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陈爱君: 作品数：13 被引量：31H指数：4; 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划广东省自然科学基金科研院所技术开发研究专项资金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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人血管内皮生长因子受体FLT-1胞外区1-3环cDNA的表达、纯化及鉴定: 2000年; 目的　研究人血管内皮生长因子受体FLT 1胞外区 1 3环cDNA在酵母菌中的表达、纯化及生物学活性。方法　将编码 316个氨基酸残基的人FLT 1胞外区 1 3环cDNA插入到含AOX1启动子和d分泌信号肽序列的Pichiapastoris酵母载体中 ,构建了重组表达质粒pPICqk/FLT l(1～ 3) ,转化酵母宿主菌GS115 ,筛选His+ Mut表型转化子 ,经摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。结果　经SDS -PAGE显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4天的表达量达到培养上清总蛋白的 6 0 % ,径Westernblot检测抗原性及特异性良好 ,经CM SepharoseFF阳离子交换层析和Sephacryls 10 0分子筛层析 ,纯度达 90 %以上 ;经生物活性检测具有结合hVEGF16 5的能力和hVEGF16 5促进HUVEC的增殖功能。结论　人血管内皮生长因子受体FLT 1胞外区 1～ 3环cDNA在酵母菌中表达成功。; 马骊王小宁张智清周小明曾革非陈爱君; 关键词：血管内皮生长因子受体酵母 CDNA

表达人干扰素α-2b基因重组乳杆菌的鉴定及其抗病毒活性的动态研究被引量：1: 2007年; 目的：进一步鉴定表达人干扰素α-2b的重组乳杆菌DM8909／pSC111AE-IFN-α-2b，考察重组菌的培养条件及其表达产物动态的抗病毒活性。方法：在LRS培养基培养重组菌株DM8909／pSC111AE-IFN-α-2b并诱导表达，用Western印迹鉴定培养上清中的表达产物，对重组菌株在LRS培养基中的不同时间的D600、pH值、活菌数、表达产物抗病毒活性进行动态观察。结果：Western印迹鉴定证实了重组菌上清中的IFN-α-2b。重组菌培养18h后pH值由6．5开始下降，56h后降至3．5；细菌于培养21h进入对数期，32h进入稳定期；培养24～32h上清中干扰素抗病毒活性为4．08×10^5U／ml。结论：重组乳杆菌DM8909／pSC111AE-IFN-α-2b可表达IFN-α-2b于培养上清，培养24～32h上清中干扰素含量最高，可用于预防及治疗病毒感染的进一步研究。; 陈辉张力平贾润清傅晓丽姚立红陈爱君康白袁杰利张智清; 关键词：干扰素Α-2B 乳杆菌属抗病毒活性

VEGF_(165)cDNA在酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究被引量：7: 2001年; 目的研究人ＶＥＧＦ１６５基因在Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母中的表达，获得高效表达、具有生物学活性的重组ｈＶＥＧＦ１６５。方法采用ＰＣＲ扩增ｈＶＥＧＦ１６５基因，经ＤＮＡ序列分析后，插入含ＡＯＸ１启动子和α分泌信号肽序列的Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母表达载体中，构建重组质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／ｈＶＥＧＦ１６５。经转化酵母宿主菌ＫＭ７１，筛选多拷贝整合转化子，摇瓶培养，用１０ｍＬ／Ｌ甲醇诱导表达。表达产物经Ｈｅｐａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ亲和层析纯化后，以人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）测定其生物学活性。结果ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析显示，表达产物以可溶性分子的形式存在于上清中，诱导４ｄ的表达量达上清中总蛋白的６０％以上。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ表明，表达产物具有良好的抗原性和特异性。经Ｈｅｐ－ａｒｉｎ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ６Ｂ亲和层析纯化，ｒｈＶＥＧＦ１６５的纯度可达到９０％以上。生物学活性检测证实，其具有刺激脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）增殖的活性。结论在Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ表达系统中，实现了ｈＶＥＧＦ１６５的高效分泌性表达。; 马骊王小宁张智清陈爱君姚立红姜忠良; 关键词：血管内皮生长因子

人血管内皮生长因子功能域受体的筛选及其生物学活性研究: 2001年; 利用ＰＣＲ技术，从人胎盘ｃＤＮＡ文库扩增出４个截短的人血管内皮生长因子受体（Ｆｉｔ－ｌ）ｃＤＮＡ，分别含胞外第２，１－２，２－３，１－３个ｌｏｏｐ，应用酵母双杂交系统对Ｆｌｔ－１的最小配体结合域进行了研究，结果表明，不仅其胞外１－３ｌｏｏｐ能与ｈＶＥＧＦ１６５结合，比其更小的片段２－３ｌｏｏｐ也具有与配体结合的能力．进一步构建了重组表达质粒ｐＰＩＣ９Ｋ／Ｆｌｔ－１（１－３）和ｐＰＩＣ９Ｋ／Ｆｌｔ－１（２－３），转化Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ酵母菌ＧＳ１１５，摇瓶培养，经１％甲醇诱导，表达的Ｆｌｔ－１以可溶性分子形式存在于上清中，诱导４ｄ的表达量占上清总蛋白质的６０％以上．表达产物经ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阳离子交换层析和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００分子筛层析纯化，纯度达９０％以上．体外生物学活性检测表明，表达的可溶性Ｆｌｔ－１（２－３）具有与Ｆｌｔ－１（１３）接近的结合ｈＶＥＧＦ１６５的能力和抑制ｈＶＥＧＦ１６５对ＨＵＶＥＣ的促增殖功能．进一步的动物模型实验证实，可溶性Ｆｌｔ－１（２－３）具有显著的抑制ｈＶＥＧＦ１６５促进新生血管形成的功能．; 马骊王小宁张智清孙大军周小明陈爱君姚立红; 关键词：人血管内皮生长因子受体酵母双杂交配体结合域血管形成

