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李剑: 作品数：14 被引量：102H指数：6; 供职机构：南开大学更多>>; 发文基金：天津市自然科学基金中国博士后科学基金更多>>; 相关领域：生物学轻工技术与工程石油与天然气工程医药卫生更多>>

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海藻酸钠-聚乙烯醇共固定化细胞脱除燃料油中的有机硫被引量：11: 2006年; 从孤岛油田油浸土壤中筛选得到能降解二苯并噻吩（DBT）的红平红球菌DS-3，对其进行了固定化研究．选取海藻酸钠（SA）-聚乙烯醇（PVA）为包埋固定化载体，以1mmol·L^-1二甲基亚砜培养菌体，固定化最佳操作条件为4℃交联，8％PVA和2％SA混合，细胞在胶液中的浓度为0．1g·ml^-1，氯化钙含量为2％，此时固定化细胞不但具有良好的脱硫性能，而且脱硫重复性好，其寿命可以达到250h以上．固定化细胞在3次循环后能使模拟柴油中的DBT含量从0．5mmol·L^-1降至0．011mmol·L^-1，总脱硫率达到93％，平均脱硫效率约为0．225mgDBT·（gDCW）^-1·h^-1．同样条件下能将精制柴油的硫含量由340mg·L^-1降到42mg·L^-1，总脱硫率为87．64％．DS-3能利用醇类、饱和的C8～C15脂肪烃，但不能利用环烷烃、芳香烃、小于C8或大于C15的脂肪烃，DS-3优先利用碳源的顺序是乙醇、葡萄糖和烷烃．脱硫前后的精制柴油经GC—FID分析证实，同定化细胞对C—S键具特异性，不降低柴油的热值．; 马挺李国强李剑李珊珊李红梁凤来刘如林; 关键词：海藻酸钠聚乙烯醇固定化细胞生物脱硫

D－乳酸脱氢酶基因、包括该基因的重组载体及其宿主细胞: 本发明涉及D－型乳酸脱氢酶基因、含有该基因的重组载体及用该载体转化的宿主细胞，特别是涉及构建生产L－乳酸的基因工程技术。自然界中存在L和D两种乳酸脱氢酶，如果D－乳酸脱氢酶缺失，就可以得到纯度为100％的L－乳酸。D－乳...; 李剑刘如林马建芳梁凤来唐赟; 文献传递

L(+)-乳酸高产菌株的选育被引量：17: 2004年; 以代谢调控发酵理论为依据,利用紫外线、亚硝基胍、DES等理化因子对乳酸菌进行复合诱变,再用高浓乳酸钙平板、纯乳酸平板、琥珀酸平板筛选得到一株高产L(+)-乳酸的正向突变株M7,平均发酵产量为90g/L,比原菌株产量提高30%,对糖的转化率为88.9%。; 徐子钧李剑马建芳王淑芳刘如林; 关键词：乳酸菌菌种选育

L－乳酸脱氢酶基因、包括该基因的重组载体及其宿主细胞: 本发明公开了一种L－乳酸脱氢酶基因、包括该基因的重组载体及其宿主细胞，L－乳酸脱氢酶基因具有序列表中SEQ ID No.5所述的核苷酸序列；一种包括L－乳酸脱氢酶基因的重组载体，通过PCR扩增出的L－乳酸脱氢酶的开放阅读...; 李剑刘如林梁凤来张心平唐贇; 文献传递

一株高产乳酸菌株的分离鉴定及特性研究被引量：1: 2008年; 从青贮饲料中筛选到一株能在48℃条件下生产乳酸的乳酸菌.该菌株革兰氏染色呈阳性,细胞呈杆状,菌体大小为(0.4～0.8)μm×(1.8～6.4)μm,无芽孢和鞭毛;兼性厌氧,接触酶阴性,不运动,同型乳酸发酵,产 D 型和 L 型乳酸.该菌株16SrDNA 序列与异型乳酸发酵的 Lactobacillus hilgardii 相似性达到98%,但在发酵类型上差异显著.通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳表明该菌株具有 D 型和 L 型两种乳酸脱氢酶.菌株 MD-1在适宜发酵条件下,乳酸产量可达约140 g/L,是一株性能优良的乳酸生产菌,可用作乳酸发酵生产.; 李剑唐赟梁凤来张心平刘如林马挺; 关键词：RDNA 系统发育分析

