卢永干
- 作品数：28 被引量：120H指数：8
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 核酸探针技术研究进展被引量：5
- 1993年
- 为有效地控制和治疗疾 病,当前极需研究快速、可 靠、高度特异的诊断技术。因 通常使用的免疫学试验方法往往满足不了这些要求,不能可靠地区分两个紧密相关的种(或株);不能真实地说明动物当时的健康状况。随着科学技术和工业生产的发展,在今后的日子里,核酸探针、限制酶分析(REA),聚合酶链反该(PCR),单克隆抗体和ELISA等分子生物学诊断技术将会很快地走出科学家的实验室,成为广大的野外兽医和实验室工作人员诊断疾病的有力武器。
- 卢永干
- 关键词：核酸探针原虫
- 蔗糖密度梯度法定量口蹄疫完整病毒粒子(146S)的特异性研究
- 2012年
- 为验证蔗糖密度梯度法检测口蹄疫完整病毒粒子(146S)的特异性,选择pH值6.0、5.0、4.0 PBS酸解处理3批提纯后的146S灭活抗原液,并将酸解后样品进行146S检测,发现8至11级份OD259峰值消失,146S含量由酸解前的1.77、6.60、3.67μg/mL至酸解后完全不能检测到。同时对3批不含病毒的细胞液按抗原纯化灭活工艺处理后进行146S检测,结果显示3批细胞液在8至11级份均没有明显吸收峰,而且其OD259值与PBS空白对照OD259值基本平行一致,说明不含病毒的细胞液对检测结果没有明显干扰。试验证明,蔗糖密度梯度法定量FMD病毒液中146S含量具有很好的特异性。
- 刘玉梅刘飞孙艳琪张立华董俊余赵丽霞范秀丽刘国英卢永干
- 关键词：FMDV特异性
- 抗口蹄疫蛋白疫苗与DNA疫苗混合物的免疫原性研究被引量：8
- 2001年
- 目的 研究抗口蹄疫蛋白及DNA疫苗混合物免疫原性。方法 以O型口蹄疫病毒 (FMDV)VP1免疫活性肽基因串连片段取代猪IgGH链基因可变区的CDR3区构成融合基因。然后分别与原核表达载体pET2 8b及真核表达载体pCDM- 8构建抗口蹄疫蛋白疫苗pET2 8b -FH及DNA疫苗PCDM -FH。用蛋白疫苗 pET2 8b -FH和DNA疫苗 pCDM -FH及其混合物免疫猪后 ,用攻毒实验检测其效果。结果 攻毒后 ,抗口蹄疫蛋白疫苗 pET2 8b -FH及DNA疫苗pCDM -FH单独免疫能分别使猪发病推迟 10天和 1天 ,症状减轻 ;而混合疫苗免疫效果比阴性对照好而不及这两个疫苗单独免疫效果。结论 抗口蹄疫蛋白疫苗 pET2 8b -FH及DNA疫苗pCDM -FH单独免疫能使猪发病推迟 ,症状减轻 ;而混合疫苗免疫效果较差 ,免疫方法仍需改进。
- 赵凯张震宇卢永干郑兆鑫
- 关键词：FMDV蛋白疫苗DNA疫苗口蹄疫病毒FMD
- 聚合酶链反应诊断动物病毒的研究进展被引量：2
- 1994年
- 卢永干
- 关键词：聚合酶链反应动物病毒病
- 口蹄疫病毒非结构蛋白3abc基因的克隆与表达被引量：10
- 2003年
- 口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus , FMDV)非结构蛋白(NSP)-3ABC可用于注苗与感染动物的鉴别诊断,合成该基因的PCR引物,并在引物5 端和3 端分别加入含BamH I和Hind III限制性酶切位点序列。以FMDV毒株基因组RNA为模板,利用RT-PCR技术扩增3abc基因,得到的基因片段与T载体连接,转化DH5α。提取重组载体pT-3ABC,经BamH I/Hind III双酶切后与载体pET32a连接,转化宿主菌BL21(DE3)plysS,IPTG诱导表达目的蛋白。SDS-PAGE及Western Blotting检测和鉴定结果表明,在大肠杆菌中成功表达了NSP-3ABC蛋白,分子量约56kDa,且该表达产物可与FMDV感染的动物血清产生免疫反应。ELISA试验结果显示,表达蛋白可用于FMDV注苗与感染动物的鉴别诊断。
