张艳红
- 作品数：65 被引量：99H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金安徽省优秀青年科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 乙肝病毒感染导致Mrell下调及基因组断裂被引量：3
- 2008年
- 【目的】乙肝病毒的持续感染与肝细胞癌的发生密切相关。本文探讨了乙肝病毒感染后导致宿主蛋白Mre11的变化,并研究这种蛋白的变化可能导致肝癌发生的机制。【方法】本文通过Western blot检测了乙肝病毒感染HL7702细胞及肝癌组织标本的Mre11蛋白的变化,并且通过RNA干涉的方法干扰了Mre11的表达,用连接介导PCR检测基因组的变化。【结果】本研究发现乙肝病毒感染细胞导致Mre11表达下调,肝癌组织也可以发现Mre11表达下调;下调Mre11表达可以导致细胞基因组的断裂增多。【结论】HBV感染导致Mre11表达下调导致基因组不稳定,这可能与HBV感染导致细胞恶性转化相关。
- 刘煜杨小丽侯宁波赵帆张艳红袁静何湘钟辉
- 关键词：乙肝病毒肝细胞癌DNA损伤修复
- 一种适于蛋白质测序仪分析的蛋白质样品预处理方法
- 1994年
- 氨基酸序列自动分析仪大大提高了氨基酸序列分析的速度,但碰到的问题是供分析用的蛋白质样品的纯度不易掌握,常常半途中断分析过程。以ABI 470A/900A机为例,每设置10～15个氨基酸的分析,在许多情况下只分析到一半或多一些即被中断。该机为ODS-C18反相柱型,经化学处理的逐个氨基酸按各自在该柱的保留时间被仪器区分开并记录下来。我们选用此机型来分析工程菌产霍乱毒素B亚单位(rBS)。由于我们的rBS是新型口服霍乱疫苗的成分之一。
- 张艳红刘传暄马清钧
- 关键词：口服霍乱疫苗霍乱毒素亚单位自动分析仪
- 丙肝抗原决定簇与CTB的融合、表达及融合蛋白的纯化
- 1994年
- 通过固相化学合成法合成了编码丙型肝炎病毒(HCV)结构区和非结构区的4个抗原决定簇基因,这些抗原决定簇基因片段以不同方式串联后与ctxB基因融合,构建了12种表达不同嵌合蛋白的重组质粒,各重组质粒转化大肠杆菌后均能高效分泌性表达融合蛋白,表达产量在10～50μg/ml之间,随所融合的抗原决定簇不同而不同,表达水平主要与抗原决定簇的氨基酸组成有关,而与抗原决定簇的大小及串联次数关系不大。融合蛋白通过亲和层析纯化,达到了电泳纯,为进一步研究融合蛋白的抗原性及用作抗-HCV ELISA诊断试剂抗原打下了基础。
- 曹诚马清钧于公义石成华李平李杰之张艳红张京生
- 关键词：基因融合抗-HCVELISA丙型肝炎病毒
- rBS-WC霍乱疫苗的动物免疫方案及免疫持久性被引量：2
- 1994年
- 用小鼠、家兔观察了rBS-WS疫苗免疫的部分方案的效果。rBS与WC单独使用的免疫效果不如组合使用的效果好;小鼠或家兔的免疫间隔作适当缩短对免疫保护影响不大;小鼠一次大剂量口服疫苗后亦可获得良好保护。家兔肌肉注射免疫条件下rBS-WC与吸附霍乱类毒素菌苗(上海苗)及吸附霍乱菌苗(武汉苗)进行比较,武汉苗无抗CT反应,对CT攻击无保护,对Eltor(小川)攻击保护效果较差,上海苗则抗CT反应较低。家兔口服rBS-WC半年后,抗CT及杀弧菌抗体维持较高水平,显示其动物免疫的持久性。
- 刘传暄马清钧张艳红王秀萍于秀琴
- 关键词：霍乱疫苗动物免疫免疫持久性
- 人MAVS小干扰RNA质粒的构建及稳定干扰MAVS细胞株的筛选被引量：1
- 2008年
- 目的:构建人线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)的小干扰RNA真核表达质粒,并筛选出稳定干扰MAVS的细胞株。方法:根据文献报道的序列和载体的黏性末端,设计合成2条针对MAVS的DNA序列,退火后连接到载体pSUPER.retro.neo^+gfp上,经测序分析正确后,质粒命名为psiMAVS。用脂质体转染质粒到MCF-7细胞中,经G418加压筛选稳定表达MAVS小干扰RNA的细胞株,用免疫印迹检测细胞中MAVS的表达情况,将干扰效果好的细胞株命名为MCF-7/siMAVS,再用荧光素酶试验检测MCF-7/siMAVS细胞对外源MAVS或poly(dA-dT)诱导干扰素-β(IFN-β)转录的情况。结果:免疫印迹结果证实建立的稳定细胞株MCF- 7/siMAVS能够有效干扰MAVS的表达,并在外源MAVS或poly(dA-dT)存在的情况下,抑制IFN-β的转录活性。结论:构建了表达MAVS小干扰RNA的质粒psiMAVS。筛选出稳定干扰MAVS表达的细胞株MCF-7/siMAVS,为深入研究MAVS在先天免疫中的作用提供了平台。
