李一星 作品数:25 被引量:25 H指数:4 供职机构: 华中农业大学生命科学技术学院农业微生物学国家重点实验室 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 更多>>
紫云英根瘤中共生固氮下调表达基因的分离与初步分析 被引量:2 2014年 对前期利用抑制消减杂交技术(Suppressive subtractive hybridization, SSH)构建的紫云英(A stra-galus sinicus)根部组织的共生固氮差异表达cDNA文库进行了全文库测序和初步分析,并利用半定量RT-PCR方法验证了其中5个基因片段在根瘤中的下调表达。结果表明,从180个克隆中共获得94个有效序列,文库插入片段长度为200~1300 bp。 BLAST同源比对分析结果表明,有90个序列可以找到同源片段,有4个可能为新基因,按功能分为10个类群。 李一星 吴梅 李友国关键词:共生固氮 抑制消减杂交 华癸中生根瘤菌7653R bacA基因的克隆和功能鉴定 @@在苜蓿中华根瘤菌中,bacA基因的缺失将直接影响类菌体分化。根瘤菌从侵入线中释放后不久即迅速凋亡,无法形成具有共生固氮能力的成熟类菌体,从而使其对宿主植物的侵染无法持续。研究表明,苜蓿中华根瘤菌BacA蛋白是一种内膜... 谭雪娟 李一星 李友国 周俊初关键词:克隆 文献传递 紫云英二磷酸核苷磷酸酯酶基因AsIA257在共生固氮过程中的功能研究 王建云 石晓峰 李一星 李友国与紫云英豆血红蛋白Lb相互作用靶蛋白的筛选与鉴定 王宁 李一星 陈大松 李友国基于黄单胞菌冰核蛋白N端的表面展示体系建立 被引量:2 2014年 为了建立一个自主、高效的细菌表面展示体系,利用野油菜黄单胞菌冰核蛋白N端结构域,将短小芽孢杆菌脂肪酶展示于大肠杆菌Rosetta 2(DE3)表面.采用细胞分级、脂肪酶活测定和His-tag In-gel stain分析等检测了重组蛋白的表达情况,并进一步检测了不同底物、温度、pH和有机溶剂对酶活稳定性的影响.结果显示融合蛋白在大肠杆菌细胞外膜成功展示,重组菌脂肪酶活为(74.6±4.5)U/g冻干细胞,展示水平为每个细胞表面19 267个脂肪酶分子;展示酶对中长链脂肪酸酯表现出较高的水解活性,最适pH为11.0,最适温度为40℃,且在40℃保温一周仍保持80%以上的酶活.本研究表明基于野油菜黄单胞菌冰核蛋白N端的展示体系是一种高效、稳定的细菌表面展示体系. 付玮 李友国 李一星关键词:野油菜黄单胞菌 脂肪酶 大肠杆菌 紫云英非特异性转脂蛋白AsIB259的体外酶活性及在共生固氮中的功能 被引量:5 2014年 将紫云英AsIB259基因编码的一个预测的非特异性转脂蛋白AsIB259(nsLTP,non-specific lipid transfer protein)在大肠杆菌表达菌株Rosetta 2(DE3)中进行了诱导表达,体外测定AsIB259蛋白的脂质结合动力学特征,检测它对不同碳链长度脂肪酸及其衍生物的结合能力,进一步考查AsIB259超表达对紫云英毛根结瘤情况的影响。结果表明:AsIB259具有转脂蛋白的典型特征,与16~22碳链长度脂肪酸的结合活性较强,对茉莉酸也表现出一定的结合活性;AsIB259超表达导致根瘤数量增加1.5倍且固氮酶活性降低,说明该基因在根瘤形成和固氮过程中发挥重要作用。 李一星 王建云 石晓峰 陈大松 李友国关键词:体外表达 共生固氮 半胱氨酸蛋白酶基因Asnodf32在紫云英根瘤衰老过程中的功能研究 @@Asnodf32是由Natio等从紫云英中分离到的一个晚期结瘤素基因,编码一个根瘤特异表达的半胱氨酸蛋白酶。该基因在成熟的根瘤中表达量增加。原位杂交结果表明,它在过渡区和衰老区大量表达。因此,Natio等推测该基因编... 李一星 李友国 周俊初关键词:RNA沉默 固氮 胁迫 文献传递 利用细菌双杂交文库筛选华癸中慢生根瘤菌7653R中与外膜蛋白Opa22互作的蛋白 被引量:6 2014年 为研究华癸中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huakuii)7653R外膜蛋白Opa22在共生固氮过程中的作用机制,构建了细菌双杂交基因组随机文库,并以Opa22为诱饵,钓取与其相互作用的候选靶蛋白。结果获得12个与Opa22蛋白互作的阳性克隆,为后续研究Opa22的作用机制提供了新的线索和思路,同时也为开展根瘤菌蛋白互作的研究构筑了良好的技术平台。 李一星 李芳 周鑫兰 谢福莉 李友国关键词:共生固氮 半胱氨酸蛋白酶基因Asnodf32在紫云英根瘤衰老过程中的功能研究 Asnodf32是由Natio等从紫云英中分离到的一个晚期结瘤素基因,编码一个根瘤特异表达的半胱氨酸蛋白酶。该基因在成熟的根瘤中表达量增加。原位杂交结果表明,它在过渡区和衰老区大量表达。因此,Natio等推测该基因编码的... 李一星关键词:RNA沉默 半胱氨酸蛋白酶 紫云英 文献传递 华癸中生根瘤菌-紫云英共生固氮体系分子机理研究 @@共生固氮作用包括早期和晚期两个阶段,有大量的根瘤菌和植物基因参入其中。早期共生基因调控着根瘤菌的入侵、侵入线和根瘤形成等过程。近年来,在早期根瘤发生、发展和形成过程中根瘤菌与宿主植物相互识别、信号分子间相互作用的研究... 李友国 李一星 谢福莉 陈大松 丑敏霞 程国军 谭雪娟 周俊初关键词:根瘤菌 紫云英 分子机理 文献传递