方利君
- 作品数：32 被引量：350H指数：10
- 供职机构：中国医科大学附属盛京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 骨髓间充质干细胞转化为皮肤组织的实验研究
- 该实验拟用猪骨髓间质干细胞体外分离培养,标记后回植到猪皮肤内以及在体外不同培养基的诱导下,进行分化诱导,观察在皮肤微环境中能否分化为皮肤的血管内皮细胞和表皮细胞,从而为皮肤组织的修复重建提供新思路.结论 1、体外培养猪的...
- 方利君
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化表皮细胞血管内皮细胞
- 骨髓间充质干细胞参与皮脂腺导管构成的初步研究
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）分化为皮肤附属器的可行性。方法:抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离、体外纯化间充质干细胞及培养扩增后,应用5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）标记技术进行细胞标记。将已标记的细胞（1×1...
- 方利君付小兵王玉新孙同柱李建福程飚
- 文献传递
- 体外诱导骨髓间充质干细胞分化为上皮细胞的初步实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的:探讨表皮生长因子(EGF)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为上皮细胞的可行性。方法:抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离纯化 MSCs,培养扩增后,用含 EGF 不同介质诱导,观察细胞形态的变化,免疫组织化学染色和流式细胞仪鉴定角蛋白的表达。结果:免疫组织化学染色显示 EGF 诱导后3dMSCs 角蛋白表达较弱,7d 角蛋白表达增强。流式细胞仪检测发现 EGF 诱导后3d 表达角蛋白的 MSCs 较少,7d表达角蛋白的细胞数量明显增加。结论:MSCs 在体外 EGF 诱导下可能分化为上皮细胞。
- 方利君付小兵孙同柱程飚王玉新
- 关键词：干细胞上皮细胞表皮生长因子细胞分化
- 骨髓间充质干细胞参与皮脂腺导管构成的初步研究被引量：1
- 2003年
- 目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为皮肤附属器的可行性。方法:抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离、体外纯化间充质干细胞及培养扩增后,应用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记技术进行细胞标记。将已标记的细胞(1×10~6)以注射方式回植到提供骨髓的猪的皮内及皮下,分别于注射后1、2、4周取材,常规石蜡包埋、切片,行 HE 染色及 BrdU 和角蛋白免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜观察。结果:部分 BrdU 阳性标记细胞出现在皮脂腺周围的导管中参与皮脂腺导管的形成,这些细胞经双染证实也同时表达角蛋白。提示这部分双染的导管细胞来自于植入的 MSCs。结论:在皮肤微环境下骨髓间充质干细胞可能分化为皮脂腺导管细胞。
- 方利君付小兵程飚孙同柱李建福曹荣王玉新
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化
- Leptin受体在人胚胎皮肤附件发育过程中的表达特征
- 2006年
- 目的:探讨Leptin受体在人胚胎皮肤形成和附件发育过程中的表达特点及可能的生物学意义。方法:取8-38周龄人胚胎的背部全层皮肤,制成石蜡切片．进行常规组织学观察和免疫组织化学染色(SP法),动态观察皮肤形成过程和附件发育过程中Leptin受体的表达特点。结果:胚胎8周开始,胎儿周皮已有Leptin受体表达,随后逐渐增强。至胚胎11-16周表达最强,尤其在附件原基中呈局灶性表达;胚胎22周后,Leptin受体的表达逐渐减弱,至胚胎31周后仅在皮脂腺中表达。结论:Leptin可能通过其受体参与皮肤附件的发育过程。