利用SAS软件优化L-乳酸发酵培养基被引量：53: 2004年; 利用SAS软件中二水平设计和响应面分析法较系统地研究了乳酸菌(Lactobacillussp.)M7发酵培养基,得到了在一定条件下乳酸产量随牛肉膏、柠檬酸二铵、吐温80含量的变化规律,并根据分析结果优化了发酵培养基,简化了基本配方,产量可提高15％。; 徐子钧李剑梁凤来马建芳刘如林; 关键词：SAS 培养基优化

网络环境中的军事文化传播: 军事文化传播是文化传播的一个重要分支领域，它对于军事文化功能的发挥起着直接的影响作用。当前以网络为主要推动力量的全球信息化发展进程中，军事文化传播应该也必须与网络传播紧密结合起来，充分利用网络传播所具有优势和特点，克服网...; 李剑; 关键词：网络环境全球信息化; 文献传递

L-乳酸脱氢酶基因克隆及功能分析被引量：7: 2004年; 构建了一株产D ,L_乳酸的乳杆菌 (Lactobacillussp .)MD_1的基因文库。利用乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的EscherichiacoliFMJ14 4作为宿主 ,通过互补筛选分离克隆到乳酸脱氢酶基因 (ldhL)。核酸序列分析表明 ,该基因以ATG为起始密码子编码 316个氨基酸残基组成的蛋白质 ,预测的分子量为 33 84kD ;5′端存在典型的启动子结构 ,3′端的终止子是不依赖于 ρ因子的转录终止子。ldhL编码的蛋白质有 3个保守区域 ,其中Gly13～Asp5 0保守区域是NADH的结合位点 ,Asp73～Ile10 0和Asn12 3～Arg15 4保守区是酶的活性部位。该ldhL和其他乳杆菌的ldhL基因和编码的氨基酸序列相似性较低 ,核苷酸序列相似性最高仅为 6 4 1% ,氨基酸序列相似性最高仅为 6 8 9% 。; 李剑唐赟梁凤来张心平刘如林; 关键词：乳杆菌 L-乳酸脱氢酶基因克隆氨基酸序列

D-乳酸脱氢酶基因克隆及其表达被引量：12: 2004年; 构建了一株产D ,L 乳酸的乳杆菌 (Lactobacillussp .)MD 1的基因文库。利用乳酸脱氢酶和丙酮酸裂解酶缺陷的EscherichiacoliFMJ1 4 4作为宿主 ,在厌氧条件下通过互补筛选获得乳酸脱氢酶基因 (ldh) ,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 (Native PAGE)检测证明其阳性克隆表现出D 乳酸脱氢酶 (D LDH)活性。核酸序列分析表明 ,ldhD的ORF编码 331个氨基酸残基组成的蛋白质有两个保守区域 ,其中V1 47～D1 76 区是NADH的结合位点 ,R77～E1 0 7区据报道是酶的活性部位。该菌株D LDH和D羟基异己酸脱氢酶 (D HicDH)属于NADH依赖性脱氢酶家族 ,ldhD和其他乳杆菌属的ldhD及D HicDH基因和编码的氨基酸序列相似性较低 ,核酸序列相似性最高达 4 9 33% ,氨基酸序列相同性最高为 4 2 % ,是一个新的D; 李剑唐赟梁凤来马建芳刘如林; 关键词：基因克隆乳杆菌

Lactobacillus delbrueckii营养条件的研究被引量：6: 2003年; 研究了L delbrueckiiYJS 2 1的营养要求 ,结果表明 ,L delbrueckiiYJS 2 1缺乏合成L 谷氨酸、L 天冬氨酸、L 色氨酸、L 异亮氨酸的能力 ;生物素、对氨基苯甲酸、硫胺素对L delbrueckiiYJS 2 1生长及产酸有明显的促进作用。同时利用正交设计优化得到了最佳生长因子 :L 谷氨酸 30mg/L、L 天冬氨酸 8mg/L、L 色氨酸 1 2mg/L、L 异亮氨酸 6mg/L、生物素 180 μg/L、对氨基苯甲酸 4mg/L、硫胺素 2 0mg/L。在最适发酵条件下 ,乳酸产量、对糖转化率、乳酸生产率分别为 14 0 3g/L、93 5 %、1 95 g/ (L·h)。; 李剑高年发刘伟杨枫; 关键词：营养条件乳酸发酵