刘孝荣
- 作品数：34 被引量：86H指数：6
- 供职机构：深圳市儿童医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省卫生厅重点课题国家重大基础研究前期研究专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学经济管理生物学更多>>
- 一种艰难梭菌毒素B的PCR荧光检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种艰难梭菌毒素B的PCR荧光检测试剂盒及其应用，属于生物技术领域。该试剂盒主要包括特异性引物和探针以及PCR反应试剂，其中特异性引物和探针由艰难梭菌毒素B、内参片段的特异性引物和探针组成。该试剂盒能精准检测...
- 马东礼刘孝荣邢志浩姜含芳
- 文献传递
- 人HER2胞外区基因重组及重组蛋白的纯化
- 背景与目的:人上皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor-2,Her2/erb B2)是分子量为185 kD的具有酪氨酸蛋白激酶活性的跨膜受体蛋白(P185HER2)...
- 刘孝荣贺智敏杨芳郑春艳陈主初
- 文献传递
- 两种降钙素原检测方法的比对试验及偏倚估计被引量：2
- 2016年
- 目的比较SNIBE PCT检测和VIDAS Brahms PCT检测结果之间的相关性和一致性,估计SNIBE PCT检测结果在检测阈值处的偏倚,从而评价SNIBE PCT检测结果能否用于临床诊断及疗效监控。方法收集107例就诊于深圳市儿童医院的患者血清标本,同一份患者的标本同时在SNIBE仪器和VIDAS仪器上检测。采用SPSS19.0统计软件计算相关系数r,回归方程Y=aX＋b,对方程进行F检验,对方程系数进行t检验。结果经过计算r=0.995〉0.975,显著性检验结果显示,两种方法学显著相关。回归方程Y=0.969 X-0.075,F检验显示回归方程差异显著;对回归方程的两个系数进行t检验显示,截距差异无显著性而斜率的差异显著,说明两种方法存在一定的比例误差。PCT在检测阈值0.25、0.5μg/L处的预期偏倚分别为0.083、0.091μg/L,偏倚百分比分别为33.2%、18.1%。经过计算,偏倚小于5%的最低浓度为3.95μg/L。结论两种方法检测结果具有显著的相关性。回归方程差异显著,但二者存在一定的比例误差。SNIBE PCT在3.95~100.00μg/L范围内偏倚小于5%,可以用于临床疗效监控,但需要重新评价SNIBE PCT检测阈值及检测低限。
- 马东礼曹科黄宝兴刘孝荣王丹
- 关键词：降钙素原偏倚
- TCRP1通过BCR-ABL和AKT1蛋白调控CML细胞的增殖
- 【背景】绝大部分CML患者存在9号和22号染色体易位,产生BCR/ABL融合蛋白,它具有较强的酪氨酸激酶活性,能促进AKT1等蛋白的持续磷酸化,从而促进细胞增殖与存活,在CML细胞的恶性增殖中起到了核心作用。然而BCR/...
- 刘孝荣马东礼陈小文刘四喜麦惠容王晓东袁秀丽文飞球
- 关键词：BCR-ABL蛋白
- 文献传递
- HER2介导乳腺癌细胞多药耐药的作用及机制被引量：14
- 2005年
- 目的筛选HER2高表达乳腺癌细胞化疗耐受的药物种类,探讨HER2介导的乳腺癌多药耐药的机制。方法构建HER2稳定高表达的乳腺癌细胞MCF-7/HER2模型;MTT法检测该细胞对多种临床常用的抗乳腺癌药物的敏感性;Hochest33258染色观察药物诱导的MCF-7/HER2的凋亡率,并采用聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞中bcl-2和survivin基因的mRNA表达。结果MCF-7/HER2细胞对Taxol,MMC,5-FU,VP-16及TSPA的耐药指数分别为对照细胞的74,22,2.5,3.5和2.8倍,出现了明显的药物抗性(P<0.05);而对CDDP,ADM,VBL,VCR,NBV和MTX等的耐药指数与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);由Taxol,MMC,5-FU,VP-16诱导的MCF-7/HER2细胞凋亡率明显低于对照细胞;MCF-7/HER2细胞survivin基因表达明显高于对照组,而bcl-2基因表达与对照组比较,差异无统计学意义。结论HER2可介导乳腺癌细胞对Taxol,MMC,5-FU,VP-16和TSPA等的多药抗性,这种多药抗性的产生可能与HER2上调survivin表达所致的凋亡抗性有关。
- 丁渭郑春艳贺智敏吕辉刘孝荣余艳辉陈主初
- 关键词：乳腺癌表皮生长因子受体2存活素药物耐受性
