对照组(8只)、损伤组和治疗组,后两组(每组21只)再分为损伤1 d、2 d和3d组(每小组7只)。损伤组用无菌注射器刺穿眼球颞侧角膜缘角膜,制作角膜穿通伤模型。治疗组在角膜穿通伤后用IL-10溶液滴眼。各组2只大鼠用于制作眼球切片,免疫荧光染色观察角膜穿通伤后炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α以及神经丝蛋白-200(neurofilament protein-200,NF-200)、血影蛋白(α-Ⅱspectrin)及钙蛋白酶2(m-calpain)在视网膜中的分布特征;另5只大鼠用于提取视网膜蛋白,采用免疫印迹法检测各组大鼠于角膜穿通伤24,48,72 h后,视网膜组织内NF-200和血影蛋白降解产物以及活性钙蛋白酶2相对含量的动态变化。结果:对照组视网膜结构层次清楚,IL-1β、IL-6、TNF-α和m-calpain免疫荧光很弱;血影蛋白和NF-200免疫荧光染色可清晰显示阳性神经纤维;角膜穿通伤后,视网膜结构层次模糊,TNF-α、IL-1β,IL-6和m-calpain免疫荧光增强,主要分布在内层;NF-200和血影蛋白免疫荧光染色显示阳性神经纤维明显减少;IL-10治疗后,TNF-α、IL-1β,IL-6和m-calpain免疫荧光减弱,血影蛋白和NF-200阳性神经纤维明显多于损伤组。免疫印迹检测结果表明,损伤组视网膜组织内大分子的NF-200和血影蛋白含量逐渐减少,其小分子的降解产物以及小分子的活性m-calpain逐渐增加;在IL-10治疗组,NF-200和血影蛋白的降解产物以及活性m-calpain的增加程度明显减轻。结论:角膜穿通伤可刺激视网膜细胞高表达炎症因子IL-1β,IL-6和TNF-α,导致组织的炎症损伤,同时激活m-calpain,后者降解视网膜细胞骨架蛋白NF-200和血影蛋白,造成神经溃变;局部应用IL-10可减轻炎症反应,抑制m-calpain对骨架蛋白的降解,从而对视网膜细胞产生保护作用。
- 黄燕周月鹏肖寿华张志坚
- 关键词：角膜穿通伤白介素-10
- 成人鼻黏膜间充质干细胞的体外培养和多向诱导分化被引量：9
- 2012年
- 目的:观察成人鼻腔呼吸黏膜内间充质干细胞(MSCs)的分布特征,建立鼻黏膜MSCs的体外培养方法,探讨该细胞向神经细胞及成骨细胞分化的潜能。方法:将成人鼻腔呼吸黏膜制成冷冻切片,用Nestin和Vi-mentin抗体进行免疫荧光染色,观察MSCs在鼻黏膜内的分布特征。对鼻黏膜细胞进行体外培养、传代,扩增出MSCs,用干细胞标志蛋白Nestin,CD133,Vimentin和Sall4的抗体进行免疫荧光染色,鉴定该细胞的干细胞特性;分别用成骨诱导培养液(含地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠)及神经诱导培养液(Neurobasal培养液含B27,ATRA,TSA)诱导MSCs向成骨细胞和神经细胞定向分化;用组织化学染色和免疫荧光染色方法评价其诱导分化效果。结果:Nestin和Vimentin免疫荧光染色阳性的MSCs主要存在于鼻黏膜的固有层内,通过体外培养、传代,可扩增出大量的MSCs,该细胞表达干细胞标志蛋白Nestin,CD133,Vimentin和Sall4;用成骨诱导剂诱导培养后,该细胞的碱性磷酸酶活性明显增强,茜素红染色显示细胞表面形成大量的钙结节;经神经诱导培养液诱导培养后,细胞生长出细长突起并互相连接成网,细胞高表达神经细胞标志蛋白NF-200和BM88。结论:成人鼻腔呼吸黏膜固有层内广泛存在MSCs,该细胞具有多向分化潜能,可作为种子细胞用于自体移植修复骨和神经组织损伤。
- 黄秋生陆汉强周月鹏贺清华孙湘兰姜平张志坚
- 关键词：鼻黏膜诱导分化成骨细胞神经细胞
- EGCG协同放射治疗诱导食管鳞癌TE-1细胞凋亡机制的研究被引量：4
- 2016年
