田辉凯
- 作品数：21 被引量：121H指数：6
- 供职机构：北京大学基础医学院药理学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 非洲爪蟾卵无细胞凋亡体系的建立被引量：1
- 2003年
- 目的 建立一种简便、高效的无细胞凋亡体系 ,探讨外源细胞核在其中的凋亡过程及z VAD fmk对其的抑制作用。方法 超速离心制备非洲爪蟾卵无细胞体系 ,用细胞色素C激活为凋亡体系。应用荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、ApoAlertCaspase 3ColorimetricAssay等方法检测外源细胞核在无细胞凋亡体系中的凋亡过程及z VAD fmk的抑制作用。结果 制备的爪蟾卵无细胞体系可由细胞色素C激活为凋亡体系 ,外源加入的细胞核呈现典型的形态学变化 ,总DNA特异降解形成DNAladder。体系内内源特异核酸酶被激活。z VAD fmk可抑制DNAladder的形成。凋亡特异蛋白酶XCPP32活性明显升高。结论 本实验建立的无细胞凋亡体系可以高效的诱导外源细胞核凋亡 ,重现体内过程。
- 田辉凯张红梅姚小皓李学军
- 关键词：细胞凋亡非洲爪蟾卵细胞色素CZ-VAD-FMK
- 反相高效液相色谱法测定洛伐他汀的血浆药物浓度被引量：11
- 1998年
- 采用反相高效液相色谱法测定血浆中洛伐他汀浓度，色谱柱采用Ｎｏｖａ－ＰａｋＣ１８柱（４μｍ，３９ｍｍ×１５０ｍｍ），柱温控制在５０℃，流动相为乙腈—磷酸铵缓冲液（００５ｍｏｌ／ｍＬ，ｐＨ３７）（４８∶５５，Ｖ／Ｖ），检测波长为２３８ｎｍ，血浆样品应用ＳＰＥ固相小柱萃取。方法的线性范围为５～５００ｎｇ／ｍＬ，最低检测浓度为５ｎｇ／ｍＬ，１０、１００、５００ｎｇ／ｍＬ３种浓度的平均回收率为（９２４３±７１８）％，日内、日间ＲＳＤ均小于８％。
- 孙考祥吴琳华胡君茹黄海燕田辉凯樊宏伟
- 关键词：高效液相色谱法洛伐他汀血药浓度
- 环孢素A在健康人体内的药物动力学被引量：2
- 1999年
- 目的:测定环孢素A(CsA)在健康人体的药物动力学参数.方法:10名健康志愿者单剂量po CsA 150mg后,固相萃取HPLC法测定其血药浓度,所得数据采用3P87程序拟合,求出有关药物动力学参数.结果:C_(max)=(815.35±210.72)ng/ml,t_(max)=(1.36±0.25)h,T_(1/2a)=(0.98±0.20)h,T_(1/2p)=(6·82±1.30)h.结论:CsA在健康人体内呈二房室开放模型分布,药物动力学参数个体差异大.
- 田辉凯徐凯建吴琳华孙考祥徐颖
- 关键词：环孢素AHPLC药物动力学
- 非细胞体系在细胞凋亡中的应用被引量：1
- 2003年
- 随着科学技术的进步和发展 ,对细胞凋亡的研究也涌现出许多新的方法和技术 ,为凋亡的研究提供了有力的武器。本文阐述了非细胞体系用于细胞凋亡研究的优越性 ,着重介绍非细胞凋亡体系的种类以及在细胞凋亡研究中的应用 ,同时总结了非细胞体系研究凋亡过程的各种检测方法。
- 田辉凯姚小皓李学军
- 关键词：非细胞体系细胞凋亡
- 绿谷灵芝对人脐静脉内皮细胞ICAM-1和VCAM-1表达的影响被引量：11
- 2002年
- 目的 采用血清药理学的方法研究绿谷灵芝含药血清对氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)和糖化白蛋白诱导的内皮细胞表面血管细胞粘附分子 (VCAM 1)和细胞间粘附分子 (ICAM 1)表达的影响。方法 通过细胞ELISA和流式细胞仪技术检测细胞表面VCAM 1和ICAM 1表达的变化。结果 细胞ELISA结果显示 0 2 4 g·kg-1、0 72 g·kg-1绿谷灵芝连续灌胃给药 10d后取血分离得到的血清可降低糖化白蛋白诱导的内皮细胞表面VCAM 1和ICAM 1表达 (P <0 0 5 ) ,降低ox LDL诱导的ICAM 1表达 (P <0 0 5 ) ;流式细胞技术检测结果显示 0 72 g·kg-1绿谷灵芝含药血清可降低ox LDL和糖化白蛋白诱导的内皮细胞表面ICAM 1表达(P <0 0 5 ) ,0 12 g·kg-1绿谷灵芝含药血清和无药血清对内皮细胞表面粘附分子的表达无影响。结论 绿谷灵芝含药血清可降低糖化白蛋白和ox
- 张红梅田辉凯姚小皓林志彬李学军
- 关键词：人脐静脉内皮细胞ICAM-1VCAM-1
- 非洲爪蟾卵非细胞凋亡体系的建立、应用及人重组TFAR19蛋白体外促凋亡机制的研究
- 该文首先成功制备来源于非洲爪蟾卵的非细胞凋亡体系,并对该体系凋亡过程进行了功能蛋白组学分析,同时拓展其应用范围,将它作为一种分子水平药物筛选的平台对来源于不同的药物对进行了初步的筛选,结果发现人重组TFAR19蛋白（rh...
