陈善真
- 作品数：8 被引量：39H指数：3
- 供职机构：广东省农业科学院更多>>
- 发文基金：广东省农业科技重大专项资助项目更多>>
- 相关领域：农业科学理学医药卫生更多>>
- 中草药在养禽生产中的应用被引量：4
- 2008年
- 中国加入WTO后，畜禽产品的国际市场化步伐进一步加快，我国畜禽产品面临的国际市场的冲击和竞争也日趋严峻。发展绿色畜牧业，生产绿色、无公害食品已成为我国畜牧业生产面临的关键问题。因此，中兽药的作用愈加明显。其中一个主要应用是作为饲料添加剂。中草药添加剂作为一种绿色添加剂，不仅可解决长期困扰畜牧业发展的抗生素残留问题，
- 陈善真刘祥国
- 关键词：中草药添加剂养禽生产中草药饲料添加剂滥用抗生素绿色畜牧业畜禽产品
- 副猪嗜血杆菌OMP5基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：22
- 2011年
- 【目的】利用表达纯化的副猪嗜血杆菌(Haemophilus Parasuis,HPS)外膜蛋白P5(outer-membrane protein P5,OMP5),建立检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA检测方法。【方法】克隆扩增HPS OMP5基因,并将OMP5基因与原核表达载体pET-32a(+)连接,通过PCR、双酶切及测序鉴定后,将阳性重组质粒转化入受体菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达。亲和层析法纯化蛋白,尿素梯度透析复性,Western blot鉴定表达产物。将超声破碎抗原和复性蛋白分别按不同浓度包被酶标板,通过方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度,并对其它条件进行优化,最终建立检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。【结果】利用克隆表达的HPS OMP5蛋白做抗原,通过方阵滴定法确定蛋白最佳包被浓度为1:400,血清的最佳稀释度为1:160。用建立的间接ELISA方法检测317份未进行HPS免疫的健康猪血清,结果检出72份阳性,检出率为22.71%,与广东地区发病猪中的HPS分离率24%接近。同时,用该方法与用超声破碎抗原建立的ELISA方法同时检测了78份血清样品,结果,该法检出27份阳性,检出率为34.62%,后者则检出31份阳性,检出率为39.74%,二者符合率为71.79%。【结论】本研究利用重组表达的OMP5蛋白作为抗原建立的检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法,特异性好、重复性好,检出率与HPS临床分离率接近,可用于副猪嗜血杆菌的临床检测、流行病学调查和免疫监控。
- 陈善真李春玲贾爱卿王贵平
- 关键词：副猪嗜血杆菌克隆间接ELISA
- 田基黄的药理作用及其作用机理被引量：3
- 2009年
- 田基黄，又名地耳草，民间别名有小元宝草、雀舌草、七层塔等，为藤黄科金丝桃属植物地耳草（Hypericum ja-ponicum Thunb）的干燥全草。属一年生草本，野生于原野湿地，分布于华东、中南及西南，主产于四川、广东、广西、贵州、湖南、江西、福建等地。味甘、性凉，归肝、胆、大肠经，具有清利温热，散瘀消肿之功效。现代药理研究表明，田基黄具有抑菌、抗肝损伤、抑制癌细胞、调节免疫功能、抗病毒、抗氧化、止血等多种药理功效。
- 宋敏吴海坤陈善真
- 关键词：药理作用金丝桃属植物一年生草本肝损伤元宝草
- 副猪嗜血杆菌广东分离株外膜蛋白P5基因的克隆及蛋白结构预测被引量：9
- 2010年
- 根据GenBank上发表的副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白基因的核苷酸序列设计并合成1对特异性引物,从广东省HPS分离株外膜蛋白P5基因中扩增出与预期设计的1116bp大小相符的片段,将扩增产物连接到pMD18-T载体上,进行序列测定和分析。结果表明,克隆出HPS广东分离株的目的基因,核苷酸长为1116bp,共编码371个氨基酸,与已发表的HPS(SH0165)外膜蛋白基因核苷酸序列同源性100%,氨基酸同源性100%。生物学预测分析结果显示,HPS外膜蛋白是一种混合型结构蛋白,含有α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,其β-转角和无规则卷曲区域可能形成抗原表位;其N端含有1个信号肽,最佳切割位点在21～22个氨基酸;有15个抗原决定簇;无跨膜区;同源建模分析,未见相似三维结构。
- 陈善真王贵平曾振灵李春玲贾爱卿杨冬霞
- 关键词：副猪嗜血杆菌基因克隆蛋白结构预测
- 广东与四川地区发病猪副猪嗜血杆菌分离株omp5基因的克隆及序列分析
- 2011年
- 为了比较副猪嗜血杆菌(HPS)外膜蛋白P5(omp5)基因的同源性及抗原性,试验设计合成1对特异性引物,通过PCR方法从广东省和四川省发病猪的30株分离菌中扩增出HPS omp5基因,然后将PCR产物克隆至pMDTM18-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,并进行序列测定与分析。结果表明:30株HPS omp5基因的完整序列有3种长度,分别为1 116 bp、1 104 bp、1 098 bp;与已发表的血清5型HPS SH0165的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较,广东分离菌株核苷酸同源性为90.5%～100%,氨基酸同源性为88.8%～100%;而四川分离菌株的核苷酸序列同源性为90.8%～94.1%,氨基酸同源性为89.9%c93.0%;进化树分析显示,HPS omp5基因无论是在不同血清型之间还是不同地区之间都具有较高的同源性,说明OMP5蛋白比较保守,有望作为型间共用性抗原。
- 陈善真李春玲王贵平曾振灵贾爱卿杨冬霞
- 关键词：副猪嗜血杆菌克隆
- 副猪嗜血杆菌OMP5基因的克隆表达及间接ELISA检测方法的建立
- 副猪嗜血杆菌(Haemophilus Parasuis，HPS)病是影响养猪业的主要细菌性疾病之一，危害日渐严重，目前疫苗免疫是预防副猪嗜血杆菌病的主要措施，但HPS血清型众多，且不同血清型间不能提供有效的交叉免疫保护。...
- 陈善真
- 关键词：副猪嗜血杆菌克隆表达间接ELISA
- 检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法以及试剂盒。该间接ELISA方法是将副猪嗜血杆菌OMP P5蛋白作为包被抗原；而且判断标准如下：待测血清的OD<Sub>450</Sub>值＞0.375，且待测血清...
- 李春玲王贵平陈善真宋帅贾爱卿
- 文献传递
- 广东与四川地区发病猪副猪嗜血杆菌分离株omp5基因的克隆及序列分析
- 比较副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis，HPS)外膜蛋白P5(omp5)基因的同源性及抗原性，设计合成1对特异性引物，试验通过PCR方法扩增出30株从广东和四川发病猪中分离到的HPS omp5基因，然...
- 陈善真李春玲贾爱卿王贵平
- 文献传递
