代文涛
- 作品数:4 被引量:4H指数:1
- 供职机构:中国科学院武汉病毒研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划中国科学院知识创新工程更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- HaSNPV在HzAm1细胞中的复制研究
- 本论文主要运用实时荧光定量PCR 技术对HaSNPV 感染对数期与平台期HzAm1细胞的复制差异进行了定量分析,并且进一步研究了造成这种差异的原因;得到了9 个病毒基因的转录谱;并且研究了HaSNPV 感染HzAm1 细...
- 代文涛
- 关键词:HASNPV实时荧光定量PCR转录时相
- 文献传递
- HzAm1细胞rpL13基因的序列分析及病毒感染对其转录水平的影响
- 2005年
- 从美洲棉铃虫细胞(HzAM1)中克隆了核糖体大亚基蛋白L13(RibosomalproteinL13,RpL13)的cDNA及其基因组DNA序列,并进行了序列分析。其编码框为666bp,无内含子,预测编码大小约为25kDa的蛋白。通过与其它15种动物的RpL13编码框序列进行进化分析,发现聚类结果与传统物种分类一致。转录研究表明,棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpaarmigerasinglenucleocapsidnucleopolyhedrovirus,HaSNPV)感染HzAm1后使rpL13在细胞内的转录水平降低,在病毒感染后96h,rpL13mRNA的拷贝数降到对照健康细胞的8%。
- 代文涛邓菲胡志红
- 关键词:转录
- HaSNPV的9个基因的转录谱分析
- 2006年
- 使用反转录和实时荧光定量PCR技术,我们对HaSNPV的几个预期的早期基因、早晚期基因、晚期基因、极晚期基因的转录时相进行分析,结果表明:这些基因的起始转录时间与其自身的启动子类型基本是一致的。但是预期的早期基因pkip晚期才开始转录;预期的早晚期基因ha107早期不转录,仅在晚期转录。这些基因的转录水平一般都在病毒感染细胞72h后达到最高,并且极晚期基因polyhedrin的转录水平明显高于其它基因。Iap2的转录水平仅次于polyhedrin,表明它可能是一个功能基因。与AcMNPV的p10不同,在HaSNPV/HzAM1系统中p10的转录水平并不高。
- 代文涛邓菲王华林袁丽胡志红
- 关键词:HASNPV实时荧光定量PCR
- HearNPV在生长对数期与平台期宿主细胞中的复制差异分析被引量:3
- 2007年
- 使用实时荧光定量PCR技术对HearNPV在生长对数期和平台期HzAM1细胞的复制差异进行分析。结果表明,HzAM1细胞生长对数期的倍增时间为22h,生长对数期的细胞以S期细胞为主(48.6%),而平台期细胞中以G2/M期细胞为主(72.6%)。在这两种不同状态的细胞中,病毒的复制主要在感染后60h内完成,在感染后14~20h,病毒复制倍增时间分别为1.8h和1.9h,几乎没有差别。但是感染生长对数期细胞时,吸附侵入细胞内的BV数量、BV释放的数量、最终的病毒产量以及病毒表达的蛋白产量明显高于被病毒感染的生长平台期细胞。如生长对数期细胞内复制合成的病毒DNA总量的25%装配形成BV病毒粒子出芽释放到细胞外,而对于平台期细胞,病毒DNA仅有13oA装配形成BV病毒粒子出芽释放到细胞外。病毒感染两种生长状态的细胞,病毒DNA均从感染后7~8h开始复制,没有明显差别;而生长对数期细胞从被感染后18~20h释放子代病毒BV,生长平台期细胞则在感染后22~25h开始释放病毒BV。在感染后30~60h,在生长对数期被感染的细胞释放BV的速度约为483copies/cell/h,而平台期细胞约为100copies/cell/h。最初吸附侵入到生长对数期细胞内的BV粒子数量明显多于侵入到生长平台期细胞内的BV数量。实验证实,生长对数期与平台期的细胞膜的流动性有很大差别,推测健康细胞表面有活性的病毒受体数量可能决定了侵入细胞内的BV的数量。
- 代文涛韩霄王华林胡志红邓菲
- 关键词:HEARNPV荧光定量PCR