李经忠
- 作品数：29 被引量：121H指数：7
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
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- bFGF寡肽靶向的聚乙烯亚胺转基因非病毒载体的研制
- 对靶向于肿瘤的基因载体的研究有重要意义和紧迫性。聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)是目前最常用的阳离子多聚物转基因载体。通过受体介导的内吞作用可以增加PEI的转染效率和靶向性。碱性成纤维细胞生长因子(...
- 李经忠王青青余海沈芬平李达郑轶曹雪涛
- 文献传递
- 免疫PCR研究进展被引量：5
- 1999年
- 本文综述了免疫-PCR自建立以来的进展状况，包括灵敏度、抗体／DNAmarker连接物的制备、显示系统、免疫PCR种类以及假阳性的控制等。
- 李经忠
- 关键词：免疫PCR灵敏度假阳性结果
- 非病毒载体的研究现状被引量：12
- 2002年
- 非病毒载体在基因表达质粒、反义寡核苷酸或反义表达质粒真核细胞的靶向转移中 ,有着病毒载体不可替代的作用 ,对这方面的研究人们投入了很大的精力 ,以期在基因治疗方面有所突破。本文综述了近年来非病毒载体的研究现状 ,分别阐明了质粒 DNA肌肉注射、脂质体载体、多聚阳离子载体、多肽导向载体以及嵌合载体 。
- 李经忠王青青余海
- 关键词：非病毒载体基因治疗
- Gene32蛋白对PCR产量的影
- 1999年
- 在临床检测和科研中，有时因引物对原因，ＰＣＲ产量低，不利于结果观察。在ＰＣＲ检测血清ＨＢＶ基因的同时，加入Ｇｅｎｅ３２蛋白，提高了ＰＣＲ产量和灵敏度。１材料与方法１．１基因３２蛋白（Ｇｅｎｅ３２ｐｒｏｔｅｉｎ）（Ｐｈａｒｍａｃｉａ），２．５ｍｇ／ｍｌ...
- 李经忠孟红郭进林
- 关键词：聚合酶链反应HBV乙型肝炎
- 新型非病毒载体聚乙烯亚胺介导基因转染参数的研究被引量：21
- 2006年
- 聚乙烯亚胺是一种新型阳离子多聚物基因释放载体,可结合浓缩DNA,通过粘附内吞,进入细胞,使携带的质粒表达。本研究目的通过对聚乙烯亚胺各种转染参数的测定,为合成以聚乙烯亚胺为骨架的人工载体积累数据。方法:本研究利用聚乙烯亚胺分别结合含β半乳糖甙酶报告基因的pSVβ表达质粒、含绿色荧光蛋白报告基因的pEGFP质粒转染Cos-7细胞,通过组织化学法测定细胞抽提产物中β半乳糖甙酶的表达量、流式细胞仪法测定绿色荧光蛋白阳性细胞的表达比例,来测定影响转基因效率的各种参数。结果:在培养液中,6μg/ml聚乙烯亚胺作用24h,NIH 3T3细胞生存率为64.2%,7μg/ml聚乙烯亚胺细胞生存率为54.4%。电泳阻滞试验,聚乙烯亚胺在N/P比在3.0以上方可完全结合DNA。溶酶体抑制剂氯喹可增加聚乙烯亚胺的转染效率。培养液中的白蛋白、血清可降低转染效率。作为配制聚乙烯亚胺/DNA复合物的溶媒,HEPES缓冲液优于生理盐水,生理盐水优于5%葡萄糖。配制聚乙烯亚胺/DNA复合物的溶媒中加入Mg2+降低转染效率。聚乙烯亚胺转染效率优于SuperFectTM(断裂型树突状多聚物),而毒性低于SuperFectTM。结论:本研究首次报道了聚乙烯亚胺与DNA结合配伍的N/P比计算公式,N/P=7.75×b/c,这里b是PEI的质量(μg),c是质粒的质量(μg);PEI的工作终浓度应≤6μg/ml。通过体外细胞试验证明,聚乙烯亚胺是一种有效的真核细胞转染剂和人工合成基因载体的骨架。
- 李经忠王青青余海
- 关键词：聚乙烯亚胺基因转移
- 新型靶向性聚乙烯亚胺转基因载体的研制
- 该实验利用PEI作为载体系统的骨架,同时利用FGF受体(fibroblast growth factor receptor, FGFR)和整合素在大多数肿瘤细胞和肿瘤新生血管高表达的特点,设计了能与肿瘤细胞表面相应受体结...