- 尤永进朱彩珠葛艳陈波张强饶忠徐泉兴卢永干
- 关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白3ABC基因基因克隆口蹄疫RT-PCR
- 鸡传染性法氏囊病病原的分离被引量：1
- 1992年
- 鸡传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种高度接触性传染病。由于IBDV含有呈节片状的双股RNA,这种排列方式允许进行可能的遗传重组和抗原结构的改变,从而导致了新的血清亚型(变型毒株)的产生。
- 柳纪省卢永干赵海燕龙光耀方玉萍
- 关键词：鸡病病原IBD
- 应用反转录-聚合酶链反应检测口蹄疫病毒被引量：17
- 1998年
- 建立了一种适用于检测动物（猪、牛、羊）组织（肌肉、淋巴结、脊髓、扁桃体和蹄冠皮）和牛食道－咽部分泌物（Ｏ－Ｐ液）中的口蹄疫（ＦＭＤ）病毒核酸（ＲＮＡ）的反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术。引物对是人工合成的两条２０ｍｅｒ寡核苷酸片段，它们的序列相应于ＦＭＤ病毒结构蛋白ＶＰ１基因后２／３区段，在４个血清型之间基本一致（保守）。ＰＣＲ产物经琼脂糖凝胶电泳检测。试验结果表明，ＲＴ－ＰＣＲ具有良好的特异性，属该４个血清型的各个毒株都获得了预计长度的ＤＮＡ片段；而相关的小ＲＮＡ病毒科的猪水泡病（ＳＶＤ）和柯赛奇Ｂ５（Ｃｏｘ．Ｂ５）病毒（特异性对照），及未感染的细胞培养物和动物组织（空白对照）都是阴性。与常规检测方法相比，该ＲＴ－ＰＣＲ的检测灵敏度提高６－１２倍，最高可检测２０ＴＣＩＤ５０（细胞毒）或０．１６～０．３２ＬＤ５０（组织毒）的病毒量，二次扩增还可提高检测灵敏度１００倍。因为直接利用组织样品，检测试验快速简便，可在２４小时内获得结果。应用该方法已检测了２３２份组织样品和５８份Ｏ－Ｐ液样品。
- 朱彩珠卢永干邱孝高赵启祖谢庆阁张维德员美蓉杨福荣张强
- 关键词：RT-PCRFMDV动物组织
- 反刍动物食道及咽部粘液探杯
- 本实用新型提供了一种反刍动物食道及咽部粘液探杯，由采集杯、拉杆和把柄环组成，其特征在于所述采集杯设在拉杆的前端，采集杯的杯口为向外的斜刃，朝向拉杆一侧开口；拉杆的后端设一把柄环。所述采集杯的杯体为圆筒状，杯底外缘为半圆形...
- 常惠芸幺小云丛国正独军政邵军军林彤卢永干谢庆阁
- 文献传递
- 犊牛甲状腺细胞的培养和应用
- 1989年
- 犊牛甲腺(CTh)初代细胞是一种对多种病毒敏感的细胞。W.A.Snowdon(1966)指出,对于口蹄疫病毒(FMDV)来说,CTh细胞对其的敏感性比犊牛肾细胞、仔猪肾细胞、幼仓鼠肾传代细胞(BHK_(21))、乳鼠高100～1000倍。所以自1963年以后,几乎所有的牛咽部一食道刮取物的病毒分离试验(FMD查毒试验)都采用CTh细胞。另外据W.Plowright和D.Ferris(1961)报道,作者用CTh细胞成功地分离到了用牛肾细胞、羊肾和睾丸细胞难以获得的牛恶性卡他热病毒。国内,对CTh细胞的培养和研究甚少,王则兴等(1983)曾报道过有关这方面的工作。为满足活畜进口检疫工作的需要,我们参考国外有关资料,成功地培养了CTh细胞,并试用于进口动物的检疫。
- 赵海燕孔令智贠美蓉卢永干
- 关键词：犊牛甲状腺细胞培养
- 1997年台湾省口蹄疫流行概况被引量：14
- 1998年
- １９９７年台湾省口蹄疫流行概况卢永干（中国农业科学院兰州兽医研究所７３００４６）１９９７年，我国台湾省发生了８０年不遇的口蹄疫（ＦＭＤ）流行，现将从国际互联网上获得的最新信息报告如下。１流行情况３月１４日，台湾省新竹县的一个牧场（ＨＣ１）首先报告了第...
- 卢永干
- 关键词：口蹄疫
