刘淼
- 作品数:8 被引量:4H指数:1
- 供职机构:东北农业大学更多>>
- 发文基金:博士科研启动基金更多>>
- 相关领域:生物学农业科学医药卫生文化科学更多>>
- 成纤维细胞生长因子21在抵抗素引发胰岛素抵抗的肝细胞模型中的糖代谢调节作用被引量:3
- 2013年
- 抵抗素是2001年Steppan等发现的一种与胰岛素抵抗有密切联系的细胞因子.本研究探讨了成纤维细胞生长因子21(FGF-21)在抵抗素过表达导致胰岛素抵抗的肝细胞中的糖代谢调节作用.构建人抵抗素真核表达载体,转染HepG2细胞,利用流式细胞仪筛选出过表达抵抗素的HepG2模型细胞,分别用不同浓度的胰岛素和FGF-21刺激细胞,用GOD-POD法检测细胞的葡萄糖摄取情况,利用实时荧光定量PCR方法检测抵抗素转染后及FGF-21处理后细胞GLUT1、PPAR-γmRNA表达的变化.PCR鉴定结果表明过表达抵抗素的HepG2模型细胞构建成功.GOD-POD法检测结果证明,模型细胞对胰岛素敏感性降低,但FGF-21仍能有效调节模型细胞的葡萄糖摄取,且呈现剂量依赖关系.实时荧光定量PCR方法检测发现,抵抗素转染后HepG2细胞GLUT1 mRNA表达增加,经FGF-21刺激后模型细胞与对照细胞相比GLUT1 mRNA的表达仍有上升趋势,PPAR-γ的变化不显著.上述结果表明,抵抗素过表达的肝细胞,对胰岛素敏感性降低,产生胰岛素抵抗,但FGF-21仍能有效调节其葡萄糖代谢.
- 刘淼王文飞刘铭瑶赵景壮白银郭茉任桂萍李德山
- 关键词:抵抗素胰岛素抵抗HEPG2
- 抗旱耐盐基因TaDREB3a 转化大豆的研究
- 刘淼
- 关键词:大豆农杆菌介导法转基因抗逆性
- 大智移云视域下高校《财务会计》课程思政建设与实践探讨
- 2023年
- 课程思政是一种综合教育理念,是立德树人的重要途径。在大智移云的时代下,会计教育对财务人员的德育培养与专业培养进行融合。对财务会计课程思政的必要性进行阐述,分析《财务会计》课程现状及存在的问题,进行财务会计课程思政建设与实践探讨,对于培养学生自主学习与创新发展能力,全面提升财务会计课程教学效果具有重要意义。
- 温薇刘妍刘淼贾军华
- 关键词:教学设计
- 通过转小麦DRE结合转录因子TaDREB3a提高大豆抗非生物胁迫能力的研究
- 干旱,低温和高盐胁迫造成作物产量损失的重要因素。分子及基因组水平研究表明:不同的转录调控途径参与响应基因的表达。一个从小麦中克隆出来的转录因子-TaDREB3a已被证明具有
- 刘淼王志坤武小霞韩英鹏马有志邱丽娟李文滨
- 文献传递
- 快速筛选高水平稳定表达成纤维细胞生长因子-21真核细胞株新方法的建立被引量:1
- 2012年
- 成纤维细胞生长因子-21(FGF-21)是成纤维细胞生长因子家族的一名新成员,其研究已成为世界糖尿病研究的新热点,并有望成为治疗2型糖尿病的新型药物.然而,应用真核表达系统,更加快速、高效生产更接近天然状态的FGF-21蛋白并对其生物学功能进行的研究,至今尚未报道,因此建立高效稳定的FGF-21真核表达系统至关重要.本研究以FGF-21为目的基因,利用谷氨酰胺合成酶基因(GS)和绿色荧光蛋白基因(EGFP)作为筛选标记,分别构建了单基因表达载体Pee12.4-FGF-21-Pee6.4-EGFP(Peedual)、Pee12.4-FGF-21-IRES-EGFP(PeeIRES)和双基因的真核表达载体Pee12.4-FGF-21-IRES-EGFP-Pee6.4-FGF-21(Peedual-IRES),分别转染CHO-K1SV细胞后,通过GS加压和流式细胞术(在488 nm波长的激发光下能检测到EGFP绿色荧光)双筛选系统快速有效获得了稳定高效表达目的蛋白的细胞系.应用SDS-PAGE、Western印迹和ELISA检测细胞系目的蛋白的表达及差异,并通过HepG-2细胞糖吸收模型进行蛋白活性检测.研究结果表明:两个筛选系统结合使用,更好更快地筛选到了稳定转染并高效表达目的蛋白的细胞系,而且与单基因的载体相比,双基因载体Peedual-IRES在操作条件一致的情况下,目的蛋白表达量显著提高且均具有生物活性.本研究建立了省时、高效的真核表达平台,为FGF-21在真核水平上的高表达提供了一个新的方法.
- 张雅坤王文飞何昆叶贤龙刘淼韩苗苗刘铭瑶李德山
- 关键词:真核表达流式细胞术FGF-21
- FGF-21在抵抗素引发胰岛素抵抗的肝细胞模型中的糖代谢作用
- 随着人们生活水平的不断提高,糖尿病逐渐发展成为全球性疾病,严重影响人类健康。胰岛素抵抗是指机体对胰岛素敏感性降低,是2型糖尿病发生发展的重要机制,与多种代谢异常有关。肝脏作为人体内重要的血糖调控器官,也是发生胰岛素抵抗的...
- 刘淼
- 关键词:抵抗素胰岛素抵抗2型糖尿病糖原合成
- 文献传递
- 抗旱基因转化大豆及安全性评价
- 利用农杆菌介导法,将TaDREB3外源基因转化大豆子叶节外植体中,并获得稳定遗传的T5代高世代株系,转基因植株与野生型植株相比抗旱性显著提高。转TaDREB3基因抗旱大豆的三个株系T-DREB3-1~T-DREB3-3于...
- 李文滨王志坤刘淼张彬彬武小霞丁伟
- 关键词:大豆抗旱安全性评价
- 一种提高寒地黑土区土壤肥力的方法
- 一种提高寒地黑土区土壤肥力的方法,本发明涉及提高土壤肥力的方法。本发明是要解决北方寒地黑土区现有的栽培方法造成土壤肥力急剧降低的技术问题,而提供一种提高寒地黑土区土壤肥力的方法。本发明的方法是采用饲料油菜、玉米和大豆三年...
- 肖佳雷尹静来永才李炜毕影东李琬刘淼董慧
- 文献传递