冷雪娇
- 作品数：10 被引量：14H指数：2
- 供职机构：潍坊医学院更多>>
- 发文基金：吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金上海市科学技术委员会科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Th与Treg在类风湿关节炎中的作用和意义被引量：2
- 2014年
- 类风湿关节炎（rta）是一种慢性、进行性自身免疫性疾病，以关节滑膜炎及关节病变为主要特征，影响着全世界约1％的人口。我国的患病率为0．32％-0．36％，男女比为1：2。目前尚无特效的治愈方法，患者致残率很高。其机制尚不完全明确，现有的研究报道多认为RA与患者滑膜组织中浸润的淋巴细胞免疫反应及其产生的大量相关细胞因子有关。所以对类风湿关节炎发病机制的研究探讨一直是风湿病学领域的热点。
- 冷雪娇刘英杰邵磊
- 关键词：类风湿关节炎TH细胞免疫反应关节滑膜炎关节病变滑膜组织
- 人CD252胞外段原核表达载体的构建及表达
- 目的:用RT-PCR法扩增获得人类CD252基因,构建人CD252胞外段基因原核表达载体,将表达载体转化感受态细菌进行初步的诱导表达,同时观察不同温度和时间条件下对目的蛋白表达的影响。
- 潘新宇王成伟冯永堂鞠吉雨刘培红冷雪娇辛宁牟东珍苗乃法王丽娜
- 文献传递
- 人OX40基因的扩增、原核表达载体的构建及融合蛋白的表达
- 目的:扩增人OX40基因,构建其胞外段基因的原核表达载体,转化BL21(DE3)进行诱导表达,并对表达条件观察探索,以期获得目的蛋白的最佳表达条件。方法:(1)从PHA活化的人淋巴结T细胞提取mRNA,以mRNA为模板R...
- 冷雪娇冯永堂鞠吉雨辛宁苗乃法
- 文献传递
- 正常小儿MCV变化趋势及对IDA的预示作用
- 2014年
- 目的研究HGB≥110 g/L无贫血症状的正常小儿从出生到学龄期（0岁～12岁）红细胞体积（MCV）的变化过程并探讨其对缺铁和缺铁性贫血（IDA）的预示作用。方法从实验室信息系统（LIS）随机导出我院2012年1月—2013年6月HGB≥110的917名0岁～12岁小儿血常规结果,分为8个年龄组,分析各年龄段MCV的变化,了解其与缺铁及IDA之间的关系。结果新生儿红细胞体积偏大（MCV 98.1～106.8 fL,正常82～92 fL）,2,3个月渐渐恢复正常大小,4,5个月后开始变小,6个月～12个月最小（MCV 77.86 fL）,之后慢慢变大,2岁后基本恢复正常。统计分析各年龄组小儿MCV大小明显不同,从各组MCV〈82 fL的分布情况也可看出明显的差异。结论正常小儿MCV经历由大→正常→小→正常的变化过程,6个月～12个月时最小,预示着这个时期的小儿潜藏着缺铁的危险,如不及时强化铁的摄入,可能会引起IDA。
- 冷雪娇王慧泉李芳
- 关键词：正常小儿HGBMCV
- 人OX40融合蛋白的表达及其纯化
- 2009年
- 目的表达含有人OX40胞外段的融合蛋白,纯化目的蛋白,为下一步制备抗人OX40单克隆抗体及鉴定打下良好的基础。方法采用冰冷热击法将测序正确的pET32a-OX40胞外段的重组质粒转入表达菌株BL2l(DE3)的感受态细胞,接种于含氨苄青霉素的培养基筛选出阳性克隆。将阳性克隆细菌用IPTG诱导培养,收集不同时间的培养产物,离心分离菌体,取菌体超声破菌,离心收集胞质上清和包涵体沉淀,进行SDS-PAGE分析,观察不同时间条件对目的蛋白表达的影响及目的蛋白分布情况,筛选优化表达条件。采用Ni离子亲合层析柱纯化目的蛋白,然后使用超滤管对蛋白进行脱盐处理,并用核酸蛋白检测仪测定目的蛋白的浓度。结果筛选到表达pET32a-OX40的阳性菌株SDS-PAGE电泳表明,含有重组质粒的表达菌株经IPTG诱导后,在蛋白Marker的31.0～42.7kD之间出现了新的融合蛋白带,在胞质和包涵体中均有目的融合蛋白的表达。优化表达条件分析表明,在诱导的不同时间内新蛋白的表达量没有明显差别用Ni离子亲和层析柱纯化的蛋白经超滤管进行脱盐处理后,获得的目的蛋白含量为56.266g/L。结论成功获得表达pET32a-OX40的阳性菌株;
- 辛宁冯永堂冷雪娇王成伟鞠吉雨苗乃法
- 关键词：纯化单克隆抗体
- 大鼠OX40基因PCR扩增及胞外段原核表达载体的构建和融合表达
- 目的:构建大鼠OX40胞外段的原核表达载体并初步诱导表达,以期获得目的蛋白的最佳表达条件。方法:(1)取健康大鼠用ConA体内刺激一周后,心脏取血分离外周血单个核细胞,再
- 刘培红冯永堂鞠吉雨冷雪娇潘新宇苗乃法邸大琳牟东珍刘艳菲
- 文献传递
