管永军
- 作品数：10 被引量：92H指数：6
- 供职机构：北京工业大学生命科学与生物工程学院药物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HIV-1中和抗体2G12真核表达载体的构建及活性检测
- 2017年
- 目的 构建HIV-1中和抗体全基因共表达真核质粒载体,观察其在293T细胞中的表达并检测其活性.方法 合成HIV-1中和抗体2G12轻链可变区（VL）和重链可变区（VH）,与含人IgG轻、重链恒定区的载体分别连接,构建出完整的2G12轻链和重链的载体,通过PCR扩增与连接将2G12轻、重链全长构建到真核表达载体pVR中,同时将内部核糖体进入位点（Internal ribosome entry site,IRES）插入到此载体中构建双基因表达系统,重组质粒转染293T细胞进行瞬时表达,ELISA检测抗体表达效果,通过结合实验及中和实验检测细胞上清的结合活性和中和活性.结果 获得可表达人IgG的重组双基因真核表达载体,转染后上清的抗体表达量为6.43 μg/ml,并且抗体保留了原来的结合活性和中和活性.结论 所构建的载体可表达具有较好的结合活性和中和活性的抗体,本研究为真核表达载体表达人HIV中和抗体全基因方面提供了可选择的平台.
- 王晓菲贾润清周玉柏管永军曾毅
- 关键词：HIV中和抗体
- 四川省HIV-1流行毒株的基因序列测定和亚型分析被引量：32
- 1998年
- 使用PCR对 9份采集于 1996年中旬的四川省经血液途径感染的HIV - 1阳性感染者外周血单个核细胞 (PBMCs)样品进行扩增 ,获得HIV - 1膜蛋白 (env)基因的核酸片段 ,并对其C2-V3及邻区 350～ 4 50个核苷酸序列进行了测定和分析。结果表明 ,9份样品中存在B和C两种亚型的HIV - 1毒株序列 ,其中B亚型 5份 ,彼此间的基因离散率为 1.4 % ;C亚型 4份 ,在不包括sc3号样品的情况下彼此间的基因离散率为 2 .6% ,而sc3号样品与其它 3份样品在核苷酸序列上的差异却达 11.5%。与A～E参考亚型及部分B和C亚型代表株序列相比较 ,属四川B亚型的 5个毒株与包括泰国、缅甸及中国云南德宏在内的B亚型毒株序列十分接近 ,基因离散率在 3.6%～4 .3%的范围内 ;属四川C亚型的 4个毒株除sc3外则与代表印度毒株的C亚型共享序列及德宏C亚型毒株序列十分相似 ,其基因离散率均为 3.1% ,与非洲C亚型毒株nof的基因离散率为13.1% ,而sc3号序列与印度、中国德宏和非洲C亚型HIV - 1的基因离散率却在 10 .1%～ 17.2 %的范围内。提示 ,HIV - 1在四川的流行时间不长 ,且其B和除sc3之外的C亚型毒株的传入与流行在云南德宏州的相同亚型HIV - 1毒株密切相关 ,而由sc3所代表的C亚型毒株则存在目前还尚不了解的其它传入来源。
- 秦光明邵一鸣刘刚苏玲张灵麟管永军郑国英陈钧马义才赵全壁JosefKostlerHansWolf
- 关键词：基因变异艾滋病毒基因序列HIV-1
- 中国HIV-1流行毒株的DNA疫苗的初步研究被引量：6
- 2000年
- 为研制针对我国HIV 1流行毒株的艾滋病毒疫苗 ,构建了具有代表性的 gag和 gp12 0核酸疫苗 ,进行了初步的小鼠免疫实验。结果初步显示 :(1)免疫Balb/C小鼠可以产生HIV 1特异性的体液和细胞免疫 ;(2 ) gag和gp12 0基因联合免疫可以同时诱发针对 gag和 gp12 0的细胞和体液免疫反应 ,而且效果比各自单独免疫要好 ;(3)B亚型 gp12 0基因免疫可以诱发识别C亚型 gp12 0抗原的CTL反应。本文核酸疫苗研究的初步结果值得进一步系统地进行试验。
- 管永军朱跃科刘海鹰周玲曾毅
- 关键词：艾滋病毒核酸疫苗GAG基因
- 1995年云南瑞丽HIV1毒株的基因变异和分析被引量：40
- 1996年