- 程飚方利君付小兵孙同柱
- 关键词：人胚胎皮肤附件发育过程胚胎皮肤皮脂腺
- 不同取材方法自体脂肪移植对皮肤损伤愈合影响的初步研究被引量：2
- 2009年
- 目的探讨不同取材方法的自体脂肪移植对猪皮肤损伤后愈合的影响，为临床皮肤损伤修复提供参考。方法3只小型香猪背部中线两侧各制备4个面积为2．5cm×2．5cm的全层皮肤缺损创面，将创面随机分为2组（每组各12个创面）：抽取法脂肪治疗组和剪切法脂肪治疗组。分别于伤后3、7、14d采用大体观察和组织学检查动态观察创面愈合情况。结果于伤后3、7d，剪切法脂肪治疗组肉芽组织形成丰富，血管密度大，创腔容积小于抽取法脂肪治疗组（P〈0．05）；伤后7、14d，创面逐渐缩小，剪切法脂肪治疗组创面面积明显小于抽取法脂肪治疗组（P〈0．05），并且再上皮化的新生表皮增殖较早。结论自体脂肪移植到局部皮肤创面后能明显促进创面的愈合速度，尤以剪切法取材最佳。
- 方利君管新明王秋旭
- 关键词：自体脂肪移植创面愈合
- 在体诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮细胞的初步观察被引量：91
- 2003年
- 目的 探讨骨髓间充质干细胞 (MSCs)分化为表皮细胞的可行性。 方法 抽取小型香猪的骨髓 ,经密度梯度离心分离、纯化间充质干细胞及培养扩增后 ,应用 5 -溴脱氧尿嘧啶 ( 5-BrdU)标记技术进行细胞标记。将已标记的细胞以注射方式回植到提供骨髓的香猪的皮内及皮下 ,分别于注射后 1,2周取材 ,常规石蜡包埋、连续切片 ,行 5 -BrdU和角蛋白免疫组织化学染色 ,对比研究。 结果 大多数 5 -BrdU阳性细胞聚集在真皮中的小血管周围。但有少数 5 -BrdU阳性标记细胞出现在表皮的棘层和颗粒层 ,并同时表达角蛋白。 结论 在皮肤微环境下骨髓间充质干细胞具有分化为表皮细胞的潜能。
- 方利君付小兵孙同柱李建福程飚杨银辉王玉新王通
- 关键词：骨髓间充质干细胞分化表皮细胞细胞分化皮肤创伤角蛋白
- MMP-2在猪骨髓间充质干细胞分化为血管内皮细胞过程中的表达
- 2010年
- 目的:探讨基质金属蛋白酶2(MMP-2)在体外诱导猪骨髓间充质干细胞(猪MSCs)分化为血管内皮细胞过程中的表达特征。方法:抽取小型香猪的骨髓,经密度梯度离心分离纯化猪MSCs,体外培养扩增后,用含血管内皮生长因子(VEGF)等的介质诱导,观察细胞形态的变化,免疫组织化学染色和流式细胞仪鉴定血管内皮细胞第八因子(FⅧ)的表达,不同时间点Western印迹检测MMP-2蛋白的表达。结果:免疫组织化学染色显示,VEGF诱导3d后,猪MSCs表达较弱,7d后表达增强。流式细胞仪检测发现,VEGF诱导3d后表达的猪MSCs较少(3%),7d后表达的细胞数量明显增加(13%)。诱导组MMP-2表达上调,1h达到高峰。结论:猪MSCs在体外经VEGF等因子诱导后,可迁移聚集并分化为血管内皮细胞,MMP-2参与这一过程。
- 方利君郭澍王秋旭
- 关键词：干细胞血管内皮细胞MMP-2细胞迁移
- 犬颌下腺缺血再灌注损伤及异搏定拮抗作用的实验研究
- 方利君
- 关键词：颌下腺缺血再灌注钙超载异搏定氧自由基
- 地塞米松对骨髓间充质干细胞凋亡影响的体外实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨地塞米松对猪骨髓间充质干细胞（MSCs）凋亡的影响。方法体外分离猪MSCs，培养扩增后，培养基中分别加入浓度为0,1×10^-8，1×10^-7，1×10^-6mol／L地塞米松，培养24h后，Hoechst 33258染色，AnnexinV—FITC／PI双染流式细胞术分析不同浓度地塞米松对MSCs凋亡的影响。结果Hoechst 33258染色可见：1×10^-6mol／L地塞米松诱导后MSCs部分细胞核与细胞质中可见浓染致密的颗粒荧光。流式细胞术检测显示各实验组细胞凋亡率较对照组高，尤其以浓度为1×10^-6mol／L最显著。结论地塞米松可引起MSCs凋亡，有浓度依赖性，1×10^-6mol／L引起MSCs凋亡最为显著。
- 方利君刘芳郭澍沈磊
- 关键词：骨髓间充质干细胞凋亡地塞米松
