李存枚
- 作品数：8 被引量：10H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学附属六安医院更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIV-1 HXB2株Tat蛋白在大肠杆菌中的分段表达及免疫原性分析被引量：1
- 2008年
- 目的研究对人类免疫缺陷病毒Ⅰ型HXB2株调控蛋白Tat原核表达产生影响的区域和Tat蛋白重要的抗原表位。方法用PCR方法获得Tat(1-48aa)、Tat(22-72aa)和Tat(38-101aa)DNA片段,构建其原核表达质粒pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa),并转入E.coliBL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物。采用间接ELISA方法用兔抗pET32a-Tat抗血清对三种肽段进行免疫原性分析。结果成功构建了pET32a-Tat(1-48aa)、pET32a-Tat(22-72aa)和pET32a-Tat(38-101aa)质粒,分别表达出相对分子质量(Mr)为23×103、23×103和25×103的融合肽段,其浓度分别为4.26、3.35和5.11mg/ml。间接ELISA结果表明三种融合肽段与兔抗pET32a-Tat抗血清均呈特异性结合反应,其抗体滴度分别为1:128000、1:32000、1:64000,而抗血清与pET32a蛋白仅有较弱结合。结论半胱氨酸富集区(22-37位氨基酸)对Tat蛋白的原核表达有较显著影响;Tat蛋白的N端区、碱性区和C端区是其重要的抗原表位,其中N端区的免疫原性最强。
- 陈璐潘卫曹洁卢海妹何俊蒋少华唐萍李存枚廖文婷邓松华
- 环磷腺苷葡胺治疗尿毒症性心肌病49例临床观察被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨环磷腺苷葡胺(MCA)治疗尿素症性心肌病的效果。方法:回顾性分析49例尿毒症心肌病患者的病例资料。结果:尿毒症心肌病在常规治疗基础上辅以环磷腺苷葡胺治疗,MCA可以改善尿毒症心肌病患者左心功能,且疗效优于对照组(P<0.05或P<0.01);MCA治疗在一定时间内改善左室结构且优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。结论:在常规治疗基础上辅以MCA治疗对尿毒症性心肌病具有较好的治疗效果。
- 李祖海李存枚董胜柱白友为
- 关键词：尿毒症心肌病环磷腺苷葡胺左心功能左室结构
- HIV-1 Tat移位突变体的构建及其表达纯化
- 近年来,HIV感染在全球呈迅猛上升趋势,现已成为危害人类健康最严重的传染病之一。现有的抗病毒药物都不能根治艾滋病,为降低感染者的发病率以避免更多的人感染HIV病毒,研制有效的HIV疫苗成为HIV防治的重要手段之一。 HI...
- 李存枚
- 关键词：人类免疫缺陷病毒I型TAT蛋白PR蛋白
- 文献传递
- 腹膜透析在六安市终末期肾病人群中的临床应用被引量：6
- 2014年
- 目的探讨腹膜透析在六安市终末期肾脏病人群中的临床应用。方法回顾性收集2010年3月至2013年5月三年间在该院进行持续性不卧床腹膜透析治疗的148例终末期肾病患者的流行病学、并发症以及相关临床情况,分析可能的原因,并加以归纳、总结。结果 148例患者在性别、年龄、病因及并发症方面,与国内其他腹膜透析中心相比基本接近,经过腹膜透析治疗后,临床症状均有不同程度改善。结论腹膜透析与血液透析相比,具有投入少,不需特殊设备等优势,是一种有效的临床治疗手段,适合在六安市这样一个经济欠发达地区居民中开展。
- 吴丹程小敏张家敏高习和张香如李祖海周扬平李存枚程润白友为
- 关键词：腹膜透析终末期肾病
- 慢性肾脏病继发性甲旁亢治疗进展(综述)被引量：2
- 2015年
- 继发性甲状旁腺功能亢进症(SHPT)是慢性肾脏病(CKD)常见的并发症。近年研究发现,新型的磷结合剂碳酸镧,能有效降低血清磷水平,并不引起继发骨损害和高钙血症,是一种相对较安全的磷结合剂,西那卡塞是被称为拟钙剂(calcimimetics)的新一类化合物中的第一个药物,能激活甲状旁腺中的钙受体,从而降低甲状旁腺素的分泌。尤其适用于慢性肾衰竭患者顽固性、继发性甲状旁腺功能亢进伴有高磷血症的短期治疗。
- 李存枚李祖海白友为
