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淋病奈瑟球菌表面蛋白A基因疫苗的构建及其诱导小鼠的免疫应答被引量：5: 2007年; 目的构建淋病奈瑟球菌表面蛋白A(NspA)基因疫苗,并接种小鼠,评价其诱导的体液和细胞免疫应答。方法将NspA基因插入到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)/NspA,并经PCR、双酶切及测序鉴定。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学法分别检测NspA基因转染细胞后mRNA和蛋白的表达。以pcDNA3.1(+)/NspA重组质粒免疫45只雄性BALB/c小鼠,试管凝集法检测免疫小鼠抗体滴度,EIASA检测IFN-γ水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测脾淋巴细胞增殖。提取接种部位股四头肌总DNA,PCR检测BALB/c小鼠肌细胞内NspA基因。结果成功构建pcDNA3.1(+)/NspA基因疫苗,能在真核细胞中转录和表达。pcDNA3.1(+)/NspA免疫组的抗体滴度达1:640,pcDNA3.1(+)和PBS免疫组均无特异性抗体检出。空载体pcDNA3.1(+)组IFN-γ为(23.79±11.85)pg/mL,pcDNA3.1(+)/ NspA免疫组为(169.71±30.52)pg/mL(P<0.01);脾淋巴细胞增殖的刺激指数(SI)分别为1.05±0.30和1.94±0.74(P<0.01)。并证实NspA基因可在小鼠肌细胞中稳定存在。结论构建淋病奈瑟球菌NspA基因疫苗,将其免疫BALB/c小鼠可诱导特异性体液和细胞免疫应答,为进一步用于淋病预防奠定了基础。; 谢良伊胡四海唐湘云杨胜辉余敏君韩福郎; 关键词：膜蛋白质类抗体生成

余甘子中水溶性鞣质的抗动脉粥样硬化作用机制研究被引量：12: 2007年; 目的在细胞水平证实中药余甘子(Phyllanthus Emblica L.)的两个可溶性鞣质成分Phy-13(beta-1-O-galloyl-3,6-(R)-hexahydroxydiphenoyl-d-glucose)和Phy-16(1,6-di-O-galloyl-beta-d-glucose)是否具有抗动脉粥样硬化作用。方法人脐动脉内皮细胞ECV-304经ox-LDL(50 mg/l)诱导,MDA试剂盒检测Phy-13和Phy-16作用后内皮细胞培养上清液中丙二醛(MDA)的水平,MTT法检测动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的增殖,细胞计数仪计数单核细胞和内皮细胞的黏附。结果Phy-13和Phy-16能减少内皮细胞MDA的生成,减少ox-LDL诱发的单核细胞和内皮细胞黏附,并能对抗ox-LDL诱导的动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖。结论Phy-13和Phy-16能够对抗ox-LDL诱导的动脉粥样硬化,这可能是余甘子治疗动脉粥样硬化相关疾病的重要机制之一。; 呙爱秀黄兴国唐湘云; 关键词：血管内皮细胞血管平滑肌细胞

性高危人群泌尿生殖道支原体感染状况调查: 2006年; 目的探讨泌尿生殖道支原体在性高危人群中的感染状况。方法采用培养法对468例按摩妇女、95例性乱者和212例性病伴侣进行解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)的检测。结果按摩妇女、性乱者和性病伴侣泌尿生殖道支原体感染率分别为64.7%、35。8%和39.1%,与健康人群(13.5%)比较差异有显著性(χ2=162.14、20.91、37.98,P<0.005)。按摩妇女支原体感染率与性乱者和性病伴侣比较,差异有显著性(χ2=27.55、38.93,P<0.005),性乱者和性病伴侣之间比较,差异无显著(χ2=0.31,P>0.05)。Uu感染率(21.0%)与Mh(4.1%)比较,前者明显高于后者(χ2=100.67,P<0.005)。女性支原体感染率(63.0%)明显高于男性(24.5%),差异有显著性(χ2=74.55,P<0.005。男性Uu感染率(9.0%)与女性(24.0%)比较,女性明显高于男性(χ2=16.79,P<0.005。Uu和Mh混合感染率(30.2%)明显高于Uu(21.0%)或Mh(4.1%)的单独感染(χ2=17.06、185.17,P<0.005)。结论Uu和Mh在按摩妇女、性乱者和性病伴侣中流行广、感染率高,在性病的防治和监测工作中应加以重视。; 唐湘云胡四海余敏君詹利生尹卫国唐双阳; 关键词：解脲脲原体人型支原体

