王利宏
- 作品数：99 被引量：229H指数：7
- 供职机构：浙江省人民医院更多>>
- 发文基金：浙江省医药卫生科学研究基金浙江省中医药科技计划项目浙江省科技厅基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学机械工程更多>>
- 小鼠降钙素基因相关肽基因重组腺病毒载体的构建及其在心肌细胞的表达
- 2010年
- 目的:利用AdEasy腺病毒载体系统,构建小鼠降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因重组腺病毒载体,并验证其在心肌细胞中的表达。方法:采用RT-PCR方法扩增出含有小鼠CGRP全长cDNA的基因片段,并将其插入PUC57载体,经EcoRⅤ和SalⅠ双酶切,将小鼠CGRP基因亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV,形成重组质粒pShuttle-CMV-CGRP。经Pm eⅠ酶切线性化后,在大肠杆菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组产生重组腺病毒质粒AdEasy-pShuttle-CGRP。重组腺病毒质粒在XL-Gold细胞中扩增,经PacⅠ酶切线性化后,转染人胚肾293细胞进行重组腺病毒的包装,并经氯化铯纯化得到重组腺病毒AdEasy-pShuttle-CGRP。用纯化后的重组腺病毒转染原代培养的乳鼠心肌细胞,荧光显微镜下观察转染效果。通过尾静脉导入重组腺病毒7 d后,放免法测定心肌中CGRP的表达量。结果:测序证实PUC57-CGRP重组质粒中含有小鼠CGRP基因的cDNA;重组穿梭质粒pShuttle-CMV-CGRP经双酶切鉴定后可见约7.5 kb和423 bp片段;重组腺病毒质粒AdEasy-pShuttle-CGRP经PacⅠ酶切可见长约3kb与30 kb DNA片断。转染293细胞进行包装,7 d后细胞出现病变效应,回收病毒重复感染293细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达。提取病变293细胞中重组腺病毒进行目的基因的PCR鉴定为阳性。构建好的重组腺病毒经纯化后具有很高的滴度,并且成功转染了原代培养的乳鼠心肌细胞。通过放免法证实,该载体可以显著增加小鼠心脏中CGRP的表达。结论:成功构建携带CGRP基因的重组腺病毒载体,该重组腺病毒载体AV-CGRP可以显著增加心脏中CGRP的表达量,为进一步研究CGRP基因治疗奠定了基础。
- 孙智慧韩杰邵蕾王利宏宋俊贤魏钟海郑良荣
- 关键词：降钙素基因相关肽基因疗法
- 高血压患者24h动态血压昼夜节律与左心室肥厚和心肌缺血及心律失常的关系被引量：31
- 2017年
- 目的观察高血压患者24h动态血压昼夜节律与左心室肥厚(LVH)和心肌缺血及心律失常的关系。方法入选高血压患者296例为观察对象,均行24h动态血压监测(ABPM),根据夜间血压下降率进一步分为4个亚组:杓型组(10%~20%,n=106)、非杓型组(0%~<10%,n=95)、超杓型组(>20%,n=53)和反杓型组(<0%,n=42)。观察和比较各亚组间LVH指标水平、LVH和心肌缺血及心律失常发生率的差异。结果高血压各亚组间年龄、性别比例、体质量指数(BMI)、空腹血糖、血脂、高血压病程和降压药及他汀类药物使用情况的差异无统计学意义(均P>0.05)。高血压各亚组中非杓型组、超杓型组和反杓型组的左心室舒张末期内径(LVEDD)、室间隔厚度(IVST)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室质量指数(LVMI)水平和LVH检出率高于杓型者组,超杓型组和反杓型组又高于非杓型组(均P<0.05),但超杓型组和反杓型组间的差异无统计学意义(P>0.05)。高血压各亚组心肌缺血(χ2=63.88,P<0.01)和心律失常(χ2=21.80,P<0.01)的检出率差异有统计学意义(均P<0.05),高血压各亚组中非杓型组、超杓型组和反杓型组的心肌缺血和心律失常检出率高于杓型组,超杓型组和反杓型组又高于非杓型组,但超杓型组和反杓型组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论高血压患者24h动态血压昼夜节律减弱或消失者伴有更严重的LVH,心肌缺血和心律失常发生率更高。
- 汤春光王利宏
- 关键词：血压昼夜节律左心室肥厚心律失常
- 环肺静脉线性消融治疗心房颤动疗效的初步观察
- 目的:探讨三维标测系统指导下环肺静脉线性消融治疗心房颤动(房颤)的疗效。方法:2005年2 月至2006年10月间对连续52例房颤患者进行三维标测系统(CARTO 系统)指导下的环肺静脉线性消融,消融的主要终点为肺静脉电...
- 郑良荣夏淑东王利宏
- 文献传递
- 射频消融治疗起源于主动脉无冠窦旁的房性心动过速
- ＜正＞射频消融已经成为房性心动过速（房速）的常规治疗手段。房速的起源点主要集中于界嵴部,三尖瓣及二尖瓣环周围,肺静脉内,冠状静脉窦口及希氏旁区。【1-5】而随着射频消融治疗的广泛开展和射频消融技术设备的不断进步,一些罕见...
