苑博
- 作品数：1 被引量：27H指数：1
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- 缺氧/再复氧与脂多糖激活肠上皮细胞核转录因子-κB和低氧诱导因子-1α信号通路以及大黄素对其的干预作用被引量：27
- 2014年
- 目的 以缺氧/再复氧（H/R）和脂多糖（LPS）刺激人结肠上皮细胞株（FHC）模拟体内肠上皮细胞遭受缺血、缺血/再灌注和炎症打击的病理过程,探讨大黄素干预的可能作用靶点.方法 常氧组：在37 ℃下用95％空气和5％CO2培养.缺氧（H）组：于37℃下用1％O2、5％CO2和94％N2的混合厌氧气体使细胞缺氧1、2、3、4h.H＋LPS组：在H组基础上给予LPS 1 mg/L刺激.H/R组：于缺氧3h后分别复氧1、2、3、4h.H/R＋LPS组：在H/R基础上给予LPS 1 mg/L刺激.大黄素干预组：在H3 h/R2 h＋LPS基础上给予20、40、60、80 μmol/L大黄素进行干预.用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测磷酸化核转录因子-κB（NF-κB）抑制蛋白-α（pIκB-α）、磷酸化NF-κBp65（pNF-κBp65）、环氧化酶-2（COX-2）、低氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达.相差显微镜下观察各组肠上皮细胞的形态学改变;用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测大黄素对肠上皮细胞增殖情况的影响.结果 ①H组：pIκB-α、pNF-κBp65、COX-2表达量均于H1 h达峰值,分别为0.350±0.018、1.083±0.054、0.903±0.045,然后递减（F值分别为3.011、7.247、5.754,P值分别为0.013、0.000、0.005）;HIF-1α在H3 h表达最高（1.511±0.076）,但各时间点间比较无差异（F=1.881,P=0.062）.H＋LPS组：pIκB-α、pNF-κBp65、COX-2、HIF-1α表达量均随缺氧时间延长而增加,H3 h达峰值,分别为0.504±0.025、1.255±0.063、0.812±0.041、1.209±0.075（F值分别为2.683、8.774、9.765、2.432,P值分别为0.011、0.000、0.000、0.026）.H/R组：随着再复氧时间延长,pIκB-α、pNF-κBp65、COX-2表达递减,于H3 h/R4 h降至最低,分别为0.712±0.034、1.202±0.048、0.691±0.042（F值分别为1.923、6.765、2.719,P值分别为0.063、0.000、0.016）;与H组相比,H/R组HIF-1α在再复氧过程中表达明显减少,但各时间点间无差异（F=1.280,P=0.081）.H/R＋LPS组：随着再复氧时间延长,pIκB-α、pNF-κBp65、COX
- 祁蕾苑博傅强
- 关键词：脂多糖低氧诱导因子-1Α肠上皮细胞环氧化酶-2核转录因子-ΚB大黄素
