李爱香
- 作品数：8 被引量：6H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mFasL基因转移诱导异基因骨髓移植受者获得免疫赦免的实验研究
- 2003年
- 目的 :通过导入外源FasL cDNA ,诱导异基因骨髓移植物中针对受者MHC的淋巴细胞凋亡 ,从而防止移植物抗宿主病 (GVHD)的发生。方法 :pBillneo mFasL质粒经酶切鉴定后 ,采用脂质体转移法导入Balb c鼠骨髓单个核细胞 (BMNC) ,体外与BAC鼠骨髓移植物混合培养后 ,输注给经致死量照射的Balb c小鼠 ,通过观察受者存活率、GVHD的表现、肠、肝、皮肤病理组织学检查 ,以观察受者鼠GVHD的发生情况 ,同时观察受者鼠的脾结节以了解其造血功能重建。受者鼠骨髓细胞Y染色体分析 ,以查明供者来源的造血干细胞是否植入。结果 :pBillneo mFasL内mFasL cDNA酶切鉴定提示可以按顺序合成出功能蛋白质 ,采用脂质体法传导入BMNC后 ,Westen Blot显示出抗FasL抗体识别的条带。转基因BMNC与BAC鼠脾单个核细胞 (SMNC)混合培养后 ,经流式细胞仪检测 ,SMNC凋亡率明显高于对照组 [(14 .76 %± 0 .36 ) %vs(1.8± 0 .4 2 ) % ,t=3.0 1,P <0 .0 0 1]。骨髓移植 (BMT)后 ,受者GVHD的发生率实验组明显低于对照组 (4 0 %vs10 0 % ,χ2 =6 .0 0P <0 .0 5 )。Y染色体分析 ,提示有供者来源的造血干细胞植入并增殖活化。移植 10d后受者即有脾结节形成 ,2 0d达正常水平。结论 :采用脂质体转移法 ,能将mFasL cDNA转入鼠BMNC并能有效地表达 。
- 江端黄星原徐之良刘凌波邹萍李爱香马艳萍
- 关键词：基因转移异基因骨髓移植免疫赦免
- 通过FasL通路阻抑肿瘤免疫逃逸的研究被引量：2
- 2003年
- 许多白血病和实体瘤细胞通过高表达Fas配体 (FasL)而发生肿瘤的免疫逃逸。为了观察腺病毒载体向肿瘤细胞导入小鼠可溶性Fas(sFas)基因后能否阻抑肿瘤细胞通过FasL发生肿瘤免疫逃逸作用 ,采用AdEasy腺病毒载体系统 ,利用大肠杆菌内质粒间同源重组的方法分别构建携带小鼠sFas基因及增强型绿色荧光蛋白 (EGFP)的重组腺病毒载体 ,扩增纯化后利用空斑试验测定滴度 ,Westernblot检测蛋白的表达。然后 ,分别感染肿瘤细胞 EL4细胞 ,用氚胸腺嘧啶核苷 ( 3 H thymidine,3 H TdR)掺入法检测其诱导靶细胞YAC 1的凋亡率。结果表明 ,获得了重组成功的复制缺陷的腺病毒载体AdsFas和AdEGFP ,密度梯度离心纯化后其滴度达到 10 11pfu/ml,Westernblot分析证实前者能够高效表达出sFas蛋白。转染肿瘤细胞EL4细胞之后与YAC 1细胞混合培养 ,导入sFas组的YAC 1凋亡率在效靶比 (E∶T)为 3∶1,10∶1和 30∶1时分别为 6 %、7%和 9% ,与对照组 (分别为 2 8%、37%和4 5 % )相比明显下降 ,统计学有显著性差异 (P <0 .0 1) ;而导入EGFP组YAC 1凋亡率 (分别为 30 %、36 %和 4 8% )与对照组相似 ,没有统计学差异 (P >0 .0 5 )。结论 :腺病毒介导sFas的导入能够明显抑制肿瘤细胞EL4诱导Fas+细胞 YAC 1的凋亡 。
- 胡中波邹萍李爱香王良利刘凌波
- 关键词：FAS配体重组腺病毒肿瘤免疫逃逸FASL
- 转染sFas基因骨髓移植阻抑白血病小鼠肿瘤细胞的免疫逃逸被引量：1
- 2006年
- 目的探讨骨髓细胞转染小鼠可溶性Fas（sFas）基因后移植能否阻抑白血病小鼠肿瘤细胞的免疫逃逸。方法用AdEasy系统构建携带sFas和EGFP的腺病毒质粒，先按病毒／细胞的感染倍数（MOI）为100的比例分别直接感染呈对数生长期的EL4细胞，培养24h后，采用氚标记胸腺嘧啶掺入法检测其诱导YAC-1细胞凋亡的情况。然后同法以携带sFas和EGFP的腺病毒质粒分别转染雄性C57BL／6小鼠骨髓细胞，每只雌性C57BL／6小鼠（白血病模型）通过尾静脉接受5×10^6～10×10^6个转染sFas或EGFP的雄性C57BL／6小鼠骨髓单个核细胞移植。移植后观察受者的造血重建情况、白血病／淋巴瘤的发生及生存率。结果体外实验中，转染EGFP的EL4细胞诱导YAC-1细胞凋亡的情况与非转染的EL4细胞相似，转染sFas基因后，YAC-1细胞的凋亡率明显下降（P〈0．01）。接受转染sFas基因的骨髓移植者，移植后8周受者全部存活（16／16），骨髓中未发现EL4细胞，造血功能恢复良好，能检测到Y染色体；接受转染EGFP的骨髓移植者，移植后8周仅1只小鼠（1／16）存活（P〈0．01），在死亡和存活的小鼠中均存在EL4细胞，其造血重建情况较转sFas者差。结论转染sFas基因的造血细胞移植可以在体内阻抑肿瘤细胞的免疫逃逸，同时不影响造血重建功能。