- 目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合放射治疗(放疗)对食管癌TE-1细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法选择人食管癌细胞株TE-1作为研究对象,并分成对照组、EGCG组、放疗组和联合组(EGCG+放疗)。MTT法检测不同浓度EGCG、不同放射剂量单用和联用对食管癌TE-1细胞生长的影响;流式细胞术检测不同处理组细胞凋亡情况;Western blotting检测经不同处理后TE-1细胞凋亡相关蛋白cleaved caspase-3和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达情况。结果 EGCG和放疗均能抑制食管癌TE-1细胞的增殖,但EGCG与放疗联合的抑制作用显著高于EGCG组或放疗组(P<0.01),呈浓度-剂量依赖性。流式细胞术检测结果显示,与单独放疗组细胞相比,EGCG联合放疗可以明显提高X射线诱导的TE-1细胞凋亡(P<0.01),上调cleaved caspase-3的表达(P<0.05)和下调Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。结论 EGCG能够协同放疗增加食管癌TE-1细胞的凋亡,这种作用可能与cleaved caspase-3和Bcl-2有关。
- 刘申吒韩国虎周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：表没食子儿茶素没食子酸酯食管鳞状细胞癌细胞凋亡
- 干细胞标志蛋白在成人鼻黏膜嗅鞘细胞的表达
- 2012年
- 目的建立成人鼻黏膜嗅鞘细胞的体外培养方法,探讨干细胞标志蛋白在人嗅鞘细胞的表达及其意义,为嗅鞘细胞自体移植治疗中枢神经系统损伤提供可行性研究资料。方法用鼻内镜自成人(鼻中隔偏曲伴黏膜肥厚者)鼻腔活体钳取部分嗅区黏膜,经胰酶消化制成细胞悬液。细胞接种于玻璃培养瓶,用含10%胎牛血清的F12培养基培养、传代、扩增。用免疫细胞化学或免疫荧光染色和免疫印迹方法检测SOX-2、SOX-10、Nestin、NCAM、NGFRp75和S100-β在第7代嗅鞘细胞的表达。结果成人嗅黏膜细胞经过多次传代培养后,嗅鞘细胞逐渐成为优势细胞,该细胞高表达干细胞标志蛋白和嗅鞘细胞标志蛋白。结论成人嗅黏膜细胞体外培养可获得高产量的许旺细胞(Schwann cells,Scs)样嗅鞘细胞,该细胞具有干细胞特性(stemness)和很强的增殖能力,可作为自体细胞移植治疗中枢神经系统损伤的种子细胞。
- 黄秋生陆汉强周月鹏贺清华孙湘兰陈谦龚爱华姜平张志坚
- 关键词：嗅黏膜细胞培养技术干细胞特性
- 干扰乙酰辅酶A合成酶2对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2021年
- 目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthase 2,ACSS2)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:选用正常乳腺上皮MCF-10A细胞与三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法分别检测及比较两者ACSS2 mRNA和蛋白表达差异;设计并合成针对ACSS2的特异性干扰RNA(siRNA-ACSS2)及无序序列的阴性对照(siRNA-NC),分别瞬时转染MDA-MB-468细胞并采用qRT-PCR和蛋白质印迹法鉴定其干扰效果;采用CCK-8法检测转染后MDA-MB-468细胞增殖能力;流式细胞术检测MDA-MB-468细胞转染后细胞凋亡水平;蛋白质印迹法检测MDA-MB-468细胞中PI3K/AKT信号通路以及凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、Bcl-2、Bax和增殖相关蛋白Ki-67等表达。结果:MDA-MB-468细胞中ACSS2 mRNA和蛋白表达水平明显高于MCF-10A细胞(P<0.01);与阴性对照组细胞相比,靶向干扰MDA-MB-468细胞ACSS2表达后细胞增殖活力明显下降(P<0.01),细胞凋亡水平明显上升(P<0.01),p-PI3K、p-AKT、Ki-67和Bcl-2表达明显降低(P均<0.01),cleaved-caspase-3、Bax表达明显上升(P均<0.01)。结论:干扰ACSS2表达可能通过PI3K/AKT信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖和促进凋亡发生。
