刘凌波
- 作品数：69 被引量：99H指数：5
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海外青年学者合作研究基金湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- CD80-IgG融合蛋白的表达、纯化与鉴定
- 2005年
- 目的构建CD80IgG融合基因表达载体,表达并纯化该融合蛋白,初步探讨其增强抗肿瘤免疫的作用方法将小鼠CD80分子胞外段和IgGFc段cDNA串联起来,定向克隆入质粒pcDNA3.0中,使其在哺乳动物细胞中表达。采用免疫亲和层析法纯化,免疫印迹和斑点ELISA鉴定表达的融合蛋白,流式细胞术、MTT法检测其增强白血病细胞CD80分子表达及促进T细胞增殖的功能。结果DNA测序证明两段基因正确插入质粒载体;亲和层析纯化得到浓度为0.1mg/ml,纯度为95%的蛋白质溶液;免疫印迹、ELISA表明该蛋白质即为CD80IgG融合蛋白流式细胞术证明其能够提高白血病细胞表面CD80分子的表达。结论成功构建融合基因表达载体,表达并纯化出融合蛋白,该蛋白可增强CD80分子的表达。
- 何伟刘芳冯献启张敏刘凌波邹萍
- 关键词：融合基因
- 血管内皮细胞生长因子对小鼠CFU-GM、CFU-E、CFU-S生成的影响被引量：6
- 2003年
- 目的 :研究血管内皮细胞生长因子 (VEGF)对小鼠骨髓单个核细胞 (MNC)粒 巨噬细胞系集落形成单位 (CFU GM)、红系集落形成单位 (CFU E)、脾集落形成单位 (CFU S)生成数量的影响。方法 :一部分小鼠骨髓MNC样本在加入或不加入外源性hVEGF的体系中预先培养 2 4h ,分别进行体外造血细胞集落培养和小鼠体内CFU S试验 ,计数CFU GM、CFU E、CFU S集落生成数目 ;另外对剩余骨髓样本不经处理直接在含rhVEGF的体系中进行体外CFU GM、CFU E集落培养 ,观察集落培养体系中添加VEGF对集落生成的影响。结果 :CFU GM、CFU E、CFU S数目分别为 33.2 1± 2 .84、72 .0 0± 4 .5 5和 12 .2 0± 1.32 ,显著高于未处理组 (分别为19.6 0± 2 .10、38.86± 2 .77和 6 .10± 1.5 2 ) (P <0 .0 5 ) ,但均低于正常对照组 (分别为 5 1.97± 2 .4 5、16 4 .2 0± 5 .70和 19.5 0± 2 .4 6 )。外源性hVEGF的存在使VEGF组CFU GM、CFU E产率较正常对照组显著提高 (73.12±3.80∶5 1.39± 2 .6 0 ,198.98± 4 .92∶16 4 .4 0± 5 .32 ) (P <0 .0 5 )。结论 :VEGF不仅对造血细胞集落生成能力具有保护作用 ,还具有促进造血细胞集落生成的作用。
- 仲照东胡中波刘凌波邹萍黄士昂
- 关键词：造血细胞骨髓
- Fas/FasL途径在造血干细胞移植免疫中的实验研究被引量：2
- 2003年
- 目的 探讨转染FasL的CD34+ 细胞对同种抗原特异性T细胞和白血病细胞凋亡的影响。方法 丝裂霉素C预处理表达外源FasL的骨髓CD34+ 细胞 ,分别与经过富集的T细胞 (刺激细胞 /效应细胞比例为 5∶1)和白血病细胞U937混合培养 ,借助原位末端标记法 (TUNEL)和流式细胞仪 (FCM )检测T细胞和白血病细胞的凋亡率。结果 分别以未转染和转染外源FasL的CD34+ 细胞为刺激细胞 ,5d后 ,T细胞凋亡率分别为 :3.2 %± 1.1%、12 .1%± 1.5 % (P <0 .0 1) ,经IL 2作用后 ,凋亡率上升至 17.6 %± 1.3% (P <0 .0 1) ;与白血病细胞U937混合培养 18h后 ,白血病细胞凋亡率分别为 :5 .0 %± 1.3%、10 .8%± 0 .6 % (P <0 .0 1) ,加入阿糖胞苷后 ,凋亡率上升至 17.9%±1.3% (P <0 .0 1)。结论 转染外源FasL的骨髓CD34+ 细胞 ,可诱导同种抗原特异性T细胞和白血病细胞凋亡。提示通过Fas/FasL途径可选择性清除移植物中同种抗原特异性T细胞 ,有望为造血干细胞移植中防治移植物抗宿主病 (GVHD) ,保留移植物抗白血病效应 (GVL)提供新的策略。
- 肖娟邹萍刘忠文马艳萍胡中波刘凌波
- 关键词：造血干细胞移植FAS配体移植物抗宿主病
- 急性单核细胞白血病M5a和M5b染色体核型及免疫表型的差异被引量：2
- 2007年
