秦瑾
- 作品数：22 被引量：59H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省科技攻关计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 炎症与动脉粥样硬化被引量：12
- 2003年
- 动脉粥样硬化是一种炎症性疾病。低密度脂蛋白异常、高血压、感染、糖尿病、肥胖等均可触发炎症反应 ,最终导致动脉粥样硬化。有关基因调控方面的研究进一步证实了动脉粥样硬化不是单纯的由于脂质沉积所致 ,炎症反应贯穿于动脉粥样硬化的全过程。本文就动脉粥样硬化中炎症反应的触发机制和基因调控进行综述。
- 秦瑾
- 关键词：动脉粥样硬化炎症反应高血压糖尿病触发机制
- ICAP1α及突变体T38A、I138A在内皮细胞ECV304整合素β1内化中的作用
- 2009年
- 目的:探讨ICAP1α及突变体T38A、I138A在内皮细胞ECV304内化整合素β1中的作用和机制。方法:构建pAAV-ICAP1α及其突变体pAAV-T38A和pAAV-I138A真核表达载体,转染ECV304。ECV304分为ICAP1α组、T38A组、I138A组、绿色荧光蛋白(GFP)组和未转染组,用NHS-SS-Biotin标记整合素β1,并利用生物素-亲和素系统以及Westernblot检测整合素β1内化情况。结果:各组细胞转染的质粒均稳定表达;Westernblot检测ICAP1α组、T38A组、I138A组、GFP组、未转染组内化的整合素β1相对光密度值分别为1.07±0.04、0.68±0.06、0.70±0.02、0.87±0.06、0.88±0.04;与GFP组和未转染组比较,ICAP1α组整合素β1内化明显增多(P<0.05);与GFP组、未转染组和ICAP1α组比较,T38A组和I138A组整合素β1内化明显减少(P<0.05),GFP组与未转染组无差别(P>0.05)。结论:转染ICAP1α后内皮细胞ECV304表面整合素β1内化增加,而转染T38A和I138A后内皮细胞ECV304表面整合素β1内化减少;ICAP1α可能通过第38位的苏氨酸残基(38Tyr)和第138位的异亮氨酸残基(138Ile)调控整合素β1的内化。
- 程忠良秦瑾刘正湘林敬阳刘毓左后娟汪道文
- 关键词：整合素Β1突变体细胞黏附因子内化小分子蛋白质信号传递机制
- 整合素α3、α6在CD151促进HepG2细胞增殖、侵袭中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的观察CD151转染HepG2细胞后对细胞增殖,侵袭的影响及其与整合素的关系。方法用脂质体转染试剂,将质粒CD151及其突变体CD151-AAA转染HepG2细胞,观察转染后细胞增殖,侵袭的变化;免疫共沉淀法检测整合素的表达情况。结果 CD151-AAA突变体较CD151促细胞增殖力低,其侵袭力未见增强,且其免疫共沉淀未能检测到整合素的表达。结论 CD151促进HepG2细胞增殖,侵袭有赖于CD151-整合素α3/α6复合体的形成。
- 费宇杰左后娟秦瑾曾和松刘正湘
- 关键词：细胞增殖TRANSWELLCD151
- 脑膜炎奈瑟氏球菌感染中毒症1例
- 2008年
- 陶思汤多壮汤屹秦瑾孙汉英刘文励
- 关键词：脑膜炎奈瑟氏球菌中毒
- FRNK对人乳腺癌MDA-MB-435细胞迁移的抑制作用
- 2006年
- 背景与目的:粘着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK)的高表达或过度激活与肿瘤迁移密切相关。粘着斑相关非激酶(FAKrelatednon-kinase,FRNK)是FAK内源性抑制剂,通过与FAK竞争粘着斑结合位点抑制FAK活性。本研究旨在探讨FRNK对人乳腺癌细胞MDA-MB-435迁移的抑制作用及相关机制。方法:RT-PCR法克隆目的基因FRNK,构建pcDNA3.1-FRNK重组质粒;利用脂质体转染MDA-MB-435细胞,经G418筛选抗性单细胞克隆,通过Westernblot鉴定稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞并检测其与野生型MDA-MB-435细胞中基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase9,MMP-9)表达水平;采用体外划痕修复实验和Boyden趋化小室比较野生型和稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞的非定向及定向迁移运动能力。结果:成功构建真核表达重组质粒pcDNA3.1-FRNK,建立稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞。高表达FRNK的细胞较野生型MDA-MB-435细胞MMP-9蛋白表达降低73.1%。在划痕修复实验中,稳定高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞移行面积与空白面积之比为0.35±0.02,与野生型MDA-MB-435细胞(0.58±0.06)相比划痕修复能力明显减弱(P<0.05);在趋化小室实验中,高表达FRNK蛋白的MDA-MB-435细胞迁移数为65.15±8.56,仅为野生型MDA-MB-435细胞迁移数(97.86±5.44)的66.57%。结论:FRNK可抑制MDA-MB-435细胞迁移运动,该抑制作用与MDA-MB-435细胞中MMP-9表达下调有关。
