张书环
- 作品数：14 被引量：60H指数：5
- 供职机构：华中农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项武汉市科技攻关计划项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 牛结核病胶体金免疫层析方法的建立与初步运用
- 本研究对四种牛分枝杆菌抗原蛋白(MPB70、MPB83、CFP-10和ESAT-6)进行了融合表达，旨在为牛结核病临床诊断提供一种敏感、特异的诊断抗原。利用牛分枝杆菌的两个同源蛋白质MPB70和MPB83，建立了一种双抗...
- 张书环
- 关键词：牛结核病特异性抗原胶体金免疫层析
- 文献传递
- 牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和应用被引量：28
- 2007年
- 为了建立一种快速检测牛分支杆菌抗体的新方法用于诊断牛结核病,利用胶体金免疫层析技术原理,用原核诱导表达的牛分支杆菌抗原蛋白MPB83和MPB70分别作为胶体金标记抗原和检测线上的捕获抗原,制备牛结核抗体检测试纸条。结果表明,粒径为40 nm的胶体金制备的试纸条敏感性最高,胶体金最佳标记pH为6.0,MPB83抗原最适标记量为每毫升胶体金6.5μg,MPB70抗原的最适包被浓度为3.0 mg/mL,抗MPB83蛋白IgG的最佳包被浓度为2.5 mg/mL,交叉试验证明试纸条不与牛的其他非相关疾病的阳性血清反应,具有较高的特异性。比较试验证明其敏感性显著高于韩国进口试纸条。在上述试验条件下生产了一批胶体金试纸条进行临床样品检测,并与细菌分离培养、结核菌素皮内变态反应(TST)和韩国试纸条比较。本试纸条与牛分支杆菌分离培养的符合率为85%,与TST的符合率为79.73%,与韩国试纸条的符合率为98.75%。快速检测牛结核抗体的免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,适用于对牛结核病进行普查和检疫,也可作为TST的辅助诊断方法,在牛结核病根除计划中具有良好的应用前景。
- 张书环杨俊兴晁彦杰颜邦芬吴波曹莎陈颖钰谭亚娣陈焕春郭爱珍
- 关键词：免疫层析牛分支杆菌牛结核抗体检测
- 牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和初步运用
- 目的：建立一种快速检测牛结核抗体的新方法,用以诊断牛结核病。
方法：利用胶体金免疫层析技术原理,用大肠杆菌表达的牛分枝杆菌重组抗原MPB83和MPB70分别作为胶体金标记抗原和检测线上的捕获抗原,制备牛结核抗体...
- 张书环郭爱珍杨俊兴晁彦杰颜邦芬吴波曹莎陈颖钰谭亚娣陈焕春
- 关键词：牛结核病抗体检测免疫层析
- 文献传递
- 牛结核病抗体胶体金快速检测技术的建立和初步运用被引量：2
- 2007年
- 目的:建立一种快速检测牛结核抗体的新方法,用以诊断牛结核病。方法:利用胶体金免疫层析技术原理,用大肠杆菌表达的牛分枝杆菌重组抗原MPB83和MPB70分别作为胶体金标记抗原和检测线上的捕获抗原,制备牛结核抗体检测试纸条。结果:粒径为40nm的胶体金制备的试纸条敏感性最高;胶体金最佳标记pH值为6.0;MPB83抗原最适标记量为每毫升胶体金6.5μg;MPB70抗原的最适包被浓度为3.0mg/mL;抗MPB83蛋白IgG的最佳包被浓度为2.5mg/mL;交叉试验证明试纸条不与牛的其他非相关疾病的阳性血清反应,具有较高的特异性。比较实验证明其敏感性显著高于韩国进口试纸条。在上述试验条件下生产了一批胶体金试纸条进行临床样品检测,并与细菌分离培养、结核菌素皮内变态反应(TST)和韩国试纸条比较。本试纸条与牛分枝杆茵分离培养的符合率为85%,与TST的符合率为79.73%,与韩国试纸条的符合率为98.75%。结论:快速检测牛结核抗体的胶体金免疫层析试纸条具有敏感、特异、简便、快速的特点,适用于对牛结核病进行普查和检疫,也可作为TST的辅助诊断方法,在牛结核根除计划中具有良好的应用前景。
- 张书环杨俊兴晁彦杰颜邦芬吴波曹莎陈颖钰谭亚娣陈焕春郭爱珍
- 关键词：免疫层析牛分枝杆菌结核抗体检测
- 一种适用于牛结核抗体检测的试剂盒及应用
- 本发明属于动物免疫学技术领域。公开了一种适用于牛结核检测试剂盒及其制备方法，所述的试剂盒，包含盒体、设在盒体内的V形底96孔反应板、牛结核分支杆菌野毒感染标准阳性血清、健康牛阴性血清、血清稀释液和1％致敏绵羊红细胞悬液。...
