马清钧
- 作品数：388 被引量：999H指数：19
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 胚胎发育早期转基因的PCR检测研究被引量：1
- 1997年
- 转基因在受精卵中的整合时间对于转基因动物的建立十分重要。采用ＷＡＰ基因调控序列指导的人Ｇ－ＣＳＦ基因为构件，对小鼠受精卵进行显微注射。对培养至１细胞期、２细胞期和８细胞期的胚胎进行ＰＣＲ检测。结果表明，三个时期转基因的检出率分别为１００％、７７．７７％和４４．４４％。说明随着培养时间的增加，转基因逐渐丢失。
- 卢一凡邓继先肖成祖马清钧王冬平
- 关键词：转基因PCR检测受精卵F基因
- B淋巴细胞激活因子研究进展被引量：1
- 2003年
- B淋巴细胞刺激因子(BAFF)在B细胞免疫中具有促进B细胞的分化、成熟,调节体液中的抗体反应等重要的作用。然而过多的BAFF表达可使B细胞存活时间延长,B细胞数目增多,活性过高而导致自身免疫性疾病。BAFF与细胞表面的三种受体结合,执行着并不完全相同的功能。由于BAFF在B细胞发育、分化及自体免疫性疾病(特别是系统性红斑狼疮)中具有重要的作用,BAFF及其下游的信号转导因子成为疾病治疗的理想靶位。
- 冯玉梅冯怡马清钧
- 关键词：B淋巴细胞刺激因子肿瘤坏死因子
- 糖多孢红霉菌λC3-SRR突变体的构建及其产物鉴定被引量：8
- 2004年
- 目的 :构建糖多孢红霉菌KR6酶域基因失活突变体 ,探讨SRR氨基酸相应 9核苷酸去除突变体与合成酮内酯类化合物 3 脱氧 3 羰基 红霉内酯B的关系。方法 :以糖多孢红霉菌基因组DNA为模板 ,用重叠PCR技术扩增出缺少SRR氨基酸相应 9核苷酸的KR6酶域DNA片段 ,并克隆到载体pWHM3上 ,构建了同源重组质粒pWHM3 SRR。将pWHM3 SRR质粒转化糖多孢红霉菌λC3菌株 ,筛选出质粒整合到染色体上红霉素合成基因位点的整合体λC3 A、B和C。λC3 A在无硫链丝菌肽 (Thio)的R3M斜面上生长两代后 ,制备的原生质体涂R3M平皿 ,挑选出不能在含Thio的R3M斜面上生长、发酵液也无抑制枯草芽孢杆菌活性的突变菌株λC3 SRR。结果 :部分基因组DNA序列分析表明 ,糖多孢红霉菌λC3 SRR染色体上SRR氨基酸相应 9核苷酸已经敲除 ,ZabspecFab质谱分析证实λC3 SRR菌株合成了 3 脱氧 3 羰基 红霉内酯B。结论 :糖多孢红霉菌KR6酶域SRR氨基酸相应 9核苷酸敲除的λC3 SRR突变菌株可以合成 3 脱氧 3 羰基 红霉内酯B ,SRR为KR6酶域上NADPH 2′ 磷酸结合位点。
- 李凌凌张部昌张华任洌刘传暄马清钧
- 关键词：糖多孢红霉菌聚酮合成酶同源重组
- 一种具有甘露糖化修饰的溶菌酶及其应用
- 本发明涉及一种具有甘露糖化修饰溶菌酶及其应用，所述溶菌酶经过N-糖基化修饰，具体这种糖化为甘露糖化修饰，修饰位点为N-X-S/T，其中X为除脯氨酸外的氨基酸。本发明还提供了所述甘露糖化修饰溶菌酶的制备方法，其是通过人工添...
