何长龙
- 作品数：12 被引量：26H指数：4
- 供职机构：第三军医大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于pJFH-1的HCV全基因组扩增方法的建立被引量：1
- 2011年
- 目的基于pJFH-1建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方法。方法以pJFH-1为测试模板,通过优化PCR扩增中各个重要环节,包括引物的选择、甘油和/或DMSO最适浓度的筛选、循环条件的摸索等,建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方案。结果高Tm值(>65℃)的引物更有利于HCV全基因组的扩增;5%、10%甘油或5%DMSO可显著提高PCR扩增的特异性和扩增效率,且甘油的促进作用优于DMSO;双温法较三温法能获得更高产量的PCR产物。结论通过优化长链PCR反应体系及条件,成功实现HCV基因全长的扩增。
- 郭艳兰林何长龙洪国祜程玲毛青
- 战时腹泻诊疗救治包
- 本实用新型公开了一种战时腹泻诊疗救治包，包括盒体和盒盖，所述盒体上设置有试剂盒模腔、采集器下模腔、补液盐袋下模腔、锥形杯下模腔、止泻剂盒下模腔和矩形瓶下模腔，所述盒盖上设置有说明书模腔、采集器上模腔、补液盐袋上模腔、锥形...
- 毛青吴力克何长龙张旭清兰林
- 文献传递
- 双核酶自切割HCV全基因组复制子的构建及其体内外复制的特性
- 2013年
- 目的建立可在细胞内直接启动HCV复制并且能产生感染性病毒颗粒的HCV全基因组复制子，进行HCV体内外实验研究。方法在HCVJFHl及JFHl／GNDcDNA序列两侧分别加上核酶序列与pcDNA3．1载体构建重组质粒pcDNA3．1-RZ-JFHI和pcDNA3．1-RZ-JFHl／GND。用重组质粒直接转染Huh7．5细胞及进行昆明小鼠尾静脉高压注射。定量实时逆转录聚合酶链反应、细胞免疫荧光染色、免疫组织化学染色和血清学检查分别检测其体内外复制的特性。结果在16周的检测期内，从转染HCV复制子的Huh7．5细胞培养上清液中持续稳定地检测出1×10b～3×106拷贝／ml的HCVRNA（非稳定转染），产生的病毒颗粒具有感染性。在尾静脉高压注射HCV复制子的昆明小鼠，检查到短暂的病毒血症，免疫组织化学染色未能发现HCV抗原阳性细胞，未检测到血清中HCV特异性抗体。结论构建的HCV复制子在体外能长期、稳定及高效的产生感染性病毒颗粒，但体内实验未能获得预期效果，可能与HCVJFHl病毒株的特殊性有关。所建立的HCV全基因组复制子可用于HCV病毒学及抗病毒药物筛选等方面的研究。
- 何长龙刘青山郭艳朱研毛青兰林
- 关键词：肝炎病毒丙型HUH7昆明小鼠
- HCV全基因组复制子的构建及HCV6型患者PEG-IFN疗效分析
- 本文分两个部分进行探讨。 第一部分 构建双核酶自切割HCV JFH1复制子并研究其体内外复制特性 目的：丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)基因组长度为9.6kbp，是正链RNA病毒，其基因组由...
