刘剑
- 作品数：19 被引量：32H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 姜黄素通过调节组蛋白乙酰化拮抗阿霉素肾病大鼠肾脏纤维化
- 刘剑戴芹仲芳徐丽梨王伟铭陈楠
- IgA1糖基化和组蛋白乙酰化参与IgA肾病发病的研究
- 目的 明确IgA1 糖基化和组蛋白乙酰化修饰在IgAN 发病中的作用.方法 收集经肾脏活检术明确诊断为IgAN 患者共59 例(男30 例,女29 例),年龄分布为16-65岁.正常对照组30 例(男10 例,女20 例...
- 戴芹刘剑杜云雷王伟铭陈楠
- 微小RNA与肾脏纤维化的研究进展被引量：3
- 2011年
- 微小RNA(miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码蛋白质RNA,通过与RNA结合,参与机体的生理和病理过程,并在细胞分化、增殖和凋亡等过程中发挥重要作用。研究发现,miRNA通过调控胶原沉积、纤维连接蛋白表达、间充质细胞转分化及转化生长因子β对肾脏的作用,参与肾脏纤维化的发生和进展。
- 刘剑王伟铭
- 关键词：微小RNA纤维化肾脏
- 上海浦东地区高尿酸血症的流行现状及影响因素分析
- <正>目的:探讨上海浦东地区常住人群中高尿酸血症的患病率及与慢性肾脏病危险因素的关系。方法:对上海浦东地区一个社区中1024名常住居民进行问卷调查、尿酸、肌酐及慢性肾脏病相关危险因素的检测。采用多因素Logistic回归...
- 刘剑沈平雁俞正娟张文权马晓波俞夏莲倪俐燕郝旭林力欧阳彦王伟铭陈楠
- 文献传递
- Panel测序筛查成人激素抵抗型局灶节段性肾小球硬化致病基因
- <正>目的:激素抵抗局灶节段性肾小球硬化(SR-FSGS)患者预后较差,儿童SR-FSGS与足细胞相关基因突变相关,但成人SR-FSGS病因不明。本研究采用基于二代测序的Panel方法,对成人SR-FSGS进行相关基因检...
- 刘韵子史曼曼杨明鑫刘剑张春丽俞夏莲郝旭章慧娣任红王朝晖谢静远陈楠
- 文献传递
- 肾小管上皮细胞C/EBPα条件性敲除小鼠的构建及鉴定
- 2016年
- 目的·构建肾小管上皮细胞C/EBPα条件性敲除小鼠,并进行表型鉴定,为进一步研究C/EBPα在肾间质纤维化中的作用奠定基础。方法·利用C/EBPα^(flox/flox)和pepck-Cre^+转基因小鼠进行饲养和杂交;将繁殖产生的第1代小鼠再次进行交配,得到第2代小鼠。通过PCR鉴定出基因型为C/EBPα^(flox/flox).pepck-Cre^+的小鼠(C/EBPα^(-/-)小鼠)。采用RT-q PCR及免疫组织化学法分别检测肾组织中C/EBPαmRNA和蛋白表达水平。应用H-E染色、Masson染色观察6~8周龄C/EBPα^(-/-)小鼠及野生型(WT)小鼠肾脏组织形态学改变。结果·2种转基因小鼠繁殖产生的第2代小鼠基因型符合孟德尔遗传定律,交配后获得C/EBPα^(-/-)小鼠。与WT小鼠相比,C/EBPα^(-/-)小鼠肾脏中C/EBPαmRNA及蛋白表达水平下降,光学显微镜下肾脏组织形态无明显改变。结论·应用Cre-loxp系统可以成功地敲除小鼠肾小管上皮细胞中C/EBPα基因,且在基础情况下C/EBPα^(-/-)小鼠肾脏组织无明显形态学改变。
- 应霁刘剑张沥文仲芳周芳芳王伟铭
- 关键词：C/EBPΑ肾小管上皮细胞
- 新一代测序技术在局灶节段性肾小球硬化遗传学研究中的应用被引量：1
- 2016年
- 局灶节段性肾小球硬化(FSGS)是我国常见的肾小球疾病之一。近年来,新一代测序技术的出现和发展已广泛应用于基因突变检测、SNP测定和连锁分析,其具有高通量、费用相对低等优势,是研究FSGS遗传学发病机制的良好方法,并为临床遗传学诊断提供了有利的依据。本文对新一代测序技术在家族性FSGS中的研究进展及前景进行综述。
- 刘剑陈楠
- 关键词：局灶节段性肾小球硬化测序技术
- 转化生长因子β1对肾小管上皮细胞C/EBPα及相关核转录因子表达的影响
- 2015年