融合蛋白及其编码基因与应用: 本发明是关于一种融合蛋白及其编码基因与应用。本发明的融合蛋白是铜绿假单胞菌外毒素A的非必需区或羧基末端与1-3个拷贝的甲型流感病毒M2蛋白胞外区融合获得的融合蛋白；所述铜绿假单胞菌外毒素A的氨基酸序列为序列表中的序列15...; 张智清徐一刘晓宇郭建强姚立红陈爱君

sTNFR-IgGFc融合基因在内皮细胞中的表达及其对小鼠关节炎模型的基因治疗研究被引量：5: 2006年; 可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR)可以拮抗肿瘤坏死因子的活性,因此已被用来治疗与TNF相关的炎性疾病。本研究将sTNFR与IgGFc片段的融合蛋白基因克隆到真核表达载体pStar上,转染到人的内皮细胞中,获得了表达。表达的sTNFR-IgGFc能够拮抗TNFα对L929细胞的细胞毒活性。将该质粒DNA与脂质体混合,经尾静脉注射到Ⅱ型胶原诱导的关节炎小鼠体内后,应用RT-PCR在鼠的肝脏检测到了sTNFR-IgGFc的表达,并显著地改善了治疗组小鼠关节炎症状和病理反应。这表明抗TNF基因治疗有可能作为治疗类风湿性关节炎的新的途径。; 何婕姚立红陈爱君喻宏贾润清程从升郇丽芳张智清

表达hIFNα-2b基因重组乳杆菌治疗HSV-2感染的研究被引量：2: 2006年; 目的探讨表达人干扰素α-2b的重组乳杆菌应用于阴道HSV-2感染的治疗作用。方法建立阴道感染HSV-2的小鼠模型,使用重组菌菌液于感染前24h进行预防,或感染后48h进行治疗,记录病损程度并检测小鼠阴道分泌物中HSV-2滴度。结果使用重组菌预防或治疗的小鼠症状轻且病程缩短,病灶中病毒滴度下降很快。结论表达IFNα-2b的重组乳杆菌具有较强的局部抗病毒作用,可用于预防及治疗由HSV-2感染引起的生殖器疱疹。; 陈辉张力平贾润清傅晓丽姚立红陈爱君康白袁杰利张智清; 关键词：干扰素Α-2B 乳杆菌属单纯疱疹病毒属

人血管内皮生长因子受体Flt-1胞外区2-3loop在Pichia.pastoris酵母中的表达、纯化及其生物学活性研究被引量：6: 2001年; 目的 :研究人Flt 1胞外区 2 3loopcDNA在Pichia pastoris酵母中的表达 ,获得高效表达的具有生物学活性的重组Flt 1(2 3)。方法 :采用PCR扩增Flt 1(2 3)基因 ,经DNA序列分析后 ,插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的Pichia pastoris酵母表达载体中 ,构建重组质粒pPIC9K Flt 1(2 3) ,转化酵母宿主菌GS115 ,筛选His+ Muts 表型转化子 ,摇瓶培养 ,1%甲醇诱导表达。表达产物经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,测定其生物学活性。结果 :SDS PAGE分析显示 ,表达产物以可溶性分子形式存在于上清中 ,诱导 4d的表达量达上清总蛋白的 6 0 %以上。ELISA及Westernblot实验表明 ,表达产物具有良好的抗原性和特异性。经CM SepharoseFF阳离子交换层析和SephacrylS 10 0分子筛层析纯化后 ,Flt 1(2 3)纯度达到 90 %以上。生物学活性检测证实其具有结合hVEGF1 6 5 的能力和抑制hVEGF1 6 5 对HUVEC的促增殖功能。结论 :获得了具有生物学活性的可溶性重组Flt 1受体胞外区 2 3loop小片段 ,为进一步的动物实验和临床应用打下了基础。; 马骊王小宁张智清周小明曾革非陈爱君; 关键词：血管内皮生长因子 FLT-1

融合蛋白及其编码基因与应用: 本发明是关于一种融合蛋白及其编码基因与应用。本发明的融合蛋白是铜绿假单胞菌外毒素A的非必需区或羧基末端与1-3个拷贝的甲型流感病毒M2蛋白胞外区融合获得的融合蛋白；所述铜绿假单胞菌外毒素A的氨基酸序列为序列表中的序列15...; 张智清徐一刘晓宇郭建强姚立红陈爱君; 文献传递

流行性感冒病毒鸡胚高产株的遗传特性分析被引量：2: 2002年; Influenza virus strain A/PR/8/34(H1N1)acquired a high-yielding property after serial passages in fertilized eggsSix internal RNA segments of the high-yielding strain were sequenced from their cloned cDNAs and compared with the corresponding original sequences in the prime A/PR/8/34(H1N1)strainNinety-three point mutations were found accumulated in six genes(PB2,PB1,PA,NP,M,and NS),which lead to 27 amino acid changesA significant low mutation frequency without amino acid change was observed in PA geneThe mutation frequency at the amino acid level was the highest(about 3%)in M2 proteinOur data suggest that the unequal distribution of mutations among different viral proteins may correlate with individual role of each protein in viral; 董婕张立国陈爱君吴昆昱孙梅生张智清; 关键词：流行性感冒病毒基因突变

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