- 陈瑶陶谦民郑良荣夏淑东连苗军王利宏王兴祥
- 文献传递
- TRPV1在小鼠肠系膜动脉周围神经刺激引起血管舒张中的作用
- 背景血管周围感觉神经上表达的TRPV1(the transient receptor potential vanilloid type 1)受体在调节血管反应上的作用还不清楚。本研究目的为探讨TRPV1受体在电刺激血管周...
- 王利宏朱建华郑良荣胡申江陈君柱Donna H．Wang
- 文献传递
- 射频消融治疗起源于主动脉无冠窦旁的房性心动过速被引量：5
- 2008年
- 射频消融已经成为房性心动过速（房速）的常规治疗手段。房速的起源点主要集中于界嵴部、三尖瓣及二尖瓣环周围、肺静脉内、冠状静脉窦口及希氏束旁区。而随着射频消融治疗的广泛开展和射频消融技术设备的不断进步，一些罕见的起源于特殊部位的房速也逐渐被人们所认识。但由于这类房速发生率低，临床资料有限，目前对其临床特征及电生理特点尚缺乏全面的认识。现将我中心自开展房速射频消融以来发现的3例起源于无冠窦旁的房速患者的临床特征及消融过程报道如下。
- 陈瑶陶谦民郑良荣夏淑东连苗军王利宏王兴祥
- 关键词：射频消融治疗房性心动过速主动脉冠状静脉窦口电生理特点二尖瓣环
- 射频消融对循环活化血小板的影响及噻氯匹定的作用被引量：1
- 2005年
- 陈国锋陈君柱郑良荣陶谦明王利宏
- 关键词：活化血小板噻氯匹定射频消融血栓栓塞并发症纤维蛋白原受体血小板激活
- 心腔内超声——介入医师的好帮手
- 自1956年Cieszynski等人研究出单晶片心腔内超声导管并获取动物试验心脏软组织超声信号以来,心腔内超声心动图(intracadiac echocardio-graphy,ICE)技术获得了稳步发展。至上世纪九十年...
- 郑良荣王利宏
- 文献传递
- 急性心力衰竭患者再住院危险因素分析被引量：2
- 2021年
- 目的分析急性心力衰竭(AHF)患者再住院危险因素。方法选取浙江省人民医院2019年1月至2020年1月收治的AHF患者189例,根据入院次数分为单次住院组116例、再住院组73例,比较两组患者临床资料,采用多因素logistic回归分析AHF患者再住院的影响因素。结果AHF患者再住院率为38.6%,再住院原因均为AHF发作。再住院组1年内死亡率明显高于单次住院组(P<0.05)。再住院组患者收缩压、舒张压、心率及血清D-二聚体水平均明显低于单次住院组(均P<0.05),院外规律复诊用药比例、合并糖尿病比例、抗血小板治疗比例、抗凝治疗比例、口服降糖药物比例、使用β受体阻滞剂比例、使用血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂比例、使用利尿剂比例、使用钙离子通道阻滞剂比例及血清肌钙蛋白I、低密度脂蛋白、同型半胱氨酸水平均明显高于单次住院组(均P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,抗血小板治疗、抗凝治疗以及使用利尿剂、钙离子通道阻滞剂是影响AHF患者再住院的独立危险因素(OR=13.08、5.08、230.81、11.11,均P<0.05)。结论再住院的AHF患者死亡风险增加,对于抗血小板治疗、抗凝治疗以及使用利尿剂、钙离子通道阻滞剂的初次住院患者,应高度警惕再住院可能。
- 吴飞王利宏
- 关键词：急性心力衰竭再住院
- 生命网健康教育对高胆固醇血症患者生存质量的评价被引量：1
- 2001年
- 目的 评价健康教育加辛伐他汀治疗对高胆固醇血症患者血脂水平和生存质量的影响。方法 应用ＳＦ－３６生存质量量表对６１例参加６个月生命同健康教育和辛伐他汀治疗的高胆固醇血症患者进行自身前后对照研究。结果 辛伐他河治疗６周、３月、６月后降低ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ的能力分别是１４．４％、１９．０％、２０．３％和２１．０％、２８．５％、２９．２％；提高ＨＤＬ－Ｃ的能力分别是９．６％、１０．７％、７．４％；降低ＴＧ的能力分别是２３．９％、２６．７％、２６，７％。按辛伐他汀降低ＴＣ分析，有效率分别为６７．２％、７７．１％和８６．９％。除了生理功能及疼痛感外，有关生理、心理、社会功能的７大项指标均有提高，差异有显著意义（Ｐ＜０．０５～＜０．００１）。结论 健康教育加辛伐他汀治疗高胆固醇血症患者，能有效地降低血胆固醇、提高患者的生存质量。
- 姚雪艳陈君柱朱建华王利宏胡晓晟
- 关键词：健康教育高胆固醇血症辛伐他汀