- 何长龙
- 关键词：聚乙二醇干扰素利巴韦林
- 文献传递
- 感染性腹泻常见6种病原体研究进展被引量：11
- 2011年
- 感染性腹泻是由多种病原微生物及其产物引起的以腹泻为主要表现的一组肠道传染病。1989年中国传染病防治法将除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的由微生物感染引起的腹泻,称为其他感染性腹泻,并列为丙类传染病。中国卫生部公布的2009年度法定传染病疫情中,其他感染性腹泻发病数占丙类传染病总数的27.33%,占全部传染病发病总数的11.11%。由此可见。
- 何长龙毛青
- 关键词：腹泻病原传染病
- 聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗HCV 6型感染者的临床疗效回顾性观察研究被引量：5
- 2015年
- 目的探讨HCV 6型感染者的临床治疗方法。方法以聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗HCV 6型感染者为试验组,治疗2/3型感染者为对照组,纳入病例必须完成治疗24周且随访时间达到24周以上。分析2组基本资料特征,比较2组病毒学应答效果。结果纳入HCV 6型感染者53例、2/3型感染者84例。HCV 6型、2/3型感染者获得RVR比例分别是88.7%、89.3%,率差95%可信区间为:(-0.113 9,0.101 9);获得EVR的比例分别是94.3%、96.4%,率差95%可信区间为:(-0.095 0,0.053 0);获得SVR的比例分别是86.8%、90.5%,率差95%可信区间为:(-0.147 6,0.073 6);HCV 6型、2/3型感染者RVR对SVR的阳性预测值分别为89.4%、93.3%,率差95%可信区间为:(-0.143 6,0.065 6);EVR对SVR的阳性预测值分别为88.0%、91.4%,率差95%可信区间为:(-0.142 8,0.074 8)。结论采用聚乙二醇干扰素联合利巴韦林治疗HCV 6型感染者的疗效非劣于2/3型感染者,故HCV 6型感染者推荐使用24周的标准联合抗病毒治疗方案。
- 何长龙吴全新况雪梅陈虹汝毛青易东
- 关键词：聚乙二醇干扰素利巴韦林病毒学应答
- HCV核心蛋白氨基酸替换与干扰素应答的关系被引量：4
- 2013年
- 目的研究慢性丙型肝炎病毒核心蛋白氨基酸替换与干扰素疗效的关系。方法纳入HCV RNA阳性的慢性丙型肝炎患者108例,依据干扰素治疗结局分为持续病毒学应答组(76例)、非持续病毒学应答组(32例)。逆转录巢式PCR(RT-nested-PCR)扩增核心蛋白区,分析其氨基酸替换模式及其与干扰素疗效的关系。结果高频替换(频率>10%)发生于Core蛋白第70、75、91、106、110、147、187位氨基酸残基,各位点之间存在广泛的连锁替换;两组间Core蛋白第70位的Q/non-Q替换(P=0.004)、91位的M/non-M替换(P=0.039)、110位的T/non-T替换(P=0.025)具有显著差异;70Q、91M、110T替换更倾向于发生不应答治疗结局,OR值及95%CI分别为0.288(0.120～0.693)、0.413(0.177～0.966)、0.346(0.133～0.896);同时携有上述2个以上的"抵抗型"替换者,治疗4周时HCV RNA水平下降更缓慢(P=0.001)。结论 HCV Core区第70、91、110三个位点可作为Core区预测干扰素疗效的优选氨基酸位点。
- 朱季香何长龙郭艳程玲毛青
- 关键词：核心蛋白丙型肝炎病毒病毒学应答
- PEG-IFN联合RBV治疗HCV6型、2/3型感染者的疗效观察研究
- 研究背景：聚乙二醇干扰素(pegylated interferon,PEG-IFN)联合利巴韦林(ribavirin,RBV)是目前抗HCV 的标准疗法.HCV 基因型是影响HCV 患者抗病毒治疗应答的最重要因素.
- 何长龙毛青
- 关键词：聚乙二醇干扰素病毒学应答
- 4种感染性腹泻病原菌免疫磁珠-多重PCR快速检测体系的建立被引量：2
- 2012年
- 目的基于免疫磁珠分离及多重PCR技术建立出血性大肠埃希菌、福氏志贺菌、空肠弯曲菌、副溶血弧菌的快速检测体系。方法根据出血性大肠埃希菌uidA、福氏志贺菌ipaH、空肠弯曲菌hipo及副溶血弧菌tlh的基因序列设计特异性引物,优化免疫磁珠分离过程及多重PCR扩增中的各个环节,建立上述4种病原菌同步快速扩增体系,并鉴定该体系特异性、敏感性。结果发现Mg2+浓度对该体系影响最大,在Mg2+浓度为4 mmol/L时扩增效率最高;该体系对4种病原菌的敏感性分别为:出血性大肠埃希菌2.7×10 cfu/ml、福氏志贺菌6.4×10 cfu/ml、空肠弯曲菌7.6×10 cfu/ml、副溶血弧菌3.6×10 cfu/ml。结论建立了出血性大肠埃希菌、福氏志贺菌、空肠弯曲菌、副溶血弧菌的免疫磁珠-多重PCR快速检测体系,该体系特异性及敏感性高,检测过程简单,结果稳定,可应用于临床诊断及食品卫生监管中致病菌的快速检测。
- 何长龙吴力克兰林洪国祜张娟张维毛青
- 关键词：感染性腹泻免疫磁珠多重PCR
- 感染性腹泻快速检测试剂盒
- 本实用新型涉及感染性腹泻快速检测试剂盒，由盒体和固定座构成，固定座设置于盒体内，固定座上设置有至少两个容器孔并呈线性排列，容器孔固定连接有样品分离瓶和PCR检测瓶，样品分离瓶含有分离磁珠，分离磁珠表面有吸附抗出血性大肠埃...
- 毛青吴力克何长龙
- 文献传递