- 田辉凯
- 关键词：非细胞体系细胞凋亡TFAR19功能蛋白质组学
- 布洛芬缓释胶囊的体内血药浓度及体外溶出度的相关性研究被引量：6
- 2001年
- 目的 测定布洛芬缓释胶囊中布洛芬的血药浓度 ,通过布洛芬缓释胶囊的体外溶出度实验 ,利用统计学方法研究其体内外参数的相关性、并提供质控方法。方法 采用高效液相色谱法测定血药浓度。溶出度采用中国药典 1995年版二部附录XC第一法测定 ,用美国HansonResearch生产的全自动溶出度测定仪操作。结果 布洛芬体外溶出度累积百分率与体内吸收百分率建立一元线性回归方程 :F=6 .2 2 0 5x +1.0 90 1(r=0 .975 5 ) ,线性范围 4.6～ 2 4.6 μg·mL-1。
- 吴琳华付红焱刘红梅孙考祥田辉凯
- 关键词：布洛芬缓释胶囊血药浓度体外溶出度
- 绿谷灵芝抑制低密度脂蛋白的氧化及单核细胞对内皮细胞的粘附作用被引量：5
- 2002年
- 目的:采用血清药理学方法研究绿谷灵芝对低密度脂蛋白（LDL）氧化作用的影响,以及对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）和晚期糖基化终末产物（AGE）诱导的单核细胞内皮细胞粘附作用的影响。方法:通过检测培养上清中硫代巴比妥酸反应物质（TBARS）的生成表示含药血清对LDL的氧化作用,用白细胞髓过氧化物酶法测定单核细胞对内皮细胞的粘附作用。结果:0.12g/kg绿谷灵芝一次给药组0.5h、1h、2h、3h,两次给药0.5h、1h取血分离得到的血清对LDL氧化作用无明显影响,两次给药2h、3h以及0.12g/kg、0.24g/kg、0.72g/kg绿谷灵芝连续给药10天后,取血分离得到的血清均可降低LDL的氧化作用（P<0.05）;0.24g/kg、0.72g/kg绿谷灵芝连续给药10天后,取血分离得到的血清均可抑制由ox-LDL和AGE诱导的单核细胞对内皮细胞的粘附作用（P<0.05）。结论:绿谷灵芝含药血清能显著降低LDL的氧化作用,减轻由ox-LDL和AGE诱导的单核细胞对内皮细胞的粘附作用。
- 张红梅田辉凯林志彬李学军姚伟娟
- 关键词：血清药理学低密度脂蛋白晚期糖基化终末产物单核细胞细胞粘附作用
- 喉咽清制剂的体外抑病毒作用的实验研究被引量：4
- 2002年
- 吴琳华樊宏伟孙考祥田辉凯李英斌
- 关键词：中药
- 非洲爪蟾卵非细胞翻译体系的建立及应用被引量：1
- 2003年
- 目的 当前人类基因组研究的重心正在由“结构”向“功能”转移。而基因功能的研究离不开基因的表达 ,这就迫切需要一种操作简便 ,适用范围广的表达工具来表达有功能的蛋白质。方法 非洲爪蟾注射HCG催卵 ,2 %半胱氨酸去胶膜 ,高速离心制备卵提取物 ,即为非洲爪蟾卵非细胞翻译体系。通过亚克隆技术将TFAR1 9基因克隆到体外转录质粒中 ,通过酶切线性化模板 ,体外转录 ,加帽合成cRNA ,将其加入到制备的蛙卵提取物中进行体外翻译。结果 用Westernblot鉴定 ,获得了高效翻译 ,并且加入亚精胺和ATP再生系统可以提高翻译的效率。
- 田辉凯姚小皓马兵张红梅李学军
- 关键词：细胞凋亡TFAR19非洲爪蟾卵母细胞
