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靶向PCSK9催化结构域的重组蛋白疫苗降胆固醇效果初步评价被引量：1: 2015年; PCSK9是机体内调节低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)代谢的重要蛋白之一,抑制PCSK9能够显著地降低血清LDL-C的水平。本研究的目的是构建靶向PCSK9的重组蛋白疫苗,为降低胆固醇疫苗药物的开发提供实验基础。本课题通过重叠PCR方法将白喉毒素跨膜结构和人PCSK9催化结构域基因串联,构建重组基因片段DTT-h PCSK9,在大肠杆菌中表达后经GST亲和纯化制备重组蛋白DTT-h PCSK9。用该蛋白免疫Balb/c小鼠后通过ELISA方法检测抗体应答水平,并测定小鼠体内胆固醇含量。结果显示,在小鼠体内DTT-h PCSK9引起了抗人PCSK9免疫反应,抗血清效价为1:10 000,并且该疫苗能够显著降低小鼠体内血清胆固醇含量(p<0.05)。; 陈凌程超仲从浩张丽陈磊李荣秀; 关键词：PCSK9 疫苗胆固醇

提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法: 一种生物检测技术领域的提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法。包括如下步骤：交联固化细胞质蛋白：首先用戊二醛溶液处理完整细胞，使细胞质蛋白相互交联形成致密固体，离心收集戊二醛交联固化细胞；用蛋白酶解反应溶液悬浮戊二醛交联...; 李荣秀徐泓马贵军邹琦程超; 文献传递

小鼠可溶性PD-1蛋白疫苗的设计及不同免疫方式的效果研究被引量：1: 2015年; PD-1是参与免疫抑制调节、肿瘤免疫逃逸的重要因子之一。通过抑制PD-1,可以提高T细胞的活性、细胞因子的分泌水平,从而提高抗肿瘤效果。本研究通过基因重组,构建了小鼠PD-1胞外结构域蛋白m PD-1和m PD-1与喉毒素跨膜结构域(DTT)融合的DTT-m PD-1蛋白。蛋白经大肠杆菌表达后,由镍柱亲和纯化。用蛋白疫苗免疫Balb/c小鼠后发现,DTT-m PD-1蛋白没有在小鼠体内产生抗PD-1的免疫反应。但是,先用DTT免疫三次(隔两周免疫一次),再用m PD-1免疫小鼠,反而引起了抗PD-1的免疫反应,血清效价高达7×104。这一发现,为肿瘤免疫治疗提供了一种全新的方式。; 吴佳雯程超蔺智兵陈磊李荣秀; 关键词：PD-1 白喉毒素融合蛋白免疫原性

人凝血因子IX的线性B细胞表位预测及鉴定: 2014年; 为预测并鉴定人凝血因子IX(FIX)的线性B细胞表位.通过IEDB数据库及Discovery Studio软件预测FIX的B表位和白喉毒素T结构域(DTT)的B表位,用所预测的FIX的B表位替换某预测的DTT的B表位形成DTT-表位融合蛋白.通过基因工程技术制备各重组蛋白,并免疫小鼠,通过ELISA和Western-blot检测抗血清效价和特异性,通过等温量热滴定技术(ITC)测定抗体的亲和力.预测到4个FIX的B表位.用重组蛋白FIX-2-DTT免疫的小鼠产生了识别完整FIX的抗体,该抗体具有良好的特异性,其结合常数KD为106 M-1.表明FIX-2(306 NAAINKY312)是FIX的B表位,用重组蛋白FIX-2-DTT免疫小鼠能够产生特异性识别FIX且亲和力温和的抗体.; 杜进陈磊仲从浩程超祝先潮李荣秀; 关键词：FIX

葡聚糖-精胺作为CpG ODN输送载体效果的初步探究被引量：1: 2016年; Cp G ODN可增强疫苗特异性免疫反应,但是它在动物体内易降解和吞噬率低的特性降低其作为免疫佐剂的效果。本研究尝试用葡聚糖-精胺(DSP)包裹Cp G ODN,保护其免受核酸酶降解,提高细胞吞噬率。所合成DSP包裹Cp G ODN形成DSP-Cp G ODN复合物,体外刺激脾脏淋巴细胞,ELISA法测量细胞培养上清中白介素12(IL-12)含量来分析复合物是否可更有效地激活免疫细胞。结果显示所合成DSP可完全包裹Cp G ODN形成有效粒径为500 nm的颗粒并降低核酸酶对Cp G ODN降解速率。在最佳包裹条件下DSP-Cp G ODN复合物所刺激的脾脏淋巴细胞IL-12分泌水平相比单独Cp G ODN组有15.5倍增加(p<0.001)。本研究表明DSP可望作为Cp G ODN输送载体,增强佐剂效果。; 陈磊仲从浩蔺智兵程超张丽李荣秀; 关键词：CPG ODN IL-12

蛋白A-葡聚糖-Fe3O4纳米磁珠的制备及对IgG分离纯化被引量：1: 2014年; 蛋白A(Staphylococcal Protein A,简称蛋白A或SPA)是对IgG有特异性吸附能力的生物配基,将其偶联到葡聚糖修饰的Fe3O4纳米磁珠上,研究SPA纳米磁珠对IgG的纯化能力。采用高温多元醇法合成不同粒径的纳米磁珠,研究磁珠粒径对IgG吸附量的影响,并对磁珠静态载量、吸附时间、可重复性进行研究,为工业化应用提供理论依据。通过控制反应体系中NaOH的浓度成功地合成了平均粒径从30 nm到200 nm的Fe3O4纳米磁珠,通过吸附量试验证明了磁珠粒径对IgG吸附量有较大影响,当磁珠平均粒径在101.5 nm时对IgG的吸附量最大,静态吸附载量为84.85 mg/mL,亲和常数为3.48×106 M-1。对磁珠进行5次循环再生试验后,磁珠的吸附性能没有明显的降低。利用磁珠能高效快速地从人血清中纯化到IgG,纯度达到93.5%(SDS-PAGE),回收率为88.7%。因此,这种磁性分离基质在IgG纯化中有较大的应用潜力,; 任敬钢程超仲从浩张丽张丽; 关键词：葡聚糖蛋白A

一种基于可逆左流形的闭环系统故障诊断方法及系统: 本发明涉及一种基于可逆左流形的闭环系统故障诊断方法及系统，该方法包括以下步骤：步骤1、根据可逆神经网络构建可逆左流形，参数化非线性闭环系统；步骤2、根据可逆神经网络构建非线性闭环控制系统的可逆残差生成器；步骤3、获取非线...; 陈宏田张卫东姜斌程超许水清郭东升史颂华柏林

提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法: 一种生物检测技术领域的提高膜蛋白检测率的膜蛋白多肽的制备方法。包括如下步骤：交联固化细胞质蛋白：首先用戊二醛溶液处理完整细胞，使细胞质蛋白相互交联形成致密固体，离心收集戊二醛交联固化细胞；用蛋白酶解反应溶液悬浮戊二醛交联...; 李荣秀徐泓马贵军邹琦程超

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程超