- 傅聪周月鹏尹超云凌锐浦希汤翔陈德玉
- 关键词：三阴性乳腺癌RNA干扰增殖凋亡
- H2-calponin在食管鳞癌中的表达及意义被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨H2-钙调理蛋白(H2-calponin)在食管鳞癌中的表达及意义。方法:免疫组化技术检测30例食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织芯片中H2-calponin的表达水平;体外培养人食管鳞癌ECA109、TE-1细胞株和正常食管上皮Het-1a细胞;荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞株中H2-calponin的表达;将食管鳞癌TE-1细胞分为空白对照组(常规培养)、阴性对照组(转染空载体siRNA)和H2-calponin siRNA组(转染H2-calponin siRNA),采用蛋白质印迹法测定细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、内皮生长因子-A(VEGF-A)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)蛋白的表达;ELISA法测定各组细胞培养上清液中MMP-2,MMP-9和VEGF-C含量;荧光定量PCR检测NF-κB通路抑制剂PDTC处理前(0 h)及处理后0.5,1,2,4,8,12 h H2-calponin mRNA的表达;蛋白质印迹技术检测H2-calponin及NF-κB通路蛋白的表达。结果:免疫芯片结果显示,食管鳞癌组织中H2-calponin表达量低于癌旁组织,H2-calponin阳性表达率与食管鳞癌患者性别、年龄、肿瘤部位及病理分级之间无明显相关性(P均>0.05);荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中H2-calponin表达明显低于正常食管细胞(P<0.01);下调H2-calponin表达后,PCNA、E-钙黏蛋白和VEGF-A表达无明显变化,而波形蛋白、MMP-2、MMP-9和VEGF-C表达明显增加;ELISA结果显示,MMP-2、MMP-9和VEGF-C分泌量明显增加(P<0.05);PDTC处理后可显著增加IκBα的蛋白表达进而恢复并上调H2-calponin的表达(P<0.01)。结论:NF-κB通路通过抑制H2-calponin表达保证波形蛋白,MMP-2,MMP-9,VEGF-C持续表达,促进食管鳞癌细胞侵袭、转移发生。
- 周玲凌锐周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：NF-KB食管鳞癌
- 芳香化酶抑制剂治疗雌激素相关肿瘤引起代谢失衡的研究进展被引量：5
- 2021年
- 雌激素相关肿瘤是女性较为常见的恶性肿瘤类型。绝经前妇女雌激素主要由卵巢分泌,而绝经后雌激素的重要来源为芳香化酶催化雄激素转化为雌激素,因此芳香化酶抑制剂(aromatase inhibitors,AIs)作为绝经后乳腺癌、子宫内膜癌和上皮性卵巢癌的治疗药物在临床上得到广泛应用。AIs的使用会带来多种不良后果,如潮热、骨痛、骨质疏松和增加心血管疾病的风险等,但其引起的代谢失衡尤为重要。本文综述AIs治疗后可能带来的代谢失衡,分析代谢紊乱发生的原因,提出了采用联合使用二甲双胍和联合运动的方式改善AIs治疗雌激素相关肿瘤所致代谢失衡的新思路。
- 浦希周月鹏陈德玉
- 关键词：芳香化酶抑制剂雌激素肿瘤