- 从１９９５年瑞丽静脉注射毒品者及其配偶２６人的血样中，经ＰＣＲ扩增细胞内ＨＩＶ基因并对其ｅｎｖＣ２－Ｖ３区进行测序，结果发现１８人为Ｂ亚型ＨＩＶ１，８人为Ｃ亚型ＨＩＶ１毒株。在瑞丽以Ｂ亚型毒株为主，与我们以往报告一致。Ｃ亚型毒株的出现曾有报导，我们进一步分析发现，Ｃ亚型毒株感染者多在１９９４和１９９５年被感染。根据其核苷酸序列测定的基因离散率（２．２５％），远小于Ｂ型毒株（６．７％），也说明它是近两年才在瑞丽流行的。Ｃ亚型毒株感染者明显聚集于城周，而Ｂ亚型毒株感染者均匀分布，提示其传染源的定向性。对它的可能来源文中进行了讨论。
- 邵一鸣管永军赵全壁曾毅张家鹏张勇段一娟杨贵林
- 关键词：艾滋病毒毒株基因变异基因分析
- 云南省陇川县HIV-1流行毒株膜蛋白基因C2-V3区序列测定和分析被引量：6
- 1997年
- 使用ＰＣＲ对２１份采集于１９９５年中的云南陇川县ＨＩＶ－１阳性静脉吸毒者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）样品进行扩增，从１７份样品中获得了ＨＩＶ－１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，并对其Ｃ２－Ｖ３及邻区４５０个核苷酸序列进行了测定和分析。研究结果表明，１７份陇川样品中存在Ｂ和Ｃ两种亚型的ＨＩＶ－１毒株序列，各亚型内的基因离散率分别为４．７％和３．３％。与Ａ～Ｅ参考亚型及部分Ｂ和Ｃ亚型代表株序列相比较，属陇川Ｂ亚型的１４个毒株与包括泰国、缅甸及云南瑞丽在内的Ｂ亚型毒株序列十分接近，基因离散率在３．９％～４．５％的范围内；属陇川Ｃ亚型的３个毒株则与代表印度毒株的Ｃ亚型共享序列及瑞丽Ｃ亚型毒株序列十分相似，其基因离散率均为２．５％。以上数据提示，ＨＩＶ－１在陇川的流行时间不长，且Ｂ和Ｃ亚型毒株的传入时间相差１年左右。对Ｂ亚型毒株Ｖ３环序列的分析还发现，位于Ｖ３环顶端的四肽序列中ＧＰＧＱ占６４．３％，ＧＰＧＲ则仅占２８．６％，且编码其精氨酸（Ｒ）的密码子均为ＣＧＡ而不是ＡＧＡ。此结果与作者根据早期瑞丽ＨＩＶ－１毒株序列研究结果得出的推测相吻合。
- 陈钧管永军邵一鸣田春桥赵全壁赵全壁张家鹏张桂云JosefKostler张家鹏
- 关键词：HIV-1艾滋病病毒膜蛋白
- 我国云南省艾滋病病毒感染的长期不进展者人免疫缺陷病毒1型tat基因的序列分析被引量：5
- 1999年
- 目的人类免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）ｔａｔ基因是该病毒的调控基因之一。本研究是探讨ｔａｔ基因变异是否影响ＨＩＶ－１感染者的病程进展。方法从云南ＨＩＶ流行区的２２例ＨＩＶ感染后临床进程不同的人抽取外周血，提取核酸，用套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ＨＩＶ－１的ｔａｔ基因，并进行了核酸序列测定和分析。结果２２个ＨＩＶ毒株中，有１１株来自长期不进展者，均为Ｂ亚型。另外１１株来自一般感染者的ＨＩＶ毒株，５株为Ｂ亚型，６株为Ｃ亚型。长期不进展者和ＨＩＶ－１Ｂ亚型一般感染者的ｔａｔ基因序列与国际Ｂ亚型共享序列比较，两组均在相同的固定的４个位点上氨基酸与共享序列不一致。在系统树分析中两组亦聚集在一起，未显示出分离。Ｃ亚型一般感染者的ｔａｔ基因序例组内变异小，在固定的６个位点上与国际Ｃ亚型共享序列不一致。结论长期不进展者与一般Ｂ亚型感染者的Ｔａｔ蛋白序例均未发现规律性差异。ＨＩＶ感染后的进展速率可能与ＨＩＶ－１ｔａｔ基因序例无明显关系。
- 赵峰邵一鸣段一娟陈小萍赵全壁苏玲管永军曾毅
- 关键词：TAT基因B亚型C亚型
- 重组HIV-1腺病毒伴随病毒的构建及表达被引量：3
- 2000年
