凌锐
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
- 供职机构：江苏大学附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吴阶平医学基金江苏省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- H2-calponin在食管鳞癌中的表达及意义被引量：2
- 2018年
- 目的:探讨H2-钙调理蛋白(H2-calponin)在食管鳞癌中的表达及意义。方法:免疫组化技术检测30例食管鳞癌患者癌组织及癌旁组织芯片中H2-calponin的表达水平;体外培养人食管鳞癌ECA109、TE-1细胞株和正常食管上皮Het-1a细胞;荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测食管鳞癌细胞株中H2-calponin的表达;将食管鳞癌TE-1细胞分为空白对照组(常规培养)、阴性对照组(转染空载体siRNA)和H2-calponin siRNA组(转染H2-calponin siRNA),采用蛋白质印迹法测定细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、E-钙黏蛋白(E-cadherin),波形蛋白以及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9、内皮生长因子-A(VEGF-A)、血管内皮生长因子-C(VEGF-C)蛋白的表达;ELISA法测定各组细胞培养上清液中MMP-2,MMP-9和VEGF-C含量;荧光定量PCR检测NF-κB通路抑制剂PDTC处理前(0 h)及处理后0.5,1,2,4,8,12 h H2-calponin mRNA的表达;蛋白质印迹技术检测H2-calponin及NF-κB通路蛋白的表达。结果:免疫芯片结果显示,食管鳞癌组织中H2-calponin表达量低于癌旁组织,H2-calponin阳性表达率与食管鳞癌患者性别、年龄、肿瘤部位及病理分级之间无明显相关性(P均>0.05);荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中H2-calponin表达明显低于正常食管细胞(P<0.01);下调H2-calponin表达后,PCNA、E-钙黏蛋白和VEGF-A表达无明显变化,而波形蛋白、MMP-2、MMP-9和VEGF-C表达明显增加;ELISA结果显示,MMP-2、MMP-9和VEGF-C分泌量明显增加(P<0.05);PDTC处理后可显著增加IκBα的蛋白表达进而恢复并上调H2-calponin的表达(P<0.01)。结论:NF-κB通路通过抑制H2-calponin表达保证波形蛋白,MMP-2,MMP-9,VEGF-C持续表达,促进食管鳞癌细胞侵袭、转移发生。
- 周玲凌锐周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：NF-KB食管鳞癌
- Wnt1诱导分泌蛋白-1通过NF-κB通路促进食管鳞癌细胞的增殖和侵袭转移被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨Wnt1诱导分泌蛋白-1(Wnt1 induced secreted protein-1,WISP-1)在食管鳞癌细胞侵袭转移的作用机制。方法:体外培养人食管鳞癌细胞株Eca109、TE-8和正常食管上皮细胞Het-1a,荧光定量PCR和蛋白质印迹检测WISP-1表达。将食管鳞癌细胞株Eca109和TE-8分为空白对照组、阴性对照组和WISP-1 siRNA组,利用CCK8法检测各组细胞增殖改变;流式细胞术分析不同处理组细胞凋亡率;Transwell实验检测细胞侵袭能力变化;蛋白质印迹法检测细胞中VEGF-A,VEGF-C,MMP2,MMP9以及NF-κB通路相关蛋白的表达量;酶联免疫吸附法测定培养上清液中VEGF-C和MMP9分泌量。