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葡聚糖-精胺作为CpG ODN输送载体效果的初步探究被引量：1: 2016年; Cp G ODN可增强疫苗特异性免疫反应,但是它在动物体内易降解和吞噬率低的特性降低其作为免疫佐剂的效果。本研究尝试用葡聚糖-精胺(DSP)包裹Cp G ODN,保护其免受核酸酶降解,提高细胞吞噬率。所合成DSP包裹Cp G ODN形成DSP-Cp G ODN复合物,体外刺激脾脏淋巴细胞,ELISA法测量细胞培养上清中白介素12(IL-12)含量来分析复合物是否可更有效地激活免疫细胞。结果显示所合成DSP可完全包裹Cp G ODN形成有效粒径为500 nm的颗粒并降低核酸酶对Cp G ODN降解速率。在最佳包裹条件下DSP-Cp G ODN复合物所刺激的脾脏淋巴细胞IL-12分泌水平相比单独Cp G ODN组有15.5倍增加(p<0.001)。本研究表明DSP可望作为Cp G ODN输送载体,增强佐剂效果。; 陈磊仲从浩蔺智兵程超张丽李荣秀; 关键词：CPG ODN IL-12

一种靶向MUC1及PD-1的双靶点蛋白疫苗设计及其体液免疫学分析被引量：2: 2016年; 机体内存在肿瘤免疫抑制是MUC1等肿瘤相关性抗原疫苗临床效果不佳的重要原因,我们认为减少免疫抑制将能够增强免疫应答。因此,我们以霍乱毒素B亚基为载体,设计了一种同时靶向小鼠MUC1（Muc1）VNTR区和小鼠程序性死亡受体（m PD-1）的融合蛋白疫苗并研究了其体液免疫学效果。通过插入突变的方法,将Muc1 VNTR序列插入CTB序列以替换其Q56~D59位氨基酸得到CTB-Muc1融合基因,进一步将m PD-1融合至CTB-Muc1的羧基端得到CTB-Muc1-m PD1融合基因,并经TG1大肠杆菌表达,亲和层析得到CTB-Muc1-m PD1的融合蛋白。融合蛋白辅以铝佐剂和Cp G ODN免疫BALB/C小鼠,并收集抗血清,以Elisa法检测抗体产生情况。结果表明：CTB-Muc1-m PD1重组蛋白能够打破小鼠自身免疫耐受,同时产生针对于Muc1和m PD-1的特异性抗体,此外,CTB-Muc1融合m PD-1后能够显著增强机体针对于Muc1的特异性免疫应答（p〈0.01）。这表明靶向抑制免疫环境抑制因子能够显著增强肿瘤相关性抗原的免疫应答。; 邱凌翀卢悟广蔺智兵蔡花漫李荣秀; 关键词：MUC1 PD-1 疫苗体液免疫

小鼠可溶性PD-1蛋白疫苗的设计及不同免疫方式的效果研究被引量：1: 2015年; PD-1是参与免疫抑制调节、肿瘤免疫逃逸的重要因子之一。通过抑制PD-1,可以提高T细胞的活性、细胞因子的分泌水平,从而提高抗肿瘤效果。本研究通过基因重组,构建了小鼠PD-1胞外结构域蛋白m PD-1和m PD-1与喉毒素跨膜结构域(DTT)融合的DTT-m PD-1蛋白。蛋白经大肠杆菌表达后,由镍柱亲和纯化。用蛋白疫苗免疫Balb/c小鼠后发现,DTT-m PD-1蛋白没有在小鼠体内产生抗PD-1的免疫反应。但是,先用DTT免疫三次(隔两周免疫一次),再用m PD-1免疫小鼠,反而引起了抗PD-1的免疫反应,血清效价高达7×104。这一发现,为肿瘤免疫治疗提供了一种全新的方式。; 吴佳雯程超蔺智兵陈磊李荣秀; 关键词：PD-1 白喉毒素融合蛋白免疫原性

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蔺智兵