邓志琼
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 供职机构：深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 德国小蠊精氨酸激酶基因的克隆、表达及免疫活性测定被引量：5
- 2011年
- 目的克隆德国小蠊精氨酸激酶(arginine kinase,AK)全长基因,表达、纯化重组AK蛋白,并研究蛋白的免疫反应性。方法提取德国小蠊总RNA,反转录为cDNA,设计特异性引物,PCR克隆德国小蠊AK片段,将测序正确的目的片段克隆至原核表达载体pET-28a中,在大肠埃希菌(E.coli)BL21(DE3)中用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过镍离子亲和层析纯化目的蛋白。用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测目的蛋白表达和纯化结果,用蛋白质印迹(Western blotting)分析重组AK蛋白的免疫反应性。结果德国小蠊AK基因开放阅读框全长为1071bp,编码356个氨基酸,GenBank登录号为FJ514482。与GenBank中已登录的德国小蠊序列(登录号为EU429466)比对,同源性达97.2%。重组质粒pET-28a-AK在E.coli BL21(DE3)中获得高效表达,重组蛋白相对分子质量(Mr)约为45 000,主要以可溶性形式表达,经亲和层析获得目的蛋白。Western blotting分析结果表明,重组AK蛋白可被过敏性患者血清识别,免疫反应性良好。结论成功获得德国小蠊精氨酸激酶全长基因,重组AK蛋白具有良好的免疫反应性。
- 闫浩夏立新陈家杰刘娇邓志琼易海涛刘小平
- 关键词：德国小蠊精氨酸激酶克隆
- 芒果过敏的研究进展被引量：3
- 2010年
- 芒果是世界范围内广泛栽培的热带水果,其所含有的过敏原可能危及人体健康。本文对芒果过敏的临床症状、流行情况、芒果过敏原及芒果过敏原与其他过敏原之间交叉反应的研究进展进行了综述。
- 吴序栎张红云刘志刚王琳琳邓志琼
- 关键词：芒果食物过敏