结果:荧光定量PCR和蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌细胞中WISP-1表达量高于正常食管上皮细胞(P<0.01);CCK8和流式细胞术结果显示,下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株增殖明显抑制(P<0.05),凋亡率无明显影响;蛋白质印迹结果显示,下调WISP-1对VEGF-A和MMP2表达无明显影响,而VEGF-C和MMP9表达明显得到抑制;酶联免疫吸附结果显示,VEGF-C和MMP9分泌量随WISP-1下调也出现明显下降(P<0.05);下调WISP-1后,食管鳞癌细胞株侵袭能力明显降低(P<0.01);下调WISP-1表达显著抑制NF-κB磷酸化并促进IκBα的磷酸化,抑制NF-κB信号活化水平。结论:WISP-1可通过NF-κB通路,增加MMP9,VEGF-C的表达和分泌,促进食管鳞癌细胞增殖及侵袭转移的能力。
- 凌锐周玲周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：食管鳞状细胞癌VEGF-CMMP9NF-KB信号通路
- 深部热疗辅助安罗替尼治疗晚期肺腺癌的临床疗效及安全性
- 2023年
- 目的探讨深部热疗辅助安罗替尼治疗晚期肺腺癌患者的临床疗效和安全性。方法筛选2020年6月至2021年12月扬州大学附属靖江市人民医院肿瘤内科收治的46例晚期肺腺癌患者,根据随机数字表法分为对照组(安罗替尼组)和治疗组(安罗替尼联合深部热疗组),每组患者各23例。治疗12周后进行影像学和相关血液学评估。主要观察晚期肺腺癌患者的临床疗效、症状改善、不良反应发生率、血清肿瘤标志物和生活质量等指标。结果治疗组患者客观缓解率(objectiveresponserate,ORR)(65.21%vs.34.78%)和疾病控制率(diseasecontrol rate,DCR)(91.30%vs.60.87%)均优于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=4.261,5.855;P=0.039,0.016)。治疗组患者咳嗽、气急、胸痛、疲乏、咳血、食欲下降好转率均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,治疗组患者胃肠道反应发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者治疗前的癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平及其阳性率均高于治疗后;治疗后对照组患者的CEA、VEGF水平及其阳性率均高于治疗组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组患者的CD3、CD4水平均高于治疗前(P<0.05),治疗组患者的CD3、CD4水平均高于对照组;两组患者治疗前的CD3、CD4水平均低于治疗后,差异均具有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组患者生活质量评分优于对照组(65.22%vs.34.78%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.261,P=0.039)。结论深部热疗辅助安罗替尼治疗晚期肺腺癌患者可明显提高ORR和DCR,缓解患者咳嗽、气急、胸痛、疲乏、咳血、食欲下降等不适表现,有效减轻药物不良反应,提升患者免疫功能,改善生活质量。
- 刘申吒孙长春崔丽华王钊黄余峰于立江凌锐韩国虎
- 关键词：深部热疗晚期肺癌临床疗效
- 低剂量阿帕替尼联合热疗治疗晚期二线治疗失败胃癌的临床疗效评价
- 2023年
- 目的评估低剂量阿帕替尼联合热疗应用于二线治疗失败后的晚期胃癌患者的临床疗效和安全性。方法随机选取2020年12月—2021年12月扬州大学附属靖江市人民医院收治的80例二线治疗失败的晚期胃癌患者为研究对象,根据随机数表法分为联合组和靶向治疗组,各40例,靶向治疗组患者口服阿帕替尼250 mg/d治疗,联合组患者在对照组基础上联合热疗,观察两组患者的临床疗效、不良反应、KPS及癌痛评分。结果联合组DCR(90.0%)优于靶向治疗组(72.5%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.021,P=0.045)。联合组与靶向治疗组的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。联合组KPS评分好转率(65.0%)优于靶向治疗组(37.5%),差异有统计学意义(χ^(2)=6.054,P=0.014)。联合组癌痛评分低于靶向治疗组,差异有统计学意义(P<0.001)。结论对于晚期的胃癌患者采用口服低剂量阿帕替尼联合热疗具有较好的临床治疗效果,且不良反应发生率低,能够确保抗肿瘤治疗的有效性和安全性,可作为临床晚期胃癌患者的一种治疗选择。
