叶菁
- 作品数：139 被引量：393H指数：10
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金军队医药卫生科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 超抗原SEA的基因克隆、原核表达与鉴定被引量：7
- 2002年
- 目的 构建pRSET SEA重组表达载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,诱导表达超抗原葡萄球菌肠毒素A(staphylococcalenterotoxinA ,SEA) ,进行分离、纯化及westernblot鉴定。方法 采用PCR技术 ,从产SEA的葡萄球菌标准菌株FRI1 0 0基因组DNA中获得SEA全长序列 ,克隆入pUC1 9中 ,进行测序 ,构建pRSET SEA表达质粒 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)pLysS ,通过异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (isopropyl beta D thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达 ,分离、纯化及westernblot鉴定。结果 PCR获得超抗原SEA基因片段 ,DNA测序结果与文献报道一致 ;构建了pRSET SEA表达质粒 ,并成功地诱导表达出32 0 0 0u的蛋白 ;Westernblot鉴定所得蛋白能够与SEA单克隆抗体特异性结合。结论 本研究成功地克隆了SEA全长 ,并进行了原核表达和分离、纯化 ,获得了SEA蛋白。
- 叶菁隋延仿李增山陈广生张秀敏曹云新
- 关键词：葡萄球菌肠毒素A超抗原原核表达PCR
- 软组织肉瘤患者Th1/Th2亚群漂移研究被引量：5
- 2000年
- 目的 :观察软组织肉瘤患者T淋巴细胞亚群中Th1/Th2的变化 ,为细胞因子免疫治疗提供依据。方法 :应用放射免疫分析法以及酶联免疫分析法检测 10例软组织肉瘤患者及 10例健康志愿者血清中IL 2、IL 4、IL 6、IL 10、IL 12的含量 ,检测外周血单个核细胞培养上清中IL 2、IL 4含量。结果 :软组织肉瘤患者血清及培养上清中IL 2、IL 12减少 ,而IL 10、IL 4、IL 6含量增加。经过植物血凝素刺激的培养淋巴细胞上清液中的IL 4含量显著增加 ,而IL 2显著降低。结论 :软组织肉瘤患者体内存在Th1/Th2平衡失调 ,其中Th1亚群功能抑制 。
- 郭爱林隋延仿范清宇张盈华殷缨叶菁
- 关键词：软组织肉瘤漂移TH1/TH2亚群免疫疗法
- HNF4α-PPARα相互调节在NAFLD中的意义
- 目的 1.研究人体NAFLD各个阶段组织PPARα和HNF4α的表达变化;2.明确HNF4 α和PPARα对脂代谢的相互作用方式;3.明确PPAR α和HNF4 α对细胞内TG含量和脂滴数量的影响.方法 1.选取人体正常...
- 黎瑶童南伟叶菁邱平
- 应用Photoshop软件合成FISH HER-2多色荧光图像被引量：1
- 2013年
- 人类表皮生长因子受体-2（HER-2/neu,erbB-2）是一种相对分子质量185 kDa的跨膜受体,在25%～30%的原发性乳腺癌中HER-2/neu基因过表达。赫塞丁（Herceptin）是一种重组DNA衍生的人源化抗p185HER2嵌合抗体,可特异性结合p185HER2。由于赫塞丁治疗是以HER-2为靶点的靶向性治疗,因此只有HER-2过表达的患者应用该药才可能有效[1-3]。
- 王文勇赵一龄王伯沄叶菁张素珍黄晓峰
- 关键词：PHOTOSHOP软件FISH
- 肝癌靶向性超抗原基因疫苗的设计和预测被引量：6
- 2003年
- 目的 :探讨AFP顺式作用元件调控的肝癌特异性减毒超抗原疫苗 (SEA(D2 2 7A) Linker CD80tm)设计的合理性。方法 :应用核酸和蛋白质分析软件GeneConstructionKit2 .0、ANTHERPRO5 .0、JAMBW1 1和www .expasy .com网站提供的方案 ,分析重组体的开放读框以及融合蛋白的可及性、柔性、抗原性和疏水性 ,并作了跨膜区和二级结构模拟。结果 :重组体的转录受AFP顺式作用元件调控 ,Linker所在部位柔性高 ,可及性弱 ,不改变两侧蛋白分子的抗原性和疏水性。融合蛋白表达后 ,被CD80tm锚定于肝癌细胞表面 ,超抗原部分 (SEA)表达在细胞膜外 ,二级结构预测Linker不改变蛋白结构 ,完全符合作者设计疫苗的初衷。结论 :重组疫苗设计合理 ,特异性高 ,融合蛋白有很大可能保留了SEA和CD80tm的理化特性 ,为进一步的实践操作提供了可靠的理论基础。