- 贾永侠赵帆马红芳李力黄蓓郑子瑞宋婷魏从文何湘张艳红钟辉
- 关键词：MAVS转录活性
- 线粒体抗病毒信号蛋白MAVS真核表达质粒的构建及表达
- 2008年
- 目的:构建线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)真核表达质粒。方法:从人胚肾细胞系HEK293T细胞的总RNA中经过逆转录和PCR获得MAVS的全长cDNA双链片段,经过酶切后连接到真核表达载体pcDNA3/flag中,挑选出转化生成的阳性克隆进行测序,将序列正确的重组质粒命名为pcDNA3/flag-MAVS。借助脂质体转染pcDNA3/flag-MAVS质粒到HEK293T细胞中,用Western印迹检测目的蛋白的表达。同时用β干扰素的荧光素酶报告基因(IFN-β-luc)检测MAVS蛋白活性。结果:Western印迹实验证明pcDNA3/flnag-MAVS可以在HEK293T细胞中表达MAVS,并且能使IFN-β报告基因活性明显增强。结论:构建了重组质粒pcDNA3/flag-MAVS,在细胞中表达MAVS后具有刺激IFN-β转录的生物活性。
- 倪才飞赵帆郑子瑞黄蓓马红芳李力宋婷魏从文何湘张艳红钟辉
- 关键词：MAVSIFN-Β荧光素酶报告基因
- 以恒河猴为模型的恶性疟原虫DNA疫苗的免疫保护作用研究被引量：2
- 2000年
- 研究了以霍乱毒素B亚基为载体的重组疟疾多价抗原的DNA疫苗在恒河猴中的免疫原性及对相应疟原虫感染的免疫保护作用。结果表明 :DNA疫苗免疫恒河猴后 ,用 1 2 5× 10 8个食蟹疟子孢子攻击 ,对照组 5只动物在攻击后 14天左右全部感染 ,感染持续 34天以上 ;DAN疫苗组的 5只动物一直到攻击后 6 0天 ,没有感染。另外 ,还检测了免疫后不同时间各组的免疫应答水平 ,与对照组相比 ,DNA疫苗组免疫 2次后即产生了较高水平的细胞免疫和体液免疫。从实验结果来看 ,选择的这种鸡尾酒式的抗原表位组合具有很好的免疫原性 。
- 钟辉曹诚李平张艳红时运林马清钧
- 关键词：DNA疫苗恒河猴免疫
- 新型基因工程霍乱疫苗
- 马清钧刘传暄于秀琴张艳红方宏清周建光熊凌霜石成华曹诚
- 该项目采用基因工程技术构建了高效分泌表达毒素B亚单位(rBS)的工程大肠杆菌，表达产物的结构、理化活性、免疫原性与天然的BS完全相同。由此与杀灭的霍乱弧菌抗原的O抗原及其他菌体抗原组构成新型基因工程霍乱(rBS-WC)疫...
- 关键词：
- 关键词：基因工程霍乱疫苗大肠杆菌
- rBS-WC霍乱疫苗的动物免疫研究被引量：3
- 1995年
- rBS与WC联合免疫比单纯免疫效果好；小鼠或家兔的免疫间隔适当缩短未见影响免疫保护力；小鼠一次大剂量口服疫苗后可获良好保护。rBS－WC抗原、吸附霍乱类毒素疫苗（上海苗）和吸附霍乱疫苗（武汉苗）经家兔肌肉免疫，武汉苗未见抗CT反应，对CT攻击无保护，对Eltor（小川）活菌攻击保护较弱，上海苗抗CT反应比rBS－WC低。家兔口服rBS－WC半年后，抗CT及杀弧菌抗体维持较高水平，显示其动物免疫的持久性。
- 刘传暄马清钧张艳红王秀萍于秀琴
- 关键词：霍乱疫苗免疫
- 转基因烟草生产霍乱毒素B亚单位的纯化被引量：2
- 2000年
- 提取转基因烟草叶片总蛋白 ,用经溴化氰活化的Sepharose 4B偶联有抗CTIgG色谱柱 ,得到了表达产物CTB蛋白质。经PAGE、Westernblot。
- 王新国张艳红刘传暄肖成祖张国华方荣祥
- 关键词：霍乱毒素B亚单位纯化转基因烟草