- 关键词：高磷血症
- HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体的构建及在大肠杆菌中的高效表达
- 2009年
- 目的构建HIV-1HXB2株Tat半胱氨酸富集区N端移位突变体,并在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中进行高效表达和纯化。方法应用PCR拼接的方法将首轮合成Tat基因的半胱氨酸富集区(64～111位核苷酸,22～37位氨基酸)移位至缺失半胱氨酸富集区的Tat(△C)的N末端,获得其突变体序列(Tat(CN)DNA),构建其原核表达质粒pET32a-Tat(CN),并转入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达及纯化,经SDS-PAGE鉴定表达及纯化产物,纯化后的产物用间接ELISA进行鉴定。结果构建了pET32a-Tat(CN)突变体,pET32a-Tat(CN)融合蛋白在大肠杆菌中表达水平为5.17mg/ml,相对分子质量为31ku。间接的ELISA结果表明,pET32a-Tat(CN)能与Tat兔抗血清呈特异反应。结论成功构建了HIV-1 HXB2株Tat半胱氨酸富集区移位至TatN端的突变体,并能在大肠杆菌中高效表达,其纯化的蛋白pET32a-Tat(CN)很好地保留了与HIV-1Tat兔抗血清的免疫反应性,为HIV-1Tat的疫苗基础研究提供了一有价值的研究结论。
- 李存枚潘卫曹洁王锦红黄德圣庞强廖文婷邓松华
- 关键词：TAT
- 构建SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库
- 2010年
- 目的构建免疫球蛋白结合分子金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)和链球菌蛋白G(SPG)单结构域随机组合噬菌体展示文库,为研究其分子功能与结构的关系奠定基础。方法 PCR扩增制备SPA的A、B、C、D、E结构域和SPG的B2结构域核苷酸片段,在片段两端通过引物引入XbaⅠ酶切位点和保护碱基,3'端引入3个氨基酸大小的随机连接肽核苷酸序列,各结构域核苷酸片段经XbaⅠ酶消化,在T4连接酶作用下随机相互连接并克隆于噬菌体展示载体pCANT-AB5S,克隆产物转化E.coliDH5α,提取原代库质粒转化E.coliTG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建成SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库。结果该噬菌体展示文库库容量为1.87×107cfu,滴度为1.3×1014TU/ml,文库的片段插入率近100%,其中插入多个结构域的阳性克隆占21.7%,序列分析显示各结构域之间的连接和随机连接肽序列具有随机性。结论成功地构建了SPA和SPG单结构域随机组合噬菌体展示文库,该文库在库容量、多样性和随机性方面满足体外分子进化研究的要求。
- 黄德圣潘卫曹洁庞强唐萍廖文婷李存枚陈秋莉邓松华
- 人类免疫缺陷病毒1型HXB2株Tat突变体的构建、原核表达及免疫原性分析
- 2009年
- 目的构建HIV一1HXB2株Tat基因半胱氨酸富集区3’末端移位突变体，经原核表达和纯化，分析该突变体蛋白（Tat—cct）的免疫原性。方法用PCR方法将HIV一1HXB2株Tat基因的半胱氨酸富集区（64～111位核苷酸）移位至Tat基因的3’末端，获得其突变体DNA序列，并构建其原核表达质粒pET32a—Tat—oct，转人大肠埃希菌E．coliBL21（DE3）中进行诱导表达及纯化。以Tat—cct融合表达蛋白免疫BALB／c小鼠，ELISA方法对该抗血清进行免疫原性检测分析。结果pET32aTat—cct重组质粒可在E．coliBI。21（DE3）中诱导表达，纯化后其融合蛋白相对分子质量约为31000。Tat—cct重组蛋白免疫小鼠诱导产生的抗体滴度为1：1600，该抗体与Tat—cot蛋白和Tat蛋白（1～101位氨基酸）均呈特异性结合反应。结论Tat突变体重组蛋白Tat—cct能在大肠埃希菌中有效表达，并较好保留其免疫原性，为HIV一1Tat疫苗的基础研究提供了有价值的实验结论。
- 李存枚邓松华曹洁王锦红陈璐黄德圣潘卫
- 关键词：HIV-1基因产物TAT重组蛋白质类免疫