- 禄韶英隋延仿李增山潘承恩武文叶菁
- 关键词：肝癌
- 以CpG-ODN为佐剂的MAGE-n蛋白疫苗的免疫学作用及抗肿瘤效应被引量：2
- 2006年
- 目的制备人黑色素瘤抗原-n(MAGE-n)蛋白疫苗,研究含CpG基序的寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)联合MAGE-n蛋白疫苗,诱导小鼠产生的免疫应答,及在肿瘤免疫治疗中的作用。方法对含有MAGE-n原核表达质粒pGEX-MAGE-n的大肠杆菌DH5α进行诱导表达和分离纯化,作为MAGE-n蛋白疫苗,人工合成CpG-ODN作为佐剂,以C57BL/6小鼠为实验动物进行免疫接种;采用ELISPOT、LDH释放试验、血清ELISA法检测小鼠的细胞免疫和体液免疫反应;通过观察瘤体积和生存期了解疫苗的抗肿瘤效果。结果联合应用CpG-ODN和纯化的MAGE-n蛋白,能诱发C57BL/6小鼠产生较强的MAGE-n特异性的细胞和体液免疫应答;在MAGE-n阳性的B16肿瘤的免疫治疗中,可以减缓肿瘤的生长速度,延长荷瘤鼠的生存期。结论以CpG-ODN作为佐剂的MAGE-n蛋白疫苗,可以诱导C57BL/6小鼠产生MAGE-n特异性的免疫应答,对荷瘤鼠有较好的抗肿瘤效果,为肿瘤免疫治疗提供了一条新的途径。
- 黄亚渝童卫马加海叶菁陈广生隋延仿
- 关键词：CPG岛寡脱氧核糖核苷酸类
- 胃肠道间质瘤KIT及PDGFRA基因突变的检测及分析被引量：5
- 2012年
- 目的:检测胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumors,GISTs)KIT及PDGFRA基因的突变位点及类型,探讨其在GIST发病机制中的作用。方法:收集西京医院病理科2006年10月至2010年10月胃肠道间质瘤病例38例,男性20例(52.6%),女性18例(47.4%),从福尔马林固定石蜡包埋(formalin-fixed paraffin-embedded,FFPE)组织中提取基因组DNA。通过PCR扩增目的片段后测序,检测38例样本的KIT和PDGFRA基因突变类型。结果:在38例样本中共检测出KIT基因突变34例,其中32例发生在外显子1 1,突变形式有点突变、插入突变与缺失突变;2例发生在外显子9,均为重复性突变。同时还检出PDGFRA基因突变1例,其余3例样本为野生型。结论:大多数GISTs中存在KIT基因的突变,PDGFRA基因突变可见于部分缺乏KIT突变的GIST中。
- 张秀敏林慧叶菁郭风袁媛隋延仿李增山
- 关键词：胃肠道间质瘤石蜡组织KITPDGFRA基因突变
- 可调控的肝癌特异性基因治疗载体的构建被引量：1
- 2004年
- 目的 构建新型AFP顺式作用元件调控的基因表达载体 ,检测该调控元件的特异性和可调控性。方法 PCR扩增截短的AFP基因启动子、增强子 ,将上述片段与含有报告基因强化绿色荧光蛋白基因的载体pEGFP 1的多克隆位点连接 ,构建成为AFP基因顺式作用元件调控的肝癌特异性EGFP表达载体 (pEGFP 1 EP)。用脂质体法将表达载体转染表达或不表达AFP的肿瘤细胞系 ,荧光显微镜观测重组AFP顺式作用元件的启动活性 ,并用流式细胞术检测全反式视黄酸对它的抑制作用。结果 成功地将AFP基因启动子、增强子克隆到报告基因载体pEGFP 1的多克隆位点 ,酶切鉴定和DNA序列分析无误 ,荧光显微镜观测证实EGFP能在AFP阳性肝癌细胞特异性表达 ,1× 10 -7M全反式视黄酸对其活性有明显的抑制。结论 AFP顺式作用元件修饰的基因治疗载体 ,在基因转录水平特异性调控目的基因的表达 ,为下一步将其作为肝癌基因治疗载体奠定了基础。
- 禄韶英隋延仿李增山叶菁王文张秀敏
- 关键词：肝癌EGFP全反式视黄酸基因启动子特异性顺式作用元件报告基因
- 正常和炎症来源的人牙周膜干细胞成血管能力的比较
- 目的 比较炎症和正常牙周膜来源的牙周膜干细胞成血管的能力.方法 分离纯化正常和炎症来源的牙周膜干细胞,对其进行成血管诱导,免疫荧光染色、实时定量PCR、Matrigel assay体外检测比较其内皮细胞相关标记物的表达水...
- 叶菁王勤涛
- MAGE-1、结核杆菌HSP70与MAGE-3融合基因的构建、原核表达及分离纯化
- 目的：构建结核杆菌HSP70与肿瘤抗原MAGE-1、MAGE-3的融合基因，在大肠杆菌中进行表达，并进行分离纯化。
方法：通过PCR方法扩增MAGE-3基因片断583-945bp和MAGE-1中间片断280-5...
- 陈广生隋延仿司少艳胡沛臻宋宏萍叶菁李航张秀敏王文勇
- 关键词：免疫治疗融合基因原核表达分离纯化
- 文献传递