- 刘申吒孙长春于立江崔丽华侯娟王钊凌锐韩国虎陈德玉
- 关键词：热疗晚期胃癌化学治疗
- ACSS2上调参与食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗被引量：3
- 2017年
- 目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)上调对食管鳞癌细胞缺氧诱导的放疗抵抗效应形成的影响及潜在的分子作用机制。方法:免疫组化及免疫荧光技术细胞共定位检测65例食管鳞癌患者组织切片中ACSS2和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达和活化水平;将食管鳞癌ECA-109细胞分为对照组、ACSS2 siRNA组、缺氧组和缺氧+ACSS2 siRNA组,利用克隆形成实验检测不同处理组细胞对不同照射剂量(0、2、4、6、8 Gy)的放射敏感性;选择8 Gy照射处理后,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡,蛋白质印迹法检测各组细胞凋亡相关蛋白cleaved-caspase 3/caspase 3、Bcl-2的表达及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、核糖体蛋白S6激酶(p70S6)等信号通路蛋白的表达。结果:食管鳞癌病理切片中ACSS2高表达,细胞密集区域尤为明显,与p-mTOR呈显著正相关(r=0.707,P<0.01);细胞克隆实验表明缺氧组细胞的存活分数比对照组明显下降(P<0.01),放疗敏感性降低,下调ACSS2可以逆转这一趋势;缺氧环境诱导的ACSS2升高促进了ECA-109细胞Bcl-2表达上调、抑制了cleaved-caspase 3的表达,同时细胞凋亡率下降(P<0.01);在缺氧条件下,下调ACSS2可以抑制mTOR信号通路相关蛋白mTOR、p-mTOR、p70S6的活化。结论:缺氧条件下的ACSS2累积通过活化mTOR通路促进放疗抵抗效应。
- 朱宇胡格凌锐周玲周月鹏陈德玉
- 关键词：电离辐射食管鳞状细胞癌MTOR信号通路
- 敲低乙酰辅酶A合成酶短链家族成员2(ACSS2)抑制营养缺乏诱导的宫颈癌细胞迁移和侵袭及机制被引量：2
- 2019年
- 目的探讨营养缺乏诱导的乙酰辅酶A合成酶短链家族成员2(ACSS2)表达上调对宫颈癌细胞侵袭和迁移能力的作用机制.方法免疫组织化学染色法检测井比较20对宫颈癌组织及癌旁组织中ACSS2的表达差异.培养宫颈癌HeLa细胞和HCvEpC宫颈正常上皮细胞,将培养血清由100 ml/L降至10 mL/L进行营养缺乏处理.Western blot法检测细胞ACSS2及GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、E-actin、E-cadherin、vimentin的蛋白水平.小干扰RNA(siRNA)靶向下调ACSS2表达,划痕实验检测细胞迁移能力的改变,Transwell^TM实验观察细胞侵袭能力.结果与癌旁正常组织相比,宫颈癌瘤体组织中ACSS2表达较高;营养缺乏处理可上调宫颈癌HeLa细胞ACSS2蛋白水平,HCvEpC宫颈正常上皮细胞未见明显变化;营养缺乏处理可以促进HeLa细胞上皮间质转化(EMT)发生,靶向抑制ACSS2可有效逆转这一进程;营养缺乏处理促使HeLa细胞愈合率增加,敲低ACSS2愈合率降低;营养缺乏处理上调宫颈癌细胞的侵袭能力,敲低ACSS2侵袭细胞数减少;营养缺乏处理48 h后,宫颈癌细胞中ACSS2、磷酸化的糖原合成酶激酶-3β(p-GSK-3β)以及核内β-catenin蛋白表达均有升高;敲低ACSS2后,可抑制营养缺乏诱导的Wnt/β-catenin信号活化.结论敲低ACSS2水平可以有效逆转营养缺乏诱导的宫颈癌侵袭和迁移,可能与抑制Wnt/β-catenin信号活化相关.