- 李经忠
- 关键词：非病毒载体聚乙烯亚胺整合素RGD
- 共刺激分子B7.1和葡萄球菌肠毒素A膜表面共修饰瘤苗抗肿瘤作用的研究被引量：3
- 2004年
- 目的 观察跨膜型葡萄球菌肠毒素A(SEA TM)和糖基化磷脂酰肌醇锚定型mB7 1(mB7 1 GPI)二种免疫分子膜表面修饰瘤苗的抗肿瘤作用是否优于单种免疫分子膜表面修饰的瘤苗。方法 构建pcDNA3 1( + ) /mB7 1 GPI真核表达载体 ,转染中国仓鼠卵巢上皮细胞 (CHO)中 ,表达和纯化mB7 1 GPI。通过蛋白转染法将SEA TM、mB7 1 GPI单独或共同锚定到EL 4肿瘤细胞膜上 ,制成瘤苗 ,观察这些瘤苗刺激小鼠脾细胞的增殖和分泌白细胞介素 (IL) 2和γ干扰素 (IFN) γ的量及抗肿瘤作用。结果 mB7 1 GPI和SEA TM能单独或共同锚定在肿瘤细胞膜上 ,具有相当的稳定性 ;在体外有刺激小鼠脾细胞增殖和分泌IL 2、IFN γ的功能。mB 7 1 GPI、SEA TM、mB 7 1 GPI +SEA TM锚定肿瘤细胞 ,制成的瘤苗 ,能抑制荷瘤小鼠的肿瘤生长和延长荷瘤小鼠的存活时间。mB 7 1 GPI和SEA TM双锚定瘤苗 ,显示出比单一蛋白锚定瘤苗更强的抗肿瘤作用。结论 用蛋白转染法将SEA和mB7 1二种免疫分子同时锚定到肿瘤细胞膜上所制成的瘤苗 。
- 易平勇余海马文学王青青黄常新李经忠
- 关键词：瘤苗B7.1GPI抗肿瘤作用葡萄球菌肠毒素A肿瘤细胞膜
- 不同手术模式对胃癌术后医院感染的影响及相关因素分析被引量：8
- 2016年
- 目的比较两组不同手术模式对胃癌术后医院感染的影响和分析相关影响因素,降低医院感染率和改善胃癌预后。方法选择2014年1月-2015年6月147例经手术治疗的胃癌患者,按手术方式分为研究组82例和对照组65例,分别接受腹腔镜和开腹手术,比较两组患者术后临床指标,数据采用SPSS 17.0软件进行统计分析。结果研究组医院感染率为7.32%,明显低于对照组20.00%,差异有统计学意义(P<0.05);手术后两组CD_3^+、CD_4^+、CD_8^+和CD_4^+/CD_8^+均明显下降,CRP和IL-6均明显升高,与手术前比较,差异均有统计学意义(P<0.05);logistics回归分析显示,CD_4^+/CD_8^+、CRP、IL-6、年龄和临床分期均是医院感染的独立危险因子(P<0.05)。结论腹腔镜手术能明显降低胃癌术后的医院感染率,对免疫功能和机械损伤的影响小可能是其主要原因。
- 吴学辉李经忠刘建军郝永光张庆民张婷婷
- 关键词：胃癌腹腔镜开腹手术医院感染
- 聚乙烯亚胺载体介导的基因转移被引量：9
- 2004年
- 目的 :探讨以聚乙烯亚胺为骨架的非病毒载体在基因转染中的影响因素。方法 :利用聚乙烯亚胺分别结合含β半乳糖甙酶报告基因的 p SVβ表达质粒 ,含绿色荧光蛋白报告基因的 p EGFP质粒转染 Cos- 7细胞 ,通过组织化学法测定细胞抽提产物中βgal的表达量和流式细胞仪法测定绿色荧光蛋白阳性细胞的表达比例 ,来测定影响转基因效率的各种参数。结果 :在培养液中 ,6 mg/ L聚乙烯亚胺作用 NIH 3T3细胞 2 4 h,细胞生存率为 6 4.2 % ,7mg/ L时细胞生存率为 5 4.4 %。聚乙烯亚胺在 N/ P比 3.0以上方可完全结合 DNA。溶酶体抑制剂氯喹可增加聚乙烯亚胺的转染效率 ;培养液中的白蛋白、血清可降低转染效率。作为配制聚乙烯亚胺 / DNA复合物的溶媒 ,HEPES缓冲液和生理盐水优于 2 78mmol/ L葡萄糖。在配制聚乙烯亚胺 / DNA复合物的溶媒中加入 Mg2 +可降低转染效率。结论 :通过体外细胞试验证明 。
- 李经忠王青青余海沈芬平李达郑轶
- 关键词：聚乙烯亚胺转染
- 病原体基因/抗原同时检测的双相免疫-PCR研究及试剂盒制备
- 免疫PCR/Ag技术是1992年建立起来的检测微量抗原的高灵敏度技术.我们在免疫PCR检测抗原方法的基础上,设计了双相免疫PCR法,增加了一项病原体基因的检出,使之成为既能检测抗原,又能检测基因的技术.免疫PCR技术就是...
- 李经忠
- 关键词：乙肝病毒表面抗原丙肝病毒抗体乙肝病毒DNA
