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仿刺参EGFR基因的克隆与表达分析被引量：8: 2012年; 表皮生长因子受体(EGFR)是多种细胞因子的受体,在细胞增殖、迁移及分化中具有重要的作用。应用RACE法首次从仿刺参体腔细胞中克隆出EGFR基因的全长cDNA序列。该cDNA全长3 826 bp,包括821 bp的5'-UTR,281 bp的3'-UTR,开放阅读框2 724 bp,编码907个氨基酸。推导的氨基酸序列55-184aa和365-487aa符合EGFR基因所具有的L1和L2受体结构域,在203-344aa和503-823aa含有EGFR家族特征区域CR1和CR2半胱氨酸富集区,并同为跨膜糖蛋白,在结构上具有一致性。经BlastP与GenBank已知物种氨基酸序列进行同源性比对,仿刺参EGFR基因氨基酸序列与果蝇EGFR相似性为49%,同源性为34%,与斑马鱼EGFR相似性为47%,同源性为34%,与淡水椎实螺EGFR相似性为49%,同源性为31%。据此推断,仿刺参EGFR基因属于EGFR家族成员。利用Real-time PCR技术检测了该基因在仿刺参各组织中的表达,结果显示在肠、呼吸树、表皮、体腔细胞、纵肌中EGFR均有表达,且体腔细胞和表皮表达量较高。结果表明,该基因可能在仿刺参组织发育和再生过程中起到重要的调控作用。; 李霞王雪秦艳杰刘洋周一兵; 关键词：仿刺参表皮生长因子受体基因克隆

不同脂肪水平的虾青素饲料对红白锦鲤的影响: 锦鲤因其体色艳丽多彩而受人喜爱，因此提高观赏鱼体色越来越多的被人重视，添加虾青素可以提高鱼体体色的鲜艳程度，但是虾青素价格昂贵，使生产成本大幅度升高，本研究通过在饲料中添加适量脂肪水平，以提高虾青素的利用率，从而提高其观...; 崔培姜志强周小龙于丽娜何正荣王雪

饥饿对中间球海胆MYP基因转录表达的影响被引量：1: 2012年; 应用实时定量PCR技术对主要卵黄蛋白(Major yolk protein,MYP)基因在不同饥饿时期中间球海胆的体腔细胞、性腺、肠、胃中的转录表达差异进行了分析。结果表明,在正常状态下,MYP基因在体腔细胞、性腺、肠、胃等不同组织中的转录表达差异明显,肠中的表达量最高,其他组织中的表达量均较低。随饥饿时间的延长,MYP基因在体腔细胞中的表达量先迅速下降,而后稳定在较低水平,实验结束时下降至对照组的1.58%;在性腺中的表达量持续上升,实验结束时上升至对照组的679.75%;在肠中的表达量持续下降,实验结束时下降至对照组的33.33%;在胃中的表达量呈上升趋势,实验结束时上升至对照组的106.52倍。综合来看,饥饿状况下,中间球海胆肠中的MYP表达量持续下降,但仍是MYP的主要合成部位;性腺中MYP表达量持续上升,致使其MYP表达比重上升;胃、体腔细胞中表达量在饥饿过程中虽有变化,但总表达量很少,对MYP的整体表达影响不大。; 秦艳杰孙博林李霞王雪金迪; 关键词：中间球海胆饥饿转录表达

仿刺参体壁总RNA提取方法: 本发明公开一种提取纯度高、完整性好、得率高的仿刺参体壁总RNA的方法，具体方法是取仿刺参体壁组织至液氮中速冻；将速冻的组织研磨后置入裂解液中匀浆、离心，取上清；向上清中加入氯仿，再离心取上清至另一离心管中；再加入高盐溶液...; 李霞秦艳杰王雪陈秋实郑柯; 文献传递

饥饿和再投喂对中间球海胆MYP基因转录表达的影响: 海胆的主要卵黄蛋白（Maior yolk,protein,MYP）是海胆性腺中储存的主要蛋白。本研究采用实时定量PCR的方法研究了中间球海胆（Strongylocentrotus intermedius）不同组织MYP的...; 孙博林秦艳杰李霞王雪; 关键词：饥饿再投喂中间球海胆; 文献传递

刺参体壁创伤修复消减文库的构建与分析: 应用抑制性消减杂交技术(SSH)构建了刺参(Apostichopus japonicus Skelenka)正常及创伤修复期的体壁消减cDNA文库,发现292个阳性克隆,克隆测序得到208个有效ESTs序列.经BLAST...; 秦艳杰李霞张慧敏王雪; 关键词：刺参体壁抑制性消减杂交 CDNA文库

仿刺参体壁创伤修复消减文库的构建与分析被引量：2: 2013年; 应用抑制性消减杂交技术(SSH),构建了仿刺参Apostichopus japonicus(体质量为65～90 g)正常体壁及创伤修复(24、48、72、96、120 h后)体壁的消减cDNA文库,利用PCR和斑点杂交技术对文库进行筛选,随机挑取的768个克隆中发现292个阳性克隆,对其中信号强度较强的224个阳性克隆进行测序,得到208个有效EST序列。经BlastX工具对获得的EST与GenBank数据库进行比对分析,结果有171个EST序列与数据库中的基因同源(e≤0.001,相似性>40%),其中153个为未知基因,18个为已知功能或已命名基因,包括在创伤及修复的体壁中上调表达的β微管蛋白、微管蛋白α-1链、肌动蛋白、肌动蛋白ike 7B类似物、细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ、tRNA假尿苷合成酶A、GTP酶、细胞分裂周期2类似蛋白、有丝分裂原活化蛋白激酶、homeobox蛋白、延伸因子1A、核糖体蛋白L30、核糖体蛋白L17、60S酸性核糖体蛋白P0、26S蛋白酶调节亚基、泛素特异性肽酶24、大肠癌血清抗原3、清道夫受体蛋白12等。本研究结果可为探讨刺参体壁再生过程和分子机理,以及筛选刺参体壁创伤修复过程中相关功能基因的研究提供基础依据。; 秦艳杰李霞张慧敏王雪; 关键词：刺参体壁抑制性消减杂交 CDNA文库

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王雪