- 苏玉婷凌锐周月鹏陈德玉
- 关键词：宫颈癌HELA细胞营养缺乏
- 干扰乙酰辅酶A合成酶2对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2021年
- 目的:研究乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthase 2,ACSS2)对三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞增殖和凋亡的影响及可能的机制。方法:选用正常乳腺上皮MCF-10A细胞与三阴性乳腺癌MDA-MB-468细胞,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法分别检测及比较两者ACSS2 mRNA和蛋白表达差异;设计并合成针对ACSS2的特异性干扰RNA(siRNA-ACSS2)及无序序列的阴性对照(siRNA-NC),分别瞬时转染MDA-MB-468细胞并采用qRT-PCR和蛋白质印迹法鉴定其干扰效果;采用CCK-8法检测转染后MDA-MB-468细胞增殖能力;流式细胞术检测MDA-MB-468细胞转染后细胞凋亡水平;蛋白质印迹法检测MDA-MB-468细胞中PI3K/AKT信号通路以及凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3、Bcl-2、Bax和增殖相关蛋白Ki-67等表达。结果:MDA-MB-468细胞中ACSS2 mRNA和蛋白表达水平明显高于MCF-10A细胞(P<0.01);与阴性对照组细胞相比,靶向干扰MDA-MB-468细胞ACSS2表达后细胞增殖活力明显下降(P<0.01),细胞凋亡水平明显上升(P<0.01),p-PI3K、p-AKT、Ki-67和Bcl-2表达明显降低(P均<0.01),cleaved-caspase-3、Bax表达明显上升(P均<0.01)。结论:干扰ACSS2表达可能通过PI3K/AKT信号通路抑制MDA-MB-468细胞增殖和促进凋亡发生。
- 傅聪周月鹏尹超云凌锐浦希汤翔陈德玉
- 关键词：三阴性乳腺癌RNA干扰增殖凋亡
- ACSS2通过PI3K/AKT信号通路调控食管鳞癌细胞的顺铂敏感性
- 2020年
- 目的:探讨乙酰辅酶A合成酶2(acetyl-CoA synthetase 2,ACSS2)表达对食管鳞癌细胞顺铂(cisplatin,DDP)敏感性的影响和可能机制。方法:通过免疫组化和蛋白质印迹法检测40对食管鳞癌瘤体和癌旁组织中ACSS2蛋白的表达。蛋白质印迹法验证食管鳞癌细胞株TE-1、ECA-109和KY-SE150与正常食管鳞状细胞Het-1A中ACSS2的表达差异;利用脂质体转染siRNA-ACSS2或者慢病毒转染LV-ACSS2至TE-1细胞构建ACSS2下调或过表达细胞株;CCK8实验检测下调ACSS2对顺铂IC50值的改变;顺铂处理(5μg/mL)前后,流式细胞术检测ACSS2干扰处理对TE-1细胞凋亡水平的影响;蛋白质印迹检测PI3K/AKT信号通路及凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3的表达。结果:免疫组化及蛋白质印迹结果显示,食管鳞癌组织中ACSS2蛋白表达显著高于癌旁组织(P<0.001),食管鳞癌细胞株中ACSS2表达水平明显高于正常鳞状上皮细胞Het-1A。CCK8结果显示siRNA-ACSS2处理显著下调TE-1细胞对顺铂的IC50值(P值均<0.05);流式细胞术结果证实,抑制ACSS2表达可显著上调食管鳞癌细胞凋亡率(P<0.01);结合5μg/mL顺铂处理,ACSS2干扰后TE-1细胞凋亡率明显上升(P值均<0.001);蛋白质印迹结果表明,顺铂处理上调TE-1细胞中ACSS2及p-PI3K、p-AKT的表达;顺铂作用下,靶向抑制ACSS2后可见p-PI3K、p-AKT的显著降低而凋亡相关蛋白cleaved-Caspase-3表达量明显升高,过表达ACSS2在维持PI3K/AKT信号活化的同时可有效逆转cleaved-Caspase-3的形成。结论:ACSS2通过调控PI3K/AKT信号通路活化以及cleaved-Caspase-3表达参与食管鳞癌细胞顺铂敏感性调节。
- 高星宇王景芝凌锐周月鹏毛朝明陈德玉
- 关键词：顺铂食管鳞癌化疗敏感性PI3K/AKT