- 血清HE4、CYFRA21-1、CA125在诊断卵巢良、恶性肿瘤中的价值被引量：8
- 2014年
- 目的：探讨血清人附睾蛋白4（HE4）、细胞角蛋白19片段抗原21-1（CYFRA21-1）、CA125对卵巢良、恶性肿瘤诊断的意义，评价其单独及联合检测在判断卵巢癌高风险中的价值。方法采用电化学发光免疫法（ ECL）检测来威海市文登中心医院就诊的45例原发性卵巢癌、56例良性卵巢肿瘤患者及50例健康体检女性血清中HE4、CYFRA21-1、CA125水平，其中任一指标高于正常上限即定为阳性，分析三者在卵巢癌诊断中的阳性率及符合率，比较三种指标对卵巢良、性肿瘤的诊断价值。结果 HE4和CYFRA21-1水平在卵巢癌组显著升高，与良性肿瘤和健康对照组比较差异有统计学意义（P﹤0.05），而良性肿瘤与对照组比较差异无统计学意义（P﹥0.05）；对于恶性肿瘤两者诊断的特异性和阳性预测值都很高[ HE4（100%，100%），CYFRA21-1（98.2%，96.7%）]，诊断的符合率也比较高（90.1%，83.2%），与CA125相比差异有统计学意义（ P﹤0.05），但两者的敏感性比CA125低。CA125在卵巢良、恶性肿瘤中都会升高，只是升高的程度不同，恶性肿瘤组与良性肿瘤组比较、良性肿瘤组与正常对照组比较差异均有统计学意义（ P均﹤0.05），能简单区分良、恶性肿瘤；但对卵巢癌诊断的特异性不是很高（75%），阳性预测值和诊断符合率也比较低（72%，77.2%），三者联合检测可以提高卵巢癌诊断的敏感性（100%）及准确性（85.1%），达到优化临床诊断的效果。结论 HE4、CYFRA21-1只在恶性肿瘤中升高，主要用于卵巢癌的诊断；CA125在良、恶性肿瘤中都有升高，但升高的程度不同，可用于良、恶性肿瘤的诊断与鉴别，三者联合检测则可提高卵巢癌诊断的敏感性和准确率，对于卵巢癌的早期诊断与治疗监测有重要的意义。
- 冷雪娇郑君涛侯芹芹谭秀燕
- 关键词：CA125电化学发光
- 人CD134融合蛋白的表达及纯化
- 目的:表达含有CD134胞外段的融合蛋白,纯化目的蛋白,从而为下一步制备抗人CD134单克隆抗体及鉴定,打下良好的基础。方法:(1)采用冰冷热击法将测序正确的pET32a-CD134的重组质粒转入表达菌株
- 辛宁冯永堂王成伟冷雪娇鞠吉雨苗乃法
- 文献传递
- PD-L1对肺癌细胞迁移能力的影响被引量：3
- 2017年
- 目的:探索PD-L1在肺癌细胞中的表达及其对细胞迁移能力的影响。方法:采用流式细胞术检测不同病理类型肺癌细胞株表面PD-L1分子表达水平,分别选择高、中、低表达的细胞株,后添加细胞因子诱导肺癌细胞株,采用免疫印迹术筛选出能够提高肺癌细胞株PD-L1分子表达水平的细胞因子;采用siRNA干扰技术,下调中、高表达PD-L1的肺癌细胞株中PD-L1的分子表达水平,transwell实验检测细胞迁移能力改变。结果:PD-L1在细胞株HCC827、H1299、A549(腺癌)、H226、H520(鳞癌)、H460(大细胞癌)、H446(小细胞癌)表面的表达水平分别为HCC827、H460(高表达),H1299、H226、H446、H520(中表达),A549(低表达)。选择具有transwell迁移能力的腺癌细胞株H1299、A549,分别添加细胞因子IL-4、IL-6、IL-13、TGF-β-1、IFN-γ培养,筛选出TGF-β-1、IFN-γ两种因子能够上调肺癌细胞株PD-L1的表达水平,transwell实验结果显示细胞迁移能力较对照组显著增强。si-PD-L1干扰肺癌细胞株PD-L1表达后,PD-L1的表达水平明显下调,细胞迁移能力较对照组显著减弱;TGF-β-1、IFN-γ诱导细胞株PD-L1表达水平上调后能够引起细胞迁移能力增强,经siRNA干扰后,PD-L1表达水平下调,细胞迁移能力随之显著减弱。结论:PD-L1的表达能促进肺癌细胞的迁移,可能参与肺癌转移过程。
- 冷雪娇王建丰徐云华叶翔赟史文博陈智伟
- 关键词：肺癌PD-L1迁移肿瘤微环境
- HLA-Ⅱ类基因与肿瘤的关联性研究被引量：1
- 2017年
- 目的通过检测各类肿瘤患者HLA等位基因位点，探讨HLA-Ⅱ类基因与肿瘤的关联性。方法采用PCR-SSP技术检测4类肿瘤患者（合计220例）以及正常对照组的HIJA-Ⅱ类基因位点，进行相对危险度分析并做统计学处理。结果肿瘤组HLA-DQBI＊03型频率明显高于对照组，HLA-DQBI＊06型频率明显低于对照组，差异有统计学意义；4类肿瘤之间差异无统计学意义。结论HLA-DQB1＊03可能是肿瘤的易感基因；HLA-DQB1＊06可能是肿瘤的抗性基因。
- 周秀英田思思张道强刘硕冷雪娇
- 关键词：HLA肿瘤基因