- 目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),利用TGF-β1分别在不同质量浓度(5和10 ng/m L)和不同时间点(0、4、12、24 h)刺激HK-2细胞,收集细胞总RNA和蛋白(核蛋白和总蛋白)以及细胞上清液。应用realtime PCR法和Western blotting检测C/EBPα和核转录因子PPARγ以及上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白α-SMA、E-cadherin的表达变化;ELISA方法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平。结果 TGF-β1(5 ng/m L)刺激HK-2细胞24 h后C/EBPα蛋白与PPARγ变化一致,差异均无统计学意义(P>0.05);E-cadherin表达减少。TGF-β1(10 ng/m L)分别刺激0、4、12、24 h后,核蛋白中C/EBPα在12 h时表达明显降低,PPARγ在4 h表达升高。以TGF-β1 10 ng/m L刺激HK-2细胞12 h后,C/EBPα、PPARγ、E-cadherin mRNA分别降低70%、50%和90%(P<0.05)。以10 ng/m L TGF-β1刺激HK-2细胞后,MCP-1在12、24 h时分别升高6倍和10.67倍。结论 C/EBPα参与TGFβ1诱导的肾间质纤维化过程,并且与间质纤维化过程中的炎症反应和EMT过程相关;且在此过程中,与PPARγ相互作用,促进或抑制肾间质纤维化。
- 杜云蕾刘剑应霁戴芹徐丽梨王伟铭
- 关键词：转化生长因子Β1单核细胞趋化蛋白1过氧化物酶增殖物激活受体Γ
- 血管紧张素转换酶基因和血管紧张素原基因多态性与IgA肾病易感性的研究:荟萃分析
- 目的 原发性IgA 肾病(IgAN)是我国最常见的肾小球肾炎,其发病机制至今尚未明确.近年来大量研究发现血管紧张素转换酶(ACE)的D 等位基因和DD 基因型与亚洲人群的IgA 肾病发病有关,但亦有学者报道与其无关,尚无...
- 杨梦刘剑谢静远王伟铭陈楠
- 阿霉素肾病大鼠凋亡相关基因FADD和APAF1启动子DNA甲基化的变化被引量：1
- 2012年
- 目的探讨阿霉素肾病大鼠肾脏组织中凋亡相关基因DNA甲基化的变化与疾病进展的关系。方法 12只SD雄性大鼠随机分为阿霉素肾病组和正常对照组,每组6只。阿霉素肾病组大鼠分别于首次和1周后阴茎静脉注射5 mg/kg和2.5 mg/kg阿霉素造模。于造模后8周经腹主动脉采血,处死大鼠并留取肾脏组织。对两组大鼠血肌酐(Crea)、血尿素氮(BUN)、血清白蛋白(ALB)及尿白蛋白/肌酐比值(UACR)等生化指标进行检测和比较;Masson染色观察肾脏组织病理学改变;TUNEL染色观察大鼠肾小管和肾小球细胞凋亡情况;采用Real-Time PCR技术经高分辨率熔解曲线(HRM)分析法对两组大鼠肾皮质Fas相关死亡区(FADD)和凋亡蛋白酶活化因子1(APAF1)启动子DNA甲基化进行检测,Real-Time PCR检测FADD mRNA表达。结果与正常对照组比较,阿霉素肾病组大鼠Crea、BUN和UACR显著升高(P<0.05或P<0.01),ALB明显降低(P<0.01)。病理组织学检查发现:阿霉素肾病组大鼠肾小球系膜细胞增生明显,毛细血管受压,球囊粘连;肾小管上皮细胞肿胀,间质增生、炎症细胞浸润。TUNEL染色细胞凋亡检测发现,与正常对照组比较,阿霉素肾病组大鼠肾小管和肾小球凋亡细胞数量明显增加(P<0.01)。HRM分析法和Real-Time PCR检测结果显示:与正常对照组比较,阿霉素肾病组FADD启动子DNA呈较高程度的甲基化,FADD mRNA表达明显上调(P<0.05)。结论在阿霉素肾病大鼠中,FADD基因启动子检测序列DNA甲基化程度增高,但其可能并非为影响FADD mRNA表达的主要因素。
- 刘剑仲芳徐丽梨周桥卢颖郝旭王伟铭陈楠
- 关键词：凋亡DNA甲基化高分辨率熔解曲线肾脏