- 秦瑾刘正湘
- 关键词：乳腺肿瘤细胞迁移基质金属蛋白酶-9
- OxLDL诱发大鼠血管内皮细胞凋亡模型的建立被引量：1
- 2003年
- 目的 建立OxLDL诱发大鼠血管内皮细胞凋亡的模型。方法 SD大鼠尾静脉注射非氧化的LDL ,2 4h后取主动脉血管内皮细胞铺片 ,采用光学显微镜和荧光显微镜进行形态学观察 ,TUNEL法染色计算凋亡细胞比例。结果 ( 1)静脉注射LDL组观察到明显的凋亡形态学改变 ,对照组未见凋亡内皮细胞 ;( 2 )静脉注射LDL ( 4mg/kg、 6mg/kg、8mg/kg)组凋亡细胞比例分别为 8 10 %、 18 92 %、 2 2 0 3 % ,三组间有非常显著性差异 (P <0 0 1)。结论 ( 1)尾静脉注射LDL后 2 4h可引起血管内皮细胞凋亡 ;( 2 )
- 秦瑾王丽刘正湘
- 关键词：OXLDL血管内皮细胞细胞凋亡细胞形态学
- 氯沙坦对LDL诱导大鼠在体血管内皮细胞凋亡的影响
- 2004年
- 目的 研究氯沙坦是否可抑制OxLDL诱导的血管内皮细胞凋亡。 方法应用大鼠模型,LDL体内诱导血管内皮细胞凋亡,氯沙坦进行干预,观察其对LDL诱导血管内皮细胞凋亡的影响。TUNEL法检测凋亡细胞。 结果 LDL组和正常对照组比较凋亡血管内皮细胞显著增加;氯沙坦组和LDL组比较凋亡细胞显著减少。 结论氯沙坦可抑制LDL诱导的血管内皮细胞凋亡。
- 王丽秦瑾刘正湘
- 关键词：氯沙坦LDL内皮细胞凋亡
- 突变型pAAV-CD151真核表达载体的构建与鉴定被引量：3
- 2009年
- 目的构建CD151两种突变体,为研究CD151的功能及CD151-整合素复合体的功能奠定基础。方法以pAAV-CD151质粒为模板,采用定点突变技术,构建整合素α3β1/α6β1结合缺陷QRD突变体(pAAV-CD151-QRD-AAA194-196突变体)和CD151囊泡运输基序缺陷的ARSA突变体(pAAV-CD151-YRSL-ARSA245-248突变体),并包装两种突变体的重组腺相关病毒。结果经过测序鉴定成功构建了CD151的QRD和ARSA突变体,亦成功包装了重组腺相关病毒,病毒滴度符合本实验要求。结论成功构建CD151两种突变体并包装成重组腺相关病毒,为进一步研究CD151的功能和作用机制奠定了基础。
- 林敬阳秦瑾刘正湘刘毓程忠良左后娟汪道文
- 关键词：CD151基因定点突变重组腺相关病毒
- CD151蛋白激活Rac/Cdc42通路并促进血管生成
- 2012年
- 目的研究CD151及其突变体CD151-AAA194-196对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖及激活Rac/cdc42通路的影响,探讨CD151促血管生成的机制。方法构建pAAV-CD151及其突变体pAAV-CD151-AAA194-196(整合素结合缺陷突变体),测序成功后分别转染入HUVEC。CCK-8法测定pAAV-CD151及其突变体pAAV-CD151-AAA194-196在HUVEC中增殖的能力,Western Blot方法检测CD151及突变体转染后CD151蛋白的表达及对激活Rac/Cdc42通路的影响。结果 pAAV-CD151组的CD151蛋白表达高于正常对照组、pAAV-GFP组,但pAAV-CD151组及pAAV-CD151-AAA194-196组之间CD151蛋白表达没有统计学意义(P>0.05)。CCK-8检测结果示:Control组、pAAV-GFP组、pAAV-CD151组、pAAV-CD151-AAA194-196组OD值分别为1.491±1.780、1.403±1.776、2.742±2.49和1.66±1.845。pAAV-CD151组较pAAV-GFP组和Control组细胞增殖能力明显增强(P<0.01),pAAV-CD151-AAA194-196组较pAAV-CD151组细胞增殖能力减弱(P<0.05)。此外,pAAV-CD151组中P-Rac/cdc42表达较pAAV-GFP组和正常对照组明显增加(P<0.01),pAAV-CD151-AAA194-196组较pAAV-CD151组P-Rac/cdc42表达降低(P<0.05)。结论 CD151通过与整合素形成功能性复合体机制促进Rac/Cdc42通路的激活,进而促进血管生成作用。上述机制可能为CD151促血管生成的重要机制。
- 彭丹左后娟秦瑾刘正湘汪道文张欣
- 关键词：CD151脐静脉内皮细胞血管生成整合素
- 血管内皮细胞研究方法—大鼠主动脉内皮铺片法的应用被引量：1
- 2010年
- 目的:通过改进血管内皮细胞铺片方法,建立一个可高质量显示血管内皮细胞形态结构并能进行功能研究的方法。方法:以大鼠主动脉内皮细胞为材料,对血管内皮细胞铺片法玻片包被、组织脱水及烤片等操作环节进行改进、简化,以提高铺片制备的质量。结果:经过改进后,血管内皮细胞铺片质量提高,可用于多种病理学方法的观察,背景干净,细胞形态清晰。结论:血管内皮细胞铺片法是一个可用于原位研究血管内皮细胞、评价血管功能的稳定且易于操作的方法。
- 王丽张望强段军仓秦瑾
- 关键词：血管内皮细胞