- 黎纬明赵智刚邹萍胡中波李爱香刘凌波
- 关键词：转染肿瘤逃逸骨髓移植白血病
- 体外转染mFasL-cDNA小鼠骨髓细胞预防移植物抗宿主病的实验研究
- 2003年
- 为了探讨通过Fas FasL途径清除骨髓移植物中T细胞后 ,预防移植物抗宿主病 (GVHD)的可能性 ,采用脂质体转移法将FasL cDNA转染雌性BALB/c小鼠骨髓细胞 ,证实其获得表达后 ,体外与雄性BAC (BALB/c×C57BL/ 6)小鼠骨髓移植物混合培养后输注给经致死照射的BALB/c鼠 ,然后观察受体鼠GVHD的表现、死亡率 ,进行组织病理学检查 ,骨髓细胞Y染色体及CFU S检测。结果表明 :实验组 10只小鼠 ,60天死亡 2只 ,4只有GVHD改变 ;对照组 10只 ,60天死亡 7只 ,10只均有GVHD改变 ;两组骨髓细胞Y染色体分析显示均有供体鼠来源的骨髓细胞植入 ;CFU S检测表明实验组动物体内 10天即有CFU S形成 ,移植后第 2 0天即达正常水平。结论 :转染mFasL cDNA小鼠骨髓细胞能有效地预防GVHD的发生 ,并能使受体造血功能获得重建。
- 徐之良邹萍刘凌波李爱香马艳萍
- 关键词：FAS抗原FAS配体骨髓移植移植物抗宿主病
- 抑制细胞外调节蛋白激酶增强Jurkat淋巴瘤细胞对三尖杉酯碱的敏感性
- 2003年
- 目的 研究细胞外调节蛋白激酶 ( ERK)在三尖杉酯碱 ( HRT)诱导 Jurkat淋巴瘤细胞凋亡中的作用。方法 用四甲基偶氮唑盐 ( MTT)法、流式细胞术和 Western印迹检测法分别检测细胞增殖抑制率、细胞凋亡和磷酸化ERK蛋白的表达。结果 研究发现下调磷酸化状态的细胞外调节蛋白激酶的表达可以增强淋巴瘤细胞系 Jurkat对三尖杉酯碱的敏感性。结论 ERK通路对维系 Jurkat淋巴瘤细胞生存有重要作用 。
- 李登举张瑶珍李爱香黄伟
- 关键词：淋巴瘤化疗敏感性细胞外调节蛋白激酶三尖杉酯碱
- 血管紧张素Ⅱ对定向造血祖细胞BFU-E体外扩增的影响被引量：1
- 2003年
- 目的:研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)参与造血调控的机制及其对造血干/祖细胞BFU-E定向优势分化的作用。方法:将脐血来源的CD34^+细胞在不同的细胞因子组合中悬浮培养,使它们向红系造血祖细胞优势分化,分别在不同时间对培养细胞进行3种处理:一部分细胞提取RNA,用RT-PCR方法检测AngⅡ受体mR-NA的转录;一部分添加AngⅡ和其他细胞因子继续培养3天后转移到半固体培养基中进行集落计数;其余细胞在原来的条件下继续悬浮培养。结果:新分离的CD34^+细胞表面无AngⅡ受体mRNA的表达,此时添加AngⅡ对造血祖细胞生长无明显作用;在CD34^+向红系优势分化体系中悬浮培养7天后,细胞中能检测到AngⅡ受体mRNA的表达,此时添加AngⅡ可刺激BFU-E的扩增;在培养第14天,细胞中己无AngⅡ受体表达,此时添加AngⅡ对红系祖细胞的扩增已无明显作用。结论:红系祖细胞在分化过程中有AngⅡ受体mRNA的表达,AngⅡ可刺激早期红系造血祖细胞的增生,并可提高造血细胞向红系定向优势分化的效率。
- 黎纬明彭程李爱香马艳萍邹萍
- 关键词：脐血造血祖细胞体外扩增造血调控
- Fas配体在髓系白血病细胞中的表达及功能研究被引量：2
- 2002年
- 为了解Fas配体 (FasL)在髓系白血病细胞中的表达水平及其诱导Fas+敏感细胞发生凋亡的功能 ,用流式细胞术检测 38例髓系白血病患者 (外周血白细胞 >10 0× 10 9/L)的白血病细胞在新鲜分离及IL 2和IFN γ刺激后表面膜FasL的表达水平 ,将白血病细胞 ( 1× 10 6/ml)与Jurkat细胞 ( 1× 10 5/ml)混合培养 2 4小时后 ,用DNA电泳和流式细胞术双标法检测Jurkat细胞发生凋亡的情况。结果表明 :白血病细胞表面FasL表达量 ( 3.5 9± 1.0 5 ) %高于正常人 ( 0 .36± 0 .16 ) % ,P <0 .0 0 1,经IL 2和IFN γ刺激后其表达量明显增加 ( 7.78± 3.4 0 ) % ,P <0 .0 1;白血病细胞刺激前后诱导Jurkat细胞发生的凋亡率分别为 ( 8.2 8± 1.6 1) % ,( 10 .73± 2 .16 ) % ,差异具有显著性意义。结论 :FasL在髓系白血病细胞表面高表达且对Fas+的敏感细胞具有杀伤功能 ,推测Fas/FasL途径可能在白血病的“免疫逃逸”
- 李爱香邹萍王良利胡中波马艳萍
- 关键词：FAS配体细胞凋亡流式细胞术白血病
- Fas配体在白血病中的表达及意义
- 2001年
- 李爱香邹萍
- 关键词：白血病