- 目的 构建带有HIV 1gag或 gp12 0基因的重组腺病毒伴随病毒AAV HIV gag或AAV HIVgp12 0。方法 共转染法获取重组AAV HIV ;免疫酶法检测病毒滴度。结果 测定制备的重组腺病毒伴随病毒AAVgag42 ,AAVgp42 ,AAVgpRj6 ,病毒滴度在 10 4～ 10 5 范围。结论 构建了带有 gag和gp12 0基因的重组AAV HIV ,可以感染真核细胞并有较高的表达 ,可以用于做靶细胞 ,为发展新型的HIV
- 管永军刘海鹰朱跃科周玲杜宾曾毅
- 关键词：HIV-1T淋巴细胞细胞毒性
- 云南瑞丽人免疫缺陷病毒感染者gp120基因C2-V3区的序列测定和亚型分析被引量：5
- 1997年
- 经套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）对１７份１９９５年初采集于云南瑞丽市人免疫缺陷病毒１型（ＨＩＶ－１）阳性静脉吸毒者外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）的核酸样品进行扩增，从１７份样品中获得了ＨＩＶ－１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，并对其Ｃ２－Ｖ３及邻区４５０个核苷酸序列进行了测定和分析。结果表明，１７份样品中存在Ｂ和Ｃ两种亚型的ＨＩＶ－１毒株序列，其亚型内的基因离散率分别为５８％和２２％，与Ａ－Ｅ参考亚型及部分Ｂ和Ｃ亚型代表株序列相比较，属Ｂ亚型的１２个毒株与包括泰国、缅甸及云南瑞丽代表株ｙｎ２８９在内的Ｂ亚型毒株序列十分接近，基因离散率在４４％～４９％的范围内；属Ｃ亚型的５个毒株则与主要代表印度Ｃ亚型毒株的共享序列ｃｃｏｎ及瑞丽Ｃ亚型代表毒株ｙｎ２７２十分相似，其基因离散率均为１９％。以上数据进一步确认我们的结论，即ＨＩＶ－１在瑞丽的流行以Ｂ亚型毒株为主、Ｃ亚型的传人和流行时间较短。对Ｂ亚型毒株Ｖ３环序列的分析还发现，位于Ｖ３环顶端的四肽序中ＧＰＧＱ占５０％，ＧＰＧＲ则仅占２５％，且编码其精氨酸（Ｒ）的密码子均为ＣＧＡ而不是ＡＧＡ。此结果与我们根据早期瑞丽ＨＩＶ－１毒株序列研究结果得出的推测?
- 管永军陈钧邵一鸣赵全壁曾毅曾毅段一娟张家鹏Hans Wolf
- 关键词：人免疫缺陷病毒基因转变
- 新疆乌鲁木齐HIV-1流行毒株膜蛋白基因C2-V3区序列测定和亚型分析被引量：15
- 1997年
- 应用ＰＣＲ方法对７份１９９６年３－５月采集于新疆乌鲁木齐ＨＩＶ－１阳性静脉吸毒者的外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）样品进行扩增，获得了ＨＩＶ－１膜蛋白（ｅｎｖ）基因的核酸片段，并对其Ｃ２－Ｖ３区及邻区３５０－４５０个核苷酸序列进行了测定和分析。研究结果表明，７份样品都为Ｃ亚型的ＨＩＶ－１毒株序列，其组内的基因离散率为１．０％；与Ａ－Ｅ参考亚型及部分Ｃ亚型代表株序列相比较，这７个毒株与代表印度Ｃ亚型毒株及云南德宏州Ｃ亚型毒株的序列十分相似，其组间的基因离散率均为３．５％，与非洲Ｃ亚型毒株ｎｏｆ的基因离散率为１４．０％。根据以上数据及其它资料提示，ＨＩＶ－１在新疆乌鲁木齐的流行时间不长，且其毒株的传入与流行在云南德宏州的相同亚型ＨＩＶ－１毒株密切相关。
- 白旭华管永军张远志邵一鸣王冬莉苏玲刘小良赵全壁杜大卫JosefKostlerHansWolf
- 关键词：亚型分析毒株膜蛋白基因
- 1995年云南瑞丽人免疫缺陷病毒的生物学特性被引量：6
- 1996年
- 1995年从云南省瑞丽市30名静脉注射毒品者(IDUs)及部分配偶中采血,分离外周血单个核细胞(PBMC),用共培养法分离人免疫缺陷病毒(HIV),以HIVⅠ-P24抗原酶联免疫吸附试验(ELISA)为检测终点,分离到10株HIV。其毒株的生物学特征为:复制能力弱,生长缓慢,滴度不高;不引起细胞融合。多数毒株只能在PBMC中生长,不能感染T细胞,只有1株(Cr269)可感染T细胞。已分离毒株的核苷酸序列显示其V3环为不致细胞融合型(NIS),与生物学观察结果一致。
- 赵全壁管永军段一娟杨映全曾毅邵一鸣
- 关键词：人免疫缺陷病毒病毒分离细胞融合