- 吴军刘波巩新唱韶红左小虎马清钧
- 文献传递
- SCT-OGP的融合表达与活性的初步研究被引量：2
- 2006年
- 根据天然鲑鱼降钙素(Salmoncalcitonin,SCT)和骨生长肽(OsteogenicGrowthPeptide,OGP)的序列,人工合成了6个DNA片段,进行退火、连接和转化后,获得含有SCT与OGP融合基因的pPIC9-SCT-OGP表达载体,经测序后将此重组质粒电击转化毕赤酵母GS115,通过培养、筛选以及SDS-PAGE鉴定,在毕赤酵母中获得了SCT-OGP融合蛋白的可溶性表达,经分子筛纯化后在5kD左右可见单一条带。将此条带进行了N端氨基酸组分分析,证实此目的蛋白为SCT-OGP融合蛋白。MTT法显示SCT-OGP融合蛋白在体外可以促进成骨细胞和成纤维细胞增殖,以小鼠为模型的试验显示SCT-OGP融合蛋白在体内可以提高碱性磷酸酶活性和降低血钙,表明该融合蛋白具有抑制破骨细胞的活性和刺激成骨细胞增殖的活性,从而提示该融合蛋白具有治疗骨质疏松症的药用潜力。
- 刘煜杨小莉何湘彭英方李平张艳红马清钧钟辉
- 关键词：鲑鱼降钙素骨质疏松症
- HeLa细胞中编码人组织型纤溶酶原激活物K2P结构域突变体cDNA的克隆及特性
- 1999年
- 组织型纤溶酶原激活物(t-PA)在人体纤溶系统中发挥着重要作用。基因重组t-PA已被用于急性心肌梗死等血栓性疾病的溶栓治疗。另外,t-PA还与肿瘤浸润和转移等多种过程有关,因此对t-PA进行功能结构研究具有重要应用价值和理论意义。本实验用RT-PCR方法从豆蔻酰佛波醇乙酯(phorbol myristate acetate,PMA)处理的HeLa细胞扩增并克隆获得了人t-PA K2P结构域的编码cDNA。序列分析显示该序列含有两个碱基突变,分别导致了成熟蛋白分子两个氨基酸践基序列的改变。第263位密码子突变(ACC→GCC)导致Thr^(263)→Ala^(263),另一突变(CTG→CCG)导致Leu^(485)→Pro^(485)。两个突变分别位于K2和P结构域的连接区和P区。将此含有突变的K2Pt-PA cDNA重组到原核表达载体,在大肠杆菌中获得了表达。纤维蛋白平板法检测显示重组K2Pt-PA复性后具有纤溶活性。以上结果表明HeLa S3细胞表达一种具有纤溶活性的t-PA突变体。
- 崔立斌马清钧孙光周平坤孙玉龙石成华
- 关键词：组织型纤溶酶原激活物HELA细胞基因克隆
- 链霉菌自动调控因子的研究进展被引量：3
- 2007年
- γ-丁酸内酯自动调控因子是一种由链霉菌产生的被称为微生物"激素"的小分子化合物,它控制着链霉菌次级代谢物的产生或形态分化。根据该类自动调控因子C-2位细微的结构差别分为三种类型,分别为A因子型、VB型和IM-2型。本文详细介绍了每种类型中具有代表性的自动调控因子、受体及其对链霉菌次级代谢与形态分化的调控作用,并系统地阐述了其调控网络。
- 吴杭张部昌马清钧
- 关键词：链霉菌受体调控网络
- CTB与HCV抗原决定簇融合蛋白的抗原性及其在抗HCV ELISA试剂盒中的应用
- 1994年
- 系统研究了通过霍乱毒素B亚基与HCV的4个抗原决定簇进行基因融合所表达的12种融合蛋白中HCV抗原决定簇的反应原性,探索了以融合蛋白为抗原,进行抗-HCV检测的途径。结果表明,多数融合蛋白中HCV抗原决定簇均能与对应的HCV抗体结合。以融合蛋白95082为抗原研制的抗-HCV ELISA试剂检测122名献血员血清,结果与美国雅培公司抗-HCV ELISA试剂检测的结果完全一致,经药品生物制品检定所检定,其特异性、灵敏度、精密性及稳定性均达到国家卫生部抗-HCV ELISA试剂的暂行检定标准。
- 曹诚马清钧于公义石成华李平李杰之佟义贞张艳红张京生
- 关键词：基因融合丙型肝炎病毒
- 糖多孢红霉菌表达载体pZMW的构建被引量：14
- 2003年
- 目的 :构建能够在糖多孢红霉菌中稳定存在的表达性载体。方法 :用PCR方法从糖多孢红霉菌染色体上扩增红霉素抗性基因启动子PermE作为表达载体的启动子 ,并利用pSET1 5 2质粒上链霉菌染色体整合位点 (attP)和安普霉素抗性基因 ,构建了染色体整合型糖多孢红霉菌表达载体pZMW。结果 :pZMW表达载体能够整合到链霉菌和糖多孢红霉菌染色体上 ,并能够在链霉菌和糖多孢红霉菌体内表达硫链丝菌素抗性基因tsr。结论
- 张部昌李凌凌于秀琴刘传暄王以光贺秉坤马清钧
- 关键词：糖多孢红霉菌红霉素基因表达
- 阿尔茨海默病核酸疫苗的构建及诱导体液免疫反应的初步研究被引量：4
- 2003年
- 近年,内源性蛋白主动免疫预防和治疗阿尔茨海默病(AD)的策略成为AD研究领域的热点,并获得迅猛发展。构建了以β-片层结构的淀粉样蛋白(Aβ)及其可溶性与病理性突变体为抗原基因的DNA疫苗用于免疫小鼠,经过对免疫方案的探索和调整,结果能够打破其自身耐受,在外周血中诱发出较高滴度的抗-Aβ抗体。初步探讨了诱导体液免疫学效应的规律。并在原代培养的海马神经元Aβ毒性模型中验证了免疫后血清的生物学活性。
- 张助赵志虎朱玲玲赵彤范明马清钧
- 关键词：阿尔茨海默病淀粉样蛋白核酸疫苗体液免疫反应主动免疫