- 目的研究60例急性单核细胞白血病的细胞遗传学、免疫表型和临床特点，分析亚型M5a和M5b之间的差异。方法采用骨髓直接法和24h短期培养法制备染色体标本，用G显带技术对60例成年人初发急性单核细胞白血病进行核型分析，用免疫荧光标记法及流式细胞术进行免疫表型检测，同时对其临床资料进行回顾性分析。结果60例患者中正常核型29例，异常核型31例，其中，正常核型在M5b中出现率高于M5a（P〈0．01），异常核型中11q23异常和＋8染色体在M5a中均较M5b常见（P〈0．01）；单核白血病细胞的免疫表型差异有统计学意义，其中CD68和CD11b在M5a中的表达高于M5b（P〈0．01）；然而，M5a和M5b患者的髓外浸润、外周血白细胞计数、弥散性血管内凝血（DIC）的出现、完全缓解率以及无病生存期（〉1年）之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论急性单核细胞白血病是一种异质性疾病，其两亚型之间具有各自的细胞生物学特征。
- 李蕾刘凌波邹萍
- 关键词：白血病单核细胞急性核型分析免疫表型
- 同种异基因骨髓移植中控制移植物抗宿主病和保留移植物抗白血病的新策略被引量：5
- 2004年
- 刘凌波邹萍
- 关键词：骨髓移植移植物抗宿主病移植物抗白血病
- 急性单核细胞白血病M5a和M5b的细胞生物学和临床行为比较分析
- 2005年
- 目的比较急性单核细胞白血病M5a和M5b细胞遗传学和免疫表型差异,并了解其与临床行为之间的相互关系。方法采用骨髓直接法和24h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术对58例成人初发急性单核细胞白血病进行核型分析,并用免疫荧光标记法及流式细胞术进行免疫表型检测,同时对其临床资料进行回顾性分析。结果58例患者中正常核型28例,异常核型30例,其中,正常核型在M5b出现率高于M5a(P<0.01),异常核型中11q23异常和+8染色体在M5a中均较M5b常见(P<0.01);CD68和CD11b在M5a的表达高于M5b(P<0.01);不同患者急性单核白血病细胞的免疫表型呈现一定的异质性,但急性单核细胞白血病M5a、M5b两亚型的临床行为未见显著差异。结论M5a和M5b存在各自较独特的细胞生物学特点。
- 刘凌波李蕾肖娟仲照东邹萍
- 关键词：单核细胞细胞遗传学免疫表型
- 格列卫治疗Ph^+急性白血病2例报告
- 2004年
- 方峻刘凌波陈燕宋善俊
- 关键词：急性白血病费城染色体PH染色体格列卫
- 急性单核细胞白血病M_(5a)和M_(5b)核型与临床特征的比较被引量：2
- 2005年
- 目的:比较急性单核细胞白血病M5a和M5b核型差异,并了解其与临床特征之间的相互关系。方法:采用骨髓直接法和24h短期培养法制备染色体标本,用G显带技术,对58例成人初发急性单核细胞白血病进行核型分析,同时对其临床资料进行回顾性研究。结果:58例患者中正常核型28例,异常核型30例,其中,正常核型在M5b中出现率高于M5a(P<0.01),异常核型中11q23异常和+8染色体在M5a中均较M5b常见(P<0.01);临床上异常核型的M5患者常有高白细胞计数,中枢神经系统浸润,完全缓解率低及存活期明显缩短的特征。结论:急性单核细胞白血病在遗传和临床上是一组异质性疾病,但M5a和M5b仍具有各自独特的遗传学背景。
- 李蕾刘凌波邹萍
- 关键词：白血病单核细胞性急性核型
- 抗Fas锤头状核酶阻抑小鼠急性粒-单核白血病细胞免疫逃逸的研究(英文)
- 2006年
- 为了研究抗Fas锤头状核酶对T细胞Fas表达及其凋亡的影响和探讨增强供者淋巴细胞输注时移植物抗白血病(GVL)效应的新策略,构建可有效切割FasmRNA的锤头状核酶真核质粒,用电穿孔法将其导入小鼠CTL细胞株CTLL-2之后,借助RT-PCR和Westernblot检测其Fas的表达,同时检测转染前后其胱冬酶-3(Caspase-3)活性和凋亡(AnnexinV-FITC法)的改变,并用MTT法检测空白对照组、空载体转染组及pU6-RZ596转染组CTLL-2细胞的增殖情况和体外杀伤小鼠急性粒-单核白血病细胞(WEHI-3)的活性。结果表明:构建的U6嵌合型锤头状核酶RZ596在细胞内能有效切割Fas,明显降低小鼠活化CTLL-2的Fas水平,与高表达Fas配体的WEHI-3孵育后,其存活率和体外杀伤WEHI-3活性明显高于对照组。结论:抗Fas核酶能显著降低小鼠活化CTLL-2的Fas表达,使其免于WEHI-3的膜Fas配体经Fas途径所致的凋亡,并提高CTL对小鼠急性粒-单核白血病细胞的杀伤力,从而阻抑小鼠急性粒-单核白血病细胞的免疫逃逸。
- 刘凌波黎纬明邹萍何伟张敏
- 关键词：急性粒-单核细胞白血病免疫逃逸
- 急性单核细胞白血病M5a和M5b亚型的免疫表型及临床特征比较分析被引量：1
- 2005年
- 目的研究急性单核细胞白血病(AML-M5)中M5a和M5b两亚型的免疫表型特征和临床行为及其相互关系。方法采用流式细胞术免疫荧光标记法对58例成人初发急性单核细胞白血病(AML-M5)细胞进行免疫表型检测,同时对其临床资料进行回顾性分析。结果CD68和CD11b在M5a中的表达高于M5b(P<0·01);不同患者单核白血病细胞的免疫表型呈现一定的异质性,但急性单核细胞白血病两亚型临床行为未见显著差异。结论M5a和M5b有着各自较独特的免疫表型特征。
- 吴翠翠刘凌波李蕾肖娟邹萍
- 关键词：急性单核细胞白血病免疫表型
