夏阳
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠髓源性树突状细胞的体外扩增及生物学特性的鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的以小鼠骨髓细胞为前体,建立一种高效、简便的体外扩增、分离培养树突状细胞(DC)的方法。方法实验分为GM/4组和GM/4-α组,以重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组鼠白介素-4(rmIL-4)对小鼠骨髓细胞联合诱导培养,GM/4-α组在第5天添加rmTNF-α继续培养48 h,GM/4组不加并于第5天时终止培养;分别收集第5天、第7天的悬浮及疏松贴壁细胞,扫描电镜观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞表面分子,同种异体混合淋巴细胞反应(MLR),检测2组细胞刺激同种异体T细胞增殖的能力。结果所收集的2组细胞均具有典型DC形态,细胞表面高表达小鼠髓源性DC相对特异性标志CD11c,表达率达75%以上;GM/4组DC细胞表面CD40、CD86、MHC-Ⅱ的表达率分别为30.5%、34.2%、45.1%,GM/4-α组则分别为78.7%、88.3%、96.7%;MIR中GM/4组DC刺激同种异体T细胞活化增殖的能力不如GM/4-α组强。结论此种方法能于体外定向诱导和扩增出大量髓源性DC,这为后续研究DC在器官移植后诱导机体免疫耐受的机制奠定了基础。
- 余昆苟欣周青松杨华安仲伟营夏阳
- 关键词：树突细胞免疫耐受小鼠
- 小鼠survivin基因重组真核表达载体的构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:应用质粒pEGFP-N1构建含小鼠survivin基因的重组真核载体。方法:采用Oligo核酸软件对Genbank上所发表的小鼠survivin mRNA序列进行分析,自行设计一对分别含有HindⅢ、BamHⅠ酶切位点的survivin基因上下游引物,利用PCR扩增出该基因的全序列cDNA,并将其定向克隆入pEGFP-N1的多克隆位点,构建pEGFP-N1/survivin重组真核表达载体。然后通过卡那霉素抗性筛选、双酶切及PCR鉴定,选取鉴定正确的克隆测序。结果:双酶切与测序结果表明目的基因序列克隆正确,成功构建了含有小鼠survivin基因的重组真核表达载体。结论:重组真核表达载体pEGFP-N1/survivin构建成功,为下一步研究sur-vivin在未成熟树突状细胞中诱导分化与致耐受作用奠定基础。
- 余昆苟欣杨华安周青松夏阳
- 关键词：SURVIVINPEGFP-N1未成熟树突状细胞
- 熊果酸诱导前列腺癌细胞株PC-3凋亡的实验研究被引量：8
- 2009年
- 目的:探讨熊果酸(Ursolic acid,UA)对人前列腺癌细胞株PC-3细胞周期、凋亡的影响及其作用机制。方法:人前列腺癌细胞株PC-3以不同浓度的UA作用不同的时间后,分别使用四甲基偶氮唑蓝比色法(4 methyl thiazolyl tetrazolium assay,MTT),免疫组织化学SP法,流式细胞术(Flow cytometry,FCM),Western blot等实验方法检测PC-3细胞的增殖抑制情况,细胞周期和凋亡率的变化,以及细胞内bcl-2、bax2个重要的细胞凋亡相关基因和细胞凋亡相关特殊蛋白cox-2、caspase3表达的变化。结果:UA对PC-3细胞有增殖抑制作用,其作用随着药物浓度和作用时间的增加而增强。24、48h和72h3个时间段UA分别作用于PC-3细胞后的IC50分别为50.87、37.91μmol/L和27.86μmol/L;熊果酸作用后PC-3细胞周期的主要特点是大量细胞累积于G1期,进入S期的细胞减少。UA能够诱导PC-3细胞凋亡,经过24、48h和72h3个时间段UA浓度50μmol/L作用后,细胞凋亡率为6.21%、7.81%和13.31%;细胞内bcl-2和cox-2的表达随着药物浓度增加逐渐减少;bax和caspase3蛋白的表达随着药物浓度增加逐渐增加。结论:UA能够抑制PC-3细胞的增殖,并使细胞大量累积于G1期,进入S期的细胞减少。可能通过使bcl-2和cox-2的表达减少、bax和caspase3蛋白的表达增加来诱导细胞凋亡。
- 夏阳苟欣
- 关键词：熊果酸前列腺癌PC-3细胞凋亡