- 谭亚娣胡巧云晁彦杰钦博张桂容陈焕春张书环
- 文献传递
- 四种牛分枝杆菌特异性蛋白融合表达及在牛结核病诊断中的临床应用被引量：8
- 2007年
- 以原核表达的MPB70-MPB83-CFP10-ESAT-6融合蛋白作为诊断抗原,建立牛结核病抗体检测间接ELISA(iELISA)。该iELISA与导致常见牛病的非相关抗原无交叉反应。用iELISA检测90份健康牛血清,确定样本阴阳性临界值(S/P)为0.17。与商品化胶体金试剂条(ICG)平行检测150份临床奶牛血清样本,结果与ICG的符合率为93.33%(140/150)。以结核菌素皮内试验(TST)为参考方法,检测了华中地区四个奶牛场的560头中国荷斯坦奶牛和90份进口奶牛结核阴性血清,结果iELISA与TST的总符合率为87.32%(489/560)。对其中22头奶牛进行鼻拭子分菌检验,4头分菌阳性奶牛的血清抗体检测也为阳性,iELISA与细菌培养的总符合率为77.27%(17/22)。以TST为参考方法,iELISA的敏感性和特异性分别为72.37%和89.67%。
- 吴波张书环邓铨涛项杰陈军刘朝陈鑫宋念华陶淑珍黄继根韩永佩赵波林祥梅陈焕春郭爱珍
- 关键词：IELISA牛结核病MPB70CFP10ESAT-6
- 检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及制备方法
- 本发明属于动物细菌学与动物传染病学技术领域。具体涉及一种检测牛结核抗体的免疫胶体金试纸条及其制备方法。本发明的试纸条是由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和PVC背衬组装而成。在PVC背衬上按顺序依次粘附有样品垫、结合...
- 郭爱珍张书环陈焕春谭亚娣晁彦杰陈颖钰钦博吕文匡有吉
- 文献传递
- 牛传染性鼻气管炎病毒gG蛋白的表达及gG-ELISA的建立被引量：15
- 2007年
- 以牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV）基因组DNA为模板,PCR扩增gG基因,克隆到T载体pMD18-T,经限制性酶切分析及序列测定鉴定正确后,进一步亚克隆至原核表达载体pGEX-KG。SDS-PAGE和Western blot分析表明,该基因在大肠杆菌BL21（DE3）中呈可溶性及包涵体两种形式表达,重组蛋白质具有免疫学活性。包涵体蛋白经提纯、变性、复性后,作为包被抗原建立了gG-ELISA诊断方法。应用该方法与进口试剂盒（IDEXX）平行检测380份血清样品,两种方法的符合率为92%（351/380）。对6份病毒分离阳性血清的检测均为阳性,对非相关病原的阳性血清及中监所的阴性血清检测均为阴性,表明所建立的IBRVgG抗体的ELISA检测具有良好的灵敏度与特异性。对1248份奶牛血清样本进行了检测,进口牛群的IBRV抗体阳性率平均为21.7%,湖北本地中国黑白花奶牛的抗体阳性率在不同牧场之间变化很大,范围为0.0%-41.5%。
- 颜邦芬陈锃张书环林祥梅陈颖钰晁彦杰李德学宋念华陈焕春郭爱珍
- 关键词：牛传染性鼻气管炎病毒ELISA原核表达
- 人和动物结核病新型特异诊断试剂
- 陈焕春詹枝华项杰曾庆志周金海张书环涂玲玲刘颖郭爱珍凌洁玉邓铨涛晁彦杰匡有吉廖娟红吴波于清龙刘冬光陈颖钰熊家军陈军胡长敏杨利国
- 该研究成功研制了适于牛结核与梅花鹿结核的牛结核快速检测胶体金试纸条，适合于牛和梅花鹿的高通量检测ELISA试剂盒，和人、牛、梅花鹿结核高准确度检测IFN-γ试剂盒。通过临床评价证实其具有较高的灵敏度与特异性，且分别适合于...
- 关键词：
- 关键词：结核病
- 人和动物结核病新型特异诊断试剂研究
- 郭爱珍陈焕春詹枝华项杰杨利国胡长敏陈军曾庆志熊家军周金海陈颖钰张书环刘冬光涂玲玲于清龙刘颖吴波廖娟红匡有吉晁彦杰邓铨涛凌洁玉
- 结核病是主要由结核分枝杆菌与牛分枝杆菌引起的、人兽共患传染病。传统结核检测方法检出率低，生物安全风险大，或受环境分枝杆菌干扰，费时费力，不适合于野生动物。为此，向武汉市科技局申请项目并获得资助（20066002056）。...
- 关键词：
- 关键词：结核病
