丁可
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 供职机构：西北农林科技大学植物保护学院陕西省农业分子生物学重点实验室更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目高等学校学科创新引智计划长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 小麦条锈菌胞质游离钙离子动态检测方法的建立被引量：6
- 2010年
- 胞质游离钙离子变化与植物病原真菌侵染寄主的动态过程具有重要的关联性。本研究以侵染小麦叶片的条锈菌31号生理小种(CYR31)为材料,以孵育法将Ca2+荧光探针Fluo-3-AM载入到小麦条锈菌细胞中,并结合激光共聚焦扫描显微技术,建立了测定侵染过程中条锈菌胞质游离Ca2+分布的试验方法。结果表明,采用10μmol/L Fluo-3-AM装载顺次进行低温4℃孵育1h,25℃孵育1h,可获得较为理想的条锈菌胞质游离Ca2+染色结果。该方法可用于检测不同侵染阶段的小麦条锈菌细胞质游离钙离子的分布变化,为进一步研究锈菌胞内钙离子动态与侵染寄主的关联性提供了技术支撑。
- 张洪丁可裴国亮郭军康振生
- 关键词：小麦条锈菌
- 小麦条锈菌PsNCS1基因的克隆及转录表达特征被引量：2
- 2010年
- 【目的】克隆小麦条锈菌神经钙离子感应蛋白基因PsNCS1,分析其在病菌不同发育时期的表达水平。【方法】利用文库筛选和RT-PCR技术克隆PsNCS1的cDNA序列,采用生物信息学技术预测分析该基因编码蛋白的保守结构域及基本特性,构建系统发育树;运用实时荧光定量RT-PCR技术分析PsNCS1在病菌不同生长发育时期的表达水平。【结果】PsNCS1全长cDNA为1007bp(GenBank登录号GU134621),开放阅读框为573bp,编码190个氨基酸,分子量为22.17kDa,等电点为4.96。编码蛋白含有4个钙结合蛋白的保守结构域EF-hand,并且具有N末端豆蔻酰化特征。编码蛋白与担子菌门真菌NCS蛋白相似性最高,其中与小麦秆锈菌的NCS亲缘关系最近,序列相似性达96%。PsNCS1在夏孢子和芽管时期表达量较高,均超过其他发育阶段基因表达量的2倍。【结论】PsNCS1可能参与了条锈菌夏孢子的形成和芽管的延伸。PsNCS1的克隆与表达分析为进一步研究条锈菌细胞钙信号传导机理和致病机制奠定了基础。
- 郭军张洪丁可代西维陈玥颖段迎辉黄丽丽康振生
- 关键词：小麦条锈菌基因克隆实时定量RT-PCR
