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重组细胞色素酶P450 3A4表达和鉴定被引量：1: 2012年; 细胞色素酶P450是代谢内源性物质和外源性物质的重要的酶,在药物治疗和药物开发领域以及了解潜在的毒性物质和致癌性物质的代谢机制起决定性作用。旨在构建细胞色素酶P450 3A4的表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化得到CYP3A4蛋白。用逆转录-聚合酶链反应方法从人肝脏总RNA中得到CYP3A4的cDNA,然后直接插入pMD20-T Vector中,将测序正确的N-末端和C-末端进行修饰。然后利用双酶切插入到表达载体pET-28a-c(+)Vectors,转化到大肠杆菌BL21(DE3)中表达。并通过定点突变的方法获得CYP3A4亚型P467S(CYP3A4*19)。采用SPSS13.0设计4因素2水平正交实验,对α-ALA(0.5 mmol/L和1 mmol/L)、IPTG(0.5 mmol/L和1 mmol/L)、卡那霉素(50μg/mL和100μg/mL)添加浓度及菌的接种密度(接种1%和接种2%)进行优化。并用SPSS13.0对结果进行分析,选择出比较好的组合进行下一步的大规模的诱导表达。经定点突变的方法成功获得了CYP3A4*19亚型。经IPTG诱导获得CYP3A4蛋白,并通过Western blot验证。用BCA蛋白浓度定量分析试剂盒测定的膜蛋白浓度在65μg/mL左右,α-ALA、抗生素(卡那霉素)、T7启动子诱导剂IPTG及接种密度高低两水平中对膜蛋白的表达水平的影响没有统计学意义。; 柳艾姣石磊方方赵树进; 关键词：纯化

孕甾烷受体与内外源物质代谢及相关疾病: 2014年; 目的:综述孕甾烷受体(Pregnane X receptor,PXR)与内外源性物质代谢及相关疾病的研究进展,为后续研究提供参考。方法:查阅近年来国内外关于PXR与内外源性物质代谢及相关疾病的文献。结果:PXR参与机体的糖脂代谢及下游代谢酶的转录表达过程,不但与肥胖糖尿病的发生发展相关联,参与物质分解和机体功能稳定的维持,还与药物的疗效作用及癌症的发生发展相关。结论:PXR是机体物质能量代谢的枢纽之一,其功能状态影响着下游靶基因的状态,并因此与疾病发生关联。; 方方袁进赵树进石磊; 关键词：脂质类固醇激素基因多态性炎症性肠病

PXR基因的4个位点SNP与汉族人群高脂血症的关联研究被引量：3: 2014年; 目的：通过研究中国汉族人群PXR基因突变频率较高的SNP位点与高脂血症的关联性,来对汉族人群高脂血症的发生作前瞻性的探讨。方法：以高分辨率熔解曲线法,对162例高脂血症患者和183例健康对照个体rs7643645、rs2461825、rs2472682、rs6785049位点作DNA分型,并进行统计学分析。结果：在显性遗传模式下与野生型比较,rs7643645 TC、CC型P=0.006,优势比（OR）=0.520,95%置信区间（CI）为0.325~0.832;rs6785049AG、AA型P〈0.000 1,OR=2.320,95%CI为1.470~3.662。以当前数据仅在分层分析发现rs2472682的组间差异,未见rs2461825的组间差异。结论：rs7643645突变与高脂血症发病风险的降低相关,rs6785049突变与高脂血症发病风险的增加相关。; 方方袁进石磊刘培庆; 关键词：PXR SNP 高分辨率熔解曲线高脂血症

重组细胞色素酶P450 3A4、表达和鉴定: 目的：旨在构建细胞色素酶P450 3A4的表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化得到CYP3A4蛋白。方法：用逆转录-聚合酶链反应方法从人肝脏总RNA中得到CYP3A4的cDNA,然后直接插入pMD(R)20-T Vector...; 柳艾姣石磊方方赵树进; 关键词：药物相互作用基因鉴定; 文献传递

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