李艳艳
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技厅科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒X蛋白对DNA甲基转移酶3A/3B表达的影响
- 2011年
- 目的观察乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对QSG7701细胞中DNA甲基转移酶(DNMT)3A/3B表达的影响。方法本研究室前期构建好的重组表达质粒pcDNA-X及空载体pcDNA3.0分别转染QSG7701细胞,经含G418的选择性培养基筛选获得稳定转染HBV-X基因的细胞克隆(pcDNA-X/QSG7701)及稳定转染空载体pcDNA3.0的细胞克隆(pcDNA3.0/QSG7701)。采用RT-PCR、Westernblot分别检测转染细胞中HBxmRNA和HBx蛋白的表达。Real-timePCR检测3种细胞DNMT3A/3BmRNA的表达情况。免疫组织化学法检测3种细胞DNMT3A/3B蛋白的表达情况。结果RT-PCR、Westernblot检测结果显示pcDNA-X/QSG7701细胞中有HBxmRNA及HBx蛋白的表达。Real-timePCR结果显示pcDNA-X/QSG7701中DNMT3A/3BmRNA表达水平显著高于pcDNA3.0/QSG7701及未转染的细胞QSG7701(P<0.05)。免疫组织化学检测结果显示pcDNA-X/QSG7701细胞中DNMT3A/3B蛋白表达水平显著高于pcDNA3.0/QSG7701及QSG7701细胞(P<0.05)。结论稳定转染HBV-X基因的人源性永生化非瘤性肝细胞QSG7701中DNMT3A/3BmRNA和蛋白的表达水平均显著升高,提示HBV-X基因在mRNA及蛋白水平能上调转染细胞中DNMT3A/3B的表达,而细胞中DNMT3A/3B表达的增加是否能进一步影响癌基因、抑癌基因的表达水平,从而导致细胞癌变,尚有待进一步研究。
- 宋晓玲李艳艳谭德明刘国珍
- 关键词：乙型肝炎病毒X蛋白乙型肝炎病毒
- TLR4-Nrf2/HO-1信号通路在小鼠机械通气所致肺损伤的作用研究被引量：3
- 2018年
- 目的:机械通气作为一重要措施,拯救呼吸衰竭患者的生命,有致肺血管炎症及渗透增加等病变的可能,即VILI。本研究旨在明确VILI是否受潮气量、Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)基因敲除及核因子-E2相关受体2/血红素氧化酶-1(Nuclear factor-erythroid 2 related factor2/heme oxygenase 1,Nrf2/HO-1)表达的激活关联是否存在。方法:TLR4基因缺失和野生型(WT)小鼠分别分为对照(CON),低潮气量(low tidal volume,LTV)和高潮气量(high tidal volume,HTV)组。给小鼠禁食、禁水12小时后,麻醉小鼠,做气管切开,将气管导管经口插入,通气4小时,呼气末正压(PEEP)2 cm H2O,R:100次/分钟,吸呼比1:2;CON组仅气管插管。小鼠处死,测湿/干重比(W/D)。肺组织依次:HE染色组织学评价;评价肺损伤评分;测定肺炎症因子表达:肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β);免疫组化及免疫印迹法,测Nrf2蛋白值;测HO-1蛋白值。结果:在WT+HTV组,Nrf2和HO-1的表达比较WT+LTV组明显升高,但受到TLR4基因敲除的调节,相应的TLR4基因敲除组升高更明显。肺损伤评分、湿/干比在WT+HTV组增加,相应的TLR4基因敲除组升高更显著。结论:HTV通气可致小鼠VILI。VILI小鼠肺中的Nrf2/HO-1表达升高,TLR4基因缺失可以升高Nrf2/HO-1表达,保护肺组织,减轻VILI。
- 李艳艳潘频华苏晓丽胡成平刘帅李海涛黎皓思李毅戴敏慧毛志李千
- 关键词：血红素氧化酶-1
- 乙型肝炎病毒X蛋白对细胞因子信号转导抑制分子-1 CpG岛基因甲基化及其表达的影响
- 2013年
- 目的观察HBVX蛋白（HBx）对人源性非肿瘤性肝细胞株QSG7701细胞中细胞因子信号转导抑制分子-1（SOCS-1）表达的影响，并通过研究SOCS-1基因启动子区CpG岛甲基化的情况以探讨HBx影响SOCS-1表达的可能机制。方法本研究室前期构建好的重组表达质粒pcDNA—X及空载体pcDNA3．0分别转染QSG7701细胞，经含G418的选择性培养基筛选获得稳定转染HBV—X基因的细胞克隆（pcDNA—X／QSG7701）及稳定转染空载体pcDNA3．0的细胞克隆（pcDNA3．0／QSG7701）。实时逆转录PCR、Westernblot分别检测3种细胞SOCS-ImRNA和蛋白的相对表达情况。甲基化特异性PCR检测三种细胞SOCS一1基因启动子甲基化状态。结果实时逆转录PCR结果显示pcDNA-X／QSG7701中SOCS-1mRNA相对表达水平为0．3249±0．0536，明显低于pcDNA3．0／QSG7701的1．0543±0．1937和未转染的细胞QSG7701mRNA相对表达水平（设为1．0），三组比较，F=19．6，尸〈0．05，差异有统计学意义。Westernblot检测结果显示pcDNA-X／QSG7701中SOCS-1蛋白相对表达水平为0．1496±0．0106，明显低于pcDNA3．0／QSG7701的0．1984±0．0438及未转染的细胞QSG7701的0．2152±0．0816，三组比较，F=19．4，P〈0．05，差异有统计学意义。甲基化特异性PCR结果显示仅在pcDNA—X／QSG7701细胞株存在SOCS-1启动子区域的甲基化。结论HBx可下调SOCS-1的表达，使SOCS一1基因启动子CpG岛发生甲基化，这可能是HBx蛋白致肝细胞癌变的机制之一。
- 宋晓玲刘国珍谭德明李艳艳
- 关键词：肝炎病毒乙型DNA甲基化