淋病奈瑟菌表面蛋白A真核表达载体的构建及表达被引量：1: 2006年; 目的构建淋病奈瑟菌外膜蛋白———奈瑟菌表面蛋白A(neisseria surface protein A,NspA)的真核表达载体并使其在真核细胞中表达。方法用PCR方法扩增NspA基因,将扩增的产物连接于测序载体pUCm-T上,并构建重组体pcDNA3.1(+)/NspA。以脂质体法转染RAW264.7和COS-7细胞,用RT-PCR检测NspA mRNA的水平,免疫组化染色法检测蛋白表达。结果扩增的目的基因包括了全段NspA基因,长度约525bp。以脂质体转染RAW264.7和COS-7细胞后,用RT-PCR和免疫组化染色法检测表明,细胞可转录和表达NspA。结论成功构建了重组真核表达载体pcD-NA3.1(+)/NspA,并在真核细胞中得到表达,为研究此蛋白的免疫原性以及淋病基因疫苗的研制提供了物质基础。; 谢良伊胡四海唐湘云杨胜辉余敏君詹利生吕运成; 关键词：淋病奈瑟菌真核表达载体克隆

性病患者及性病高危人群解脲脲原体和人型支原体感染状况分析被引量：2: 2006年; 目的探讨泌尿生殖道支原体在STD患者及性病高危人群中的感染状况。方法采用培养法对421例STD患者、84例性乱者和185例性病伴侣进行解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)的检测。结果STD患者、性乱者和性病伴侣泌尿生殖道支原体感染率分别为42.28%、35.71%和40.0%,与健康人群(13.48%)比较,差异有显著性(χ2=56.61,19.44,38.16,P<0.005);前三者之间比较,差异无显著性(χ2=1.25,0.28,0.45,P>0.05)。Uu感染率(15.22%)与Mh(5.22%)比较,前者明显高于后者(χ2=37.61,P<0.005)。男性Uu和Mh感染率(分别为8.57%、2.08%)与女性(分别为23.61%、9.18%)比较,女性明显高于男性(χ2=29.82,17.36,P<0.005)。Uu和Mh混合感染率(20.43%)明显高于Uu(15.22%)或Mh(5.22%)的单独感染(χ2=6.41,71.45,P值分别为P<0.05,P<0.005)。结论Uu和Mh在STD患者、性乱者和性病伴侣中流行广、感染率高,在性病的防治和监测工作中应加以重视。; 唐湘云胡四海余敏君唐双阳詹利生尹卫国; 关键词：性病解脲脲原体人型支原体

pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体的构建及鉴定: 2006年; 目的构建pcDNA3.1(+)淋病奈瑟菌外膜蛋白—奈瑟菌表面蛋白A(Neisseria surface Protein A,NspA)基因真核表达载体,为研制淋病奈瑟菌核酸疫苗奠定基础。方法根据淋病奈瑟菌NspA基因序列,设计合成一对引物,用PCR方法从淋病奈瑟菌基因组DNA中扩增出NspA基因片段,将扩增的产物连接于测序载体pUCm-T上,并构建重组体pcDNA3.1(+)/NspA,进行酶切、PCR及测序鉴定。结果NspA基因体外扩增产物大小约为525 bp。所构建的pcDNA3.1(+)/NspA重组体经双酶切及PCR鉴定,与预期片断的大小相符;测序结果与GenBank中收录的NspA全长序列一致,表明pcDNA3.1(+)/NspA真核表达载体构建正确。结论成功地构建了淋病奈瑟菌真核重组表达载体pcD-NA3.1(+)/NspA,为NspA蛋白的功能研究和淋病奈瑟菌核酸疫苗的研制提供了物质基础。; 谢良伊胡四海唐湘云杨胜辉余敏君; 关键词：淋病奈瑟菌 PCDNA3.1(+)克隆疫苗

衡阳地区支原体临床分离株对抗生素耐药性监测被引量：3: 2006年; 目的比较四环素类、大环内酯类和喹诺酮类三类抗菌药物对解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)的抗菌作用,为临床用药提供参考依据。方法采用直接肉汤药盘法测定了临床标本中195株Uu和118株Mh对三类抗菌药物中的8种抗生素的敏感性。结果195株Uu对四环素、多西环素、米诺环素、罗红霉素、阿齐霉素、交沙霉素、氧氟沙星、司帕沙星的敏感率分别为21.0%、48.2%、39.5%、79.0%、88.7%、74.9%、28.2%和64.6%。118株Mh对四环素、多西环素、米诺环素、罗红霉素、阿齐霉素、交沙霉素、氧氟沙星、司帕沙星的敏感率分别为5.1%、33.9%、26.3%、0.0%、0.0%、89.8%、70.3%和64.4%。960例混合感染的Uu+Mh,对交沙霉素最敏感(79.2%)。结论泌尿生殖道支原体的耐药性监测对指导临床治疗具有重要意义。; 唐湘云呙爱秀胡四海谢良伊余敏君杨胜辉; 关键词：解脲脲原体人型支原体抗生素耐药性

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唐湘云

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