- HLCDG1基因siRNA表达质粒的构建及其对A549细胞周期和增殖的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:本研究旨在应用RNA干扰技术,诱导转基因肺癌细胞HLCDG1基因沉默并观察其对肺癌细胞周期和增殖的影响。方法:构建HLCDG1基因短小干扰双链RNA表达载体,筛选HLCDG1基因表达沉默的肺癌细胞株并应用MTT和流式细胞仪分析这一肺癌细胞株增殖和细胞周期分布状况。结果:根据siRNA表达载体的设计原则,构建了能在哺乳动物细胞稳定表达的siRNA载体5个(4个位点匹配实验组和1个位点错配对照组),依次命名为pHL-si-1、pHL-si-2、pHL-si-3、pHL-si-4和pHL-si-c。上述载体分别与表达HLCDG1的重组体pcDNA3.1(+)/HLCDG1共转染A549细胞,筛选到一株共转染pHL-si-1载体和pcDNA3.1(+)/HLCDG1重组体的A549细胞,它几无HLCDG1基因表达,这株细胞暂命名为A549-HLCDG1-si-1。MTT和流式细胞仪分析表明,A549-HLCDG1-si-1细胞增殖能力明显提高,进入S期和G2+M期增多,滞留G1期减少。结论:采用RNAi技术特异阻断HLCDG1基因表达,验证了HLCDG1基因对A549肺癌细胞有生长抑制作用。
- 邹飞雁李峰陈主初贺智敏吕辉刘孝荣欧阳咏梅
- 关键词：A549细胞细胞周期
- TCRP1在慢性髓系白血病细胞中的表达及其对细胞增殖的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨舌癌耐药相关基因（TCRP1）在慢性髓系白血病细胞增殖中的可能作用，为探寻白血病的致病机制提供新思路。方法用实时定量PCR和Western blot的方法检测慢性髓系白血病患者外周血单核细胞（PBMC）和K562细胞系中TCRP1的表达，在K562细胞中干扰TCRP1的表达，用四氮唑蓝化合物（MTS）和软琼脂克隆形成实验来检测细胞的增殖，用Westernblot实验来检测蛋白激酶B（AKT）的表达及其磷酸化水平。结果在慢性髓系白血病患者PBMC中，TCRP1的mRNA和蛋白水平的表达量均高于正常对照（P〈0．05），MTS实验和软琼脂克隆形成实验结果表明干扰TCRP1表达后，K562细胞的增殖显著减慢（P〈0．05）。干扰TCRP1后，AKT蛋白的表达量不变，而其磷酸化水平显著降低（P〈0．05）。结论TCRP1在慢性髓系白血病细胞中高表达，TCRP1可能通过AKT的磷酸化水平来影响K562细胞的增殖。
- 刘孝荣文飞球马东礼刘四喜蔡德丰李越潘洪鑫
- 关键词：癌基因白血病髓样细胞增殖舌肿瘤
- 一种消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒及其应用
- 本发明公开了一种消化道腺病毒的PCR荧光检测试剂盒及其应用，属于生物技术领域。消化道腺病毒主要包括人类腺病毒40型和41型，该试剂盒针对人类腺病毒40型和41型设计特异性引物和探针以及PCR反应体系，其中特异性引物和探针...
- 马东礼刘孝荣邢志浩姜含芳邓栩文
- 文献传递
- 人源性抗HER2胞外段Fab噬菌体抗体库的构建及筛选被引量：3
- 2011年
- 目的:构建全人源抗HER2胞外段(HER2 ECD)噬菌体Fab抗体库,从中筛选出特异性的抗体,并对其进行鉴定。方法:体外致敏并用EB病毒(EBV)转化HER2高表达乳腺癌患者的外周血单核细胞(PBMC),用PCR分别扩增重链Fd和轻链κ/λ基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次克隆入噬菌体载体pComb3中,并电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建抗HER2 ECD人源化Fab噬菌体抗体库。以纯化HER2 ECD蛋白为抗原进行3轮固相淘选,富集抗HER2 ECD的抗体,并随机挑选克隆进行ELISA,获得的阳性克隆进一步以Western blot鉴定其抗原结合活性,对其中活性最高的克隆进行DNA测序。结果:构建了容量为2.5×107的抗HER2 ECD的Fab噬菌体抗体库,并筛选获得了4株与HE2 ECD特异性结合的阳性克隆,Western blot分析显示其与HER2 ECD能较好的结合。选取结合活性最高的阳性克隆进行DNA序列分析,结果显示其重链可变区、轻链可变区分别与人胚系免疫球蛋白基因有高度的同源性。结论:成功构建了全人源抗HER2 ECD噬菌体抗体库,并筛选出抗HER2 ECD特异性较强的噬菌体克隆,为获得新的有临床应用价值的HER2 ECD抗体提供了实验基础。
- 张为家刘孝荣李官成贺智敏
- 关键词：EB病毒转化噬菌体抗体库FAB抗体
- 检测白血病二氢叶酸还原酶融合基因的方法、引物及试剂盒
- 本发明提供了引物对和探针组合，本发明还提供了所述的引物对和探针组合在筛选治疗白血病的药物中的应用；本发明同时还提供了含有该引物对和探针组合的试剂盒及应用，以及基于引物对和探针组合或试剂盒的筛选治疗白血病的药物的方法和系统...
- 马东礼刘孝荣麦惠容蔡德丰肖伟伟曹科姜含芳
- 文